《生理科学实验作业汇编》实验1-1b-阮韦淑怡

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1、肝沪必岁实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：蟾赊骨骼肌兴奋与收缩实验同组学生姓名：沈丽莎蒋卉指导老师：虞燕琴实验1蟾赊骨骼肌兴奋与收缩实验阮韦淑怡沈丽莎蒋卉(浙江大学医学院201()级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310()58)【摘要】目的掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经-腓肠肌标木基木操作技术。观察不同刺激强度、频率对肌肉收缩的影响。方法用探针自枕骨大孔处垂直刺入，毁损蟾赊脑脊髓。用粗剪刀剪开腹壁，剪除全部躯干上部及内脏。避开神经，右手捏住脊柱，左手剥下皮肤。

2、将下肢标本置于任氏液培养皿中。洗尽双手和器械，将下肢标本俯卧，用剪刀从背侧剪去脊柱，分离出坐骨神经，用棉线打结，用玻璃分针分理处大腿部的坐骨神经，从股骨头中部剪去以上的肌肉和骨，剔除股骨上的肌肉，分离腓肠肌，在跟腱处打结，逐步游离腓肠肌，制成坐骨神经-腓肠肌标本，浸入任氏液培养皿中待用。开启计算机和RM6240多道生理信号采集处理系统。将蠟赊标本股骨固定于标本盒屮，腓肠肌的跟腱结扎线系于张力换能器的悬梁臂上，坐骨神经放在刺激电极上。将前负荷调至2g。选择“则激强度对骨骼肌收缩的影响”，单刺激，强度逐渐增加，

3、刺激波宽0.1ms,刺激强度从()」V开始，增量为0.01V,至肌肉出现最大收缩反应，连续记录肌肉收缩曲线。选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”,最大刺激强度,波宽0.1ms,频率递增方式,从1Hz到30Hz,步长1Hz,连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。针型电极接第2通道，神经干引导电极接笫3通道，选择“骨骼肌电兴奋与收缩”，双刺激，最大刺激强度，波宽0.1ms,同步触发。针型引导电极插入腓肠肌，观察刺激间隔为0.5、2.10ms时神经干动作电位、肌膜动作电位波形和腓肠肌的收缩曲线。用甘油高渗任氏液的棉花包

4、裹腓肠肌，每隔30s单刺激标木一次。记录出现有动作电位无腓肠肌收缩的吋间。结果结论【关键词】蟾蛛，骨骼肌，强度，频率，收缩蛙类的某些基本生命活动和生理功能与哺乳类动物有相似Z处，而其离体组织的生活条件比较简单，易于控制和常握。因此，蛙或蟾赊的坐骨神经-腓肠肌标本常被用来观察神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律及肌肉收缩特点等实验。L材料与方法1丄实验对象蟾赊1.2.实验试剂任氏液，甘油高渗任氏液13.实验器材RM6240多道生理信号釆集处理系统，张力换能器，针形引导电极，一维微调器，锌铜弓，探针，玻璃分针，粗

5、剪刀，银子1・4・实验方法1.4.1.毁脑脊髓去蟾蛛一只，用左手握住，使其头尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处刺入颅腔，左右搅动，捣毁脑组织，在将探针退回，刺向尾侧，捣毁脊髓，此时蟾蛛四肢松软。1.4.2.下肢标本制备用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱，左手握住鲍赊后部，右手将粗剪刀沿两侧剪开腹壁。剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷盆内。避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将处理后的下肢标本置于盛有任氏液的培养皿中。1・4・3・制备坐骨神经-腓肠肌标本洗净双手和用过的全部手术器

6、械。下肢标本俯卧，用大头针将标本固定于蛙板上，从背侧剪去脊柱，用玻璃分针游离出坐骨神经腹腔部，用棉线结扎，再用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经Z大腿部分，直至月国窝胫神经分叉处。然后剪断股二头肌腱、半腱肌和半膜肌肌腱、股四头肌肌腱，自上向下剪断所有坐骨神经分支。将连着3-4节椎骨的坐骨神经分离出来。用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所有大腿肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨，弃去上段股骨。用尖头铁子在腓肠肌跟腱下方穿线结扎,在结扎线下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，在

7、膝关节处剪断，使腓肠肌游离。将制备成功的坐骨神经腓肠肌标本用任氏液润湿的锌铜弓检测收缩功能。将标本浸入盛有新鲜任氏液之培养皿屮待用。1.4.4.实验系统连接和参数设置张力换能器输入RM6240系统第1通道，刺激输出接标本盒刺激电极。开启计算机RM6240多道生理信号采集处理系统。启动RM6240多道生理信号采集处理系统软件。仪器参数:第1通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz,扫描速度ls/div,灵敏度10-30g,时间常数为直流，滤波频率lOOHzo1.4.5.实验装置连接。将离体坐骨神经腓肠肌标

8、本的股骨插入标本盒的固定孔屮，旋转固定螺钉固定标本，腓肠肌的跟腱结扎线系于张力换能器的悬梁臂上。坐骨神经放在刺激电极上，保持神经与电极接触良好。调节一维微调器，将前负荷调至2g。L4.6.实验观察毁脑髓后，用任氏液润湿的锌铜弓刺激坐骨神经，观察肌肉反应。1.4.7.刺激强度对骨骼肌收缩的影响刺激方式：强度递增模式，刺激波宽：0.1ms,起始强度：0.1V,连续记录肌肉收缩曲线直至肌肉出现最大收缩反应（肌肉收缩曲线