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时间:2019-10-03
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1、小肠耶尔森氏菌及其检测方法一、小肠耶尔森氏菌小肠结肠炎耶尔森氏菌,简称小肠耶尔森氏菌,学名Yersiniaenterocolitica,是革兰氏阴性杆菌或球杆菌,大小为1-3.5×0.5-1.3μm,多单个散在,有时排列成短链或成堆。该菌是能在冷藏温度下生长的少数几种肠道致病菌之一,在4℃条件下能保存和繁殖。小肠耶尔森氏菌在自然界分布很广:(1)作为重要的食源性致病菌,该菌在生的蔬菜、乳和乳制品、肉类、豆制品、沙拉、牡蛎、蛤和虾等食物中也分布很广,很多国家都已将该菌列为进出口食品的常规检测项目。(2)该菌也存在于环境中,如湖泊、河流、土壤和植被。(3)该菌天然寄居在多种动物体内,如鼠、狗
2、、猫、山羊、家畜等,在港湾周围,许多鸟类包括水禽和海鸥可能是带菌者。小肠耶尔森氏菌通过污染食物(牛奶、猪肉等)和水,经粪—口途径感染或因接触染疫动物而感染,易染人群为婴幼儿。典型症状常为发热、腹痛、腹泻和呕吐。有的引起反应性关节炎,还有少数患者可表现为脑膜炎、肺炎、败血症即血液系统感染,尽管少见,但死亡率较高。二、小肠耶尔森氏菌检测方法1.细菌培养法本菌生长温度为30-37℃,但在22-29℃才能使本菌的某些特性出现。4℃时能保存和繁殖。本菌世代时间长,最短亦需40分钟左右。在SS或麦康凯琼脂上于25℃经24小时培养,菌落细小,至48小时直径才增大成0.5-3.0mm。菌落圆整、光滑、湿
3、润、扁平或稍隆起,透明或半透明;在麦康凯琼脂上菌落淡黄色,如若微带红色,则菌落中心的红色常稍深。本菌在肉汤中生长呈均匀混浊,一般不形成菌膜。1.生化鉴定法从营养琼脂平板上挑取单个菌落做生化实验,所有的反应皆在26℃±1℃培养。主要生化特性如下:①动力(26℃)阳性;②素酶阳性;③VP试验(26℃)阳性;④鸟氨酸脱羧酶阳性;⑤蔗糖有不同生化型;⑥棉子糖阴性;⑦山梨醇阳性;⑧甘露醇阳性;⑨鼠李糖阴性。2.血清凝集法小肠结肠炎耶尔森氏菌的抗原结构较为复杂,现已知有84个O抗原因子和19个H抗原因子,在同一血清型的菌株中,可含两种或更多的O抗原。小肠耶尔森氏菌在我国分布很广,菌群复杂,目前主要占
4、优势的血清型为O:3,O:5,O:8和O:9型。某些O抗原同其他细菌有共同性,如O:9与布氏菌有交叉反应,O:12血清与沙门氏菌有交叉反应等,在流行病学调查中,血清学诊断起着较为重要的作用。关于血清凝集法用的诊断血清方面,推荐天津生物芯片公司生产的小肠耶尔森氏菌全套诊断血清产品,该菌最常见的O:3,O:5,O:8和O:9型的诊断血清被纳入这套产品.3.分子生物学检测方法常规PCR检测法许文炯等利用小肠结肠炎耶尔森菌的ail基因以及毒力质粒上的virF基因应用PCR技术区分出致病菌与非致病菌。马宏伟等根据小肠结肠炎耶尔森菌的ail基因和伤寒沙门菌的Hl-d基因顺序设计2对引物,通过聚合酶链
5、反应检测食品中的小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门菌,扩增出170和458bp条带,适用于食品中小肠结肠炎耶尔森菌和伤寒沙门菌的快速检验。实时定量PCR检测法郑浩轩等应用针对致病性小肠结肠炎耶尔森菌染色体上yst基因而设计的特异引物和探针进行实时定量PCR,检测致病性(7种血清型)和非致病性(5种)小肠结肠炎耶尔森菌、耶尔森菌属内的其他菌种(8种)及其他肠道细菌(8种),特异性强,可应用于临床检测。《小肠结肠炎耶尔森菌的致病及检测研究进展》环境与健康杂志2008年8月第25卷第8期
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