2019_2020学年高中生物第2章克隆技术第6课时动物的克隆（Ⅱ）学案浙科版选修3

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1、第6课时　动物的克隆(Ⅱ)[学习目标]　1.简述动物的细胞融合技术及应用。2.描述动物细胞全能性的表现程度，说出动物难以克隆的原因。3.简述动物细胞核移植的概念和程序。4.列举动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。一、动物的细胞融合技术及其应用1.细胞融合与细胞杂交(1)细胞融合①含义：指两个或多个细胞融合成一个细胞的现象。②促融方法：灭活的仙台病毒、聚乙二醇介导、电融合技术等，其中电融合技术是效率很高的新型细胞融合技术。(2)细胞杂交①概念：基因型不同的细胞间的融合。②应用：细胞杂交中染色体容易丢失，利用杂

2、交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物(蛋白质)减少的对应关系可进行基因定位。2.单克隆抗体的制备(1)过程(2)杂交瘤细胞的特点：无限增殖，产生单克隆抗体。(3)单克隆抗体的优点：其识别抗原部位的专一性，比一般抗血清优越得多，原因是一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物。(4)单克隆抗体的应用：单抗可作为特异探针，研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及其功能。特别提醒　单克隆抗体与血清抗体比较项目分泌细胞特点生产单克隆抗体杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高产量高，易纯化分离血清抗体各B淋巴细胞特异性差、灵敏度

3、低产量低，分离困难例1　单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活增殖的细胞是(　　)①B淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　⑤杂交瘤细胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③答案　A解析　单克隆抗体的制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合时，有以下三种情况：未发生融合的细胞(B淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞)；自身融合的细胞(B淋巴细胞自身融合、小鼠骨髓瘤细胞自身融合)；骨髓瘤细胞与单个B淋巴细胞融合的杂交

4、瘤细胞。杂交瘤细胞是制备单克隆抗体必需的，因此要将其筛选出来。例2　(2019·衢州高二检测)如图为制备单克隆抗体的流程。请据图回答下列问题：(1)诱导动物细胞融合的基本原理是________________________________________________。(2)诱导动物细胞融合的方法和诱导植物原生质体融合的方法类似，两者常用的化学诱导剂是______________，两者的主要区别是可用______________________来诱导动物细胞融合。(3)过程③要获得所需要的X细胞，至少需要通过2次

5、筛选和克隆培养，其中第一次筛选的目的是获得____________。图中X细胞具有____________________________________的特点。(4)从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞融合、________________等动物细胞工程技术。答案　(1)细胞膜的流动性　(2)聚乙二醇(PEG)　灭活的仙台病毒　(3)杂交瘤细胞　既能无限增殖，又能产生特异性抗体　(4)动物细胞培养解析　(1)诱导细胞融合的基本原理是细胞膜的流动性。(2)诱导动物细胞融合的方法和诱导植物原生质体融合的方

6、法类似，两者常用的化学诱导剂是聚乙二醇，两者的主要区别是可用灭活的仙台病毒来诱导动物细胞融合。(3)融合后的细胞经过筛选才能获得所需要的目的细胞：第一次筛选是在选择培养基上培养，非杂交瘤细胞和未融合的细胞不能在此培养基上生长，杂交瘤细胞能在此培养基上生长。杂交瘤细胞具有既能无限增殖，又能产生特异性抗体的特点。(4)从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞融合、动物细胞培养等动物细胞工程技术。归纳总结　有关细胞融合与制备单克隆抗体的5个关键点(1)细胞融合完成的标志：细胞核融合成一个核。(2)杂交瘤细胞的特点

7、：兼有两个亲本细胞的特性，即在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生具有某种特异性的抗体。(3)获取单克隆抗体的场所：若在培养基中进行杂交瘤细胞培养，则从培养液中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从腹水中提取。(4)制备单克隆抗体的过程中两次筛选的目的不同。①第一次筛选：由于细胞融合是随机的，因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现，因此必须从中筛选出既能分泌抗体同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。②第二次筛选：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。(5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞诱导融合后不只产生一种细胞。

8、融合后可能存在五种细胞，即未融合的B淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B—B融合细胞、瘤—瘤融合细胞、B—瘤融合细胞。二、动物的克隆繁殖1.不同的动物细胞及全能性的表现程度(1)受精卵：具有使后代细胞形成完整个体的潜能。(2)二分裂球：具有全能性，每一个细胞都可以发育为完整的个体，可形成同卵孪生个体。(3)多能细胞：具有分化为多种组织细胞的潜能。(