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时间:2019-10-02
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1、实验五食品中粗纤维的测定一、目的与要求1.了解食品中粗纤维的检测原理和意义。2.掌握重量法测定粗纤维含量的基本操作技术。二、原理和意义纤维广泛存在于植物体内,是植物性食品的主要成分之一,包括纤维素、半纤维素、果胶、木质素、树胶等。由于它们不能被人体吸收利用,也称无效碳水化合物;但它们能够促进肠道蠕动,改善消化系统机能。每天从食品中摄取8~12g纤维,才能维持人体正常的生理代谢功能。在热的稀硫酸作用下,试样中的淀粉、糖、半纤维素和果胶等物质经水解而除去,再用热的碱溶液除去蛋白质和脂肪酸(皂化脂肪,溶解蛋白质),然后用乙醇、乙醚除去单宁、色素及残余脂肪,剩余残渣减去灰分(不溶于酸
2、碱的杂质,主要是无机物质),即得粗纤维素。三、仪器、器材和试剂1.仪器与试剂仪器器材试剂分析天平1台24目筛硫酸1瓶组织捣碎机1台锥形瓶250ml10个甲基红1瓶抽滤系统2套亚麻布氢氧化钾2瓶烘箱1个漏斗10cm10个酚酞1瓶水浴锅6台定量滤纸10盒盐酸1瓶电炉6个回形针1盒氢氧化钠1瓶高温电炉1个G2垂融漏斗(坩埚)20个95%乙醇5瓶电磁炉2个搪瓷杯4个无水乙醚3瓶烧杯250ml10个烧杯100ml10个量筒50ml10个一次性手套5包石棉坩埚20个试剂瓶5L2个滴瓶4个干燥器5个样品(水果)2.溶液配制2.1硫酸溶液(1.25%):取5L试剂瓶,先加水2000ml;取5
3、00ml量筒,加水约300ml,加浓硫酸(95~98%)62.5ml,加水至1000ml;另加加水2000ml。2.2氢氧化钾溶液(2.5%):取2.5L试剂瓶,先加水1000ml;取1000ml烧杯,称氢氧化钾62.5g,加水至1000ml;另加加水500ml。选用塑料或橡胶塞瓶。2.3甲基红(0.1%):0.1g甲基红,60%乙醇定容100ml(上次实验已配制)。2.1酚酞(1%):将1g酚酞用95%乙醇溶解,定量至100ml(分装于2滴瓶使用)。2.2氢氧化钠溶液(5%):2.3盐酸溶液(20%):2.4石棉:加5%氢氧化钠溶液浸泡石棉,在水浴上回流8小时以上,再用热水
4、充分洗涤。然后用20%盐酸,在沸水浴上回流8小时以上,再用热水充分洗涤,干燥。在600~700℃中灼烧后,加水使成混悬物,贮存于玻塞瓶中。四、测定步骤1.样品准备:干燥样品,如粮食、豆类等,称取适量样品(足够分析),粉碎过24目筛;水分较高样品,如蔬菜、水果、薯类等,称取适量样品,加一定量水打浆;2.垂容漏斗准备:取G2垂融漏斗(内放一折叠滤纸),在105℃烘箱中烘干后称重,重复操作直至恒重,程量记录。3.取250ml锥形瓶,称取10.0~30.0g捣碎样品(5.0g干样品),加入150ml煮沸的1.25%硫酸,加热使微沸,保持体积恒定(回流,或盖小漏斗),维持30min,每
5、隔5min摇动锥形瓶一次,以充分混合瓶内的物质。取下锥形瓶,立即用亚麻布过滤后,用沸水冲洗至洗液不呈酸性(以甲基红为指示剂,也可选精密pH试纸)。4.先加入75ml煮沸的1.25%氢氧化钾溶液入原锥形瓶内,将亚麻布上的残留物先洗入烧杯,再倒入原锥形瓶内;加热微沸30min后,取下锥形瓶,立即以亚麻布过滤,用沸水洗涤至洗液不呈碱性(以酚酞为指示剂,变色范围是pH8.2~10.0红色到无色,也可选精密pH试纸)。5.用水将亚麻布上的残留物洗入已干燥恒重、称量记录的G2垂融漏斗(或同型号的垂融坩埚)中,抽滤,用热水充分洗涤后,抽干。再依次用50~100ml的乙醇和乙醚洗涤各一次(乙
6、醚省略)。将坩埚和内容物在105℃烘箱中烘干后称重,重复操作,直至恒重,程量记录。6.如果样品中含有较多的不溶性(不溶于酸碱的)杂质,则可进一步用水将漏斗中的残留物洗入已干燥恒重的石棉坩埚过滤,烘干称量后,再移入550℃高温炉中灰化,使含碳的物质全部灰化,置于干燥器内,冷却至室温称量记录,所损失的量即为粗纤维量。五、结果计算1.数据记录烧杯g,烧杯去皮;水果去皮、去核,切块;称量果肉g,加水打浆,洗瓶冲洗,最终质量g。果肉果浆 X=×100%=样品质量m/g垂融漏斗质量m1(g)垂融漏斗和纤维素质量m2(g)12恒重12恒重2.结果计算m2-m1m
7、 X=×100X:样品中粗纤维的含量,%;m1:在105℃下经干燥后称得的恒重,gm2:灼烧后称得的恒重,gm:样品重量,g六、注意事项1.分发物品,清洗干燥;2.取甲基红后,清洗试剂瓶,置烘箱中;3.滤布剪成圆形滤纸状;4.购水果,打浆;5.垂容漏斗马弗炉处理,提前放入烘箱干燥;6.酸煮垂融漏斗、滤布,以备使用;7.粗纤维,就是我们平时所说的膳食纤维。它是碳水化合物中的一类非淀粉多糖,主要来源于植物的细胞壁。膳食纤维很难被人体所消化吸收,而且大多口感粗糙,在早年的营养学中就被称为粗纤维。8.半纤维素(
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