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时间:2019-10-05
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1、HIV抗体检测标准操作程序天津市卫生防病中心夏建晖《全国艾滋病检测技术规范》(2004年版)共10章*样品的采集和处理*HIV抗体检测*HIV核酸定性检测*HIVRNA定量测定(病毒载量测定)*CD4+和CD8+T淋巴细胞检测*HIV抗原检测*艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防*艾滋病实验室质量管理*艾滋病实验室质量考评办法*HIV诊断试剂临床质量评估方案HIV抗体检测标准操作程序检测程序:生物安全:试验操作:室内质控:《全国艾滋病检测技术规范》中的许多内容,广泛适用于临床实验室。HIV抗体检测程序:初筛-复检-确认复检:对初筛呈阳性反应的样品
2、用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。HIV抗体检测程序:初筛-复检-确认重新采血,将两份标本一同送检HIV抗体复检化验单见《技术规范》附表2见《技术规范》附表2HIV抗体检测程序:现象一出现HIV抗体筛查阳性时,有的实验室仅是通知受检者到确认实验室采血检测,不向确认实验室送原血样和HIV抗体复检化验单。这样是不符合要求的。筛查阳性时,必须将原血样和HIV抗体复检化验单送确认实验室。最好是在送样单上注明联系电话,以便及
3、时反馈结果。HIV抗体检测程序:现象二出现HIV抗体筛查阳性时,有的单位过度重视,在没得到确认结果时,将受检者作为HIV感染者对待,造成不必要的恐慌。天津目前一般人群的HIV感染率在万分之一左右,尚属于低发区。在术前、产前筛查中会出现许多筛查阳性、经确认为阴性的情况。出现HIV抗体筛查阳性时,实验室没有必要扩大知情范围,及时送检。缩小知情范围,可能有助于减少恐慌。HIV感染者,与乙肝感染者的消毒处理措施没有什么差别。〔就传染性而言,乙肝病毒更为凶险〕生物安全《实验室生物安全通用要求》国家标准已正式发布,并于2004年10月1日正式实施。规定了实
4、验室生物安全管理和实验室的建设原则同时还规定了生物安全分级、实验室设施设备的配置、个人防护和实验室安全行为等方面内容。该标准解决了实验室安全管理存在的隐患。生物安全《全国艾滋病检测技术规范》第二章[HIV抗体检测]中提出“HIV抗体检测实验室应符合《实验室生物安全通用要求》对II级生物安全实验室(BSL-2)的各项要求。”第七章[艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防]中进一步指出“艾滋病血清学检测(包括筛查和确认实验室)、免疫学和核酸检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室(BSL-2)要求的艾滋病检测实验室中进行。”生物安全Ⅱ级生物安全实验室,是对临床实
5、验室的普遍要求,是临床实验室发展的方向。一份未知样品,无论检测项目如何,都具有相同的潜在传染性。安全投入不足,将成为今后临床实验室的重要隐患生物安全生物安全生物安全危害等级II(中等个体危害,有限群体危害)能引起人或动物发病,但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限。危害等级III(高个体危害,低群体危害)能引起人类或动物严重疾病,或造成严重经济损失,但通常不能因偶然接触而在个体间传播,或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体。Ⅱ级生物安全实验室设施和设
6、备要求(《实验室生物安全通用要求》)u实验室所用设施、设备和材料(含防护屏障)均应符合国家相关的标准和要求uBSL-2实验室满足BSL-1的要求。实验室门应带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗。应有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间。在实验室内应使用专门的工作服;应戴乳胶手套。在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件。在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器,并按期检查和验证,以保证符合要求。应在实验室内配备生物安全柜(避免的危害:气溶胶和喷溅)。应设洗眼设施,必要时应有应急喷淋装置。应通风,如
7、使用窗户自然通风,应有防虫纱窗。有可靠的电力供应和应急照明。必要时,重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。生物安全生物安全柜(避免的危害:气溶胶和喷溅)确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程包括:离心、研磨、匀浆、剧烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器(容器内部的压力可能与大气压不一致)、动物鼻孔接种、从动物或胚胎卵采集感染组织。生物安全生物安全生物安全生物安全生物安全对于已经建成的实验室,由于格局无法改变,需要提醒大家注意:应努力将工作区与休息区分离,并尽可能满足生物安全实验室
8、的其它要求。个人防护装备:手套与实验室工作服²手套:所戴手套无漏损。戴好手套后可完全遮住手及腕部,如必要,可覆盖实验室长罩服或外衣的袖子(一次性袖套)
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