电针对单纯性肥胖大鼠“LKB1-AMPK-ACC”信号通路的调控机制研究

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1、学位论文电针对单纯性肥胖大鼠“LKB1-AMPK-ACC”信号通路的调控机制研究Thestudyonregulationmechanismofelectroacupunctureon“LKB1-AMPK-ACC”signalpathwayinratswithsimpleobesity杨黎黎指导教师姓名：刘旭光研究员申请学位级别：博士专业名称：针灸推拿学论文提交时间：2017年5月论文答辩时间：2017年5月二○一七年五月万方数据成都中医药大学博士学位论文中文摘要目的：以高脂饮食诱发的单纯性肥胖SD大鼠为研究对象，以脂代谢紊乱为切入点，以“LKB1-AMPK-A

2、CC”通路为主线，观察电针对体重、Lee’s指数的减肥效应指标，血脂、血糖等代谢指标，以及“LKB1-AMPK–ACC”信号通路相关分子Leptin、ADP、LKB1、AMPKα2及ACC的基因与蛋白表达，为电针治疗单纯性肥胖提供新的分子生物学证据，研究电针治疗单方法：选取60只SD雄性大鼠，并随机分为普食组20只、高脂组40只。普食组给予普通饲料喂养，高脂组给予高营养饲料喂养。喂养10周后，把造模成功的单纯性肥胖SD大鼠随机分为电针组、模型组，各20只；将普食组大鼠入组空白对照组，共20只。将电针组大鼠固定在鼠台上，取电针刺激大鼠双侧“天枢”穴、“丰隆”穴，

3、每日一次，每次20min，两侧穴位交替使用；6天为1疗程，疗程间休息1天，共4个疗程。模型组及对照组大鼠同法固定，但不实施针刺治疗。观察大鼠整体状况以及体重、Lee’s指数等减肥效应指标的变化。实验结束后抽取眼球血，处死各组大鼠后速取其下丘脑、肝、肾及肾周、睪周脂肪组织。运用Elisa测定外周血的血脂（TC、TG、LDL-C、HDL-C）、血糖等代谢指标；运用Real-timePCR、Westernblot等方法检测“LKB1-AMPK–ACC”通路相关分子Leptin、ADP、LKB1、AMPKα2及ACC的基因与蛋白水平变化。结果：1、整体状况：造模过程中

4、各组大鼠活动正常，自由饮水进食。相较于普食组，高脂组大鼠毛发较为柔亮，排泄物较为黏稠、味臭。在治疗后阶段，模型组活动略少。2、减肥效应指标变化情况：1万方数据成都中医药大学博士学位论文（1）体重、Lee’s指数等变化情况：相比空白组，模型组、电针组治疗前大鼠体重、Lee’s指数均增加（P<0.05）；相较于模型组，电针组治疗后体重及Lee’s指数下降，具有差异（P<0.05）。（2）不同部位脂肪组织、肝肾重量及体脂比变化情况：相较于空白组，模型组肾周、附睾周脂肪组织量及肝肾重量增加（P<0.05）；相较于模型组，电针组大鼠肾周、附睾周围脂肪组织量与肝肾重量均表

5、现为不同程度的降低（P<0.05）。对比各组大鼠之间的体脂比均无差异（P>0.05）。3、血脂、血糖代谢指标变化情况：（1）血脂代谢变化情况：相比空白组，模型组血清内TG、TC、LDL-C、HDL-C含量均有不同程度的升高（P<0.05）；相比模型组，电针组大鼠治疗后血清内TG、TC、LDL-C、HDL-C含量降低（P<0.05）。与空白组相比，电针组针刺后血清内TG、TC、LDL-C、HDL-C含量趋于空白组，两组比较无差异（P>0.05）。（2）血糖代谢变化情况：相比空白组，模型组血糖水平升高，有显著差异（P<0.05）；相比模型组，电针组大鼠针刺后血糖含

6、量降低，有显著差异（P<0.05）。与空白组相比，电针组治疗后血糖含量趋于空白组，两组比较无差异（P>0.05）4、“LKB1-AMPK-ACC”通路相关分子表达变化情况（1）LeptinmRNA及蛋白表达变化情况与空白组比较，模型组大鼠LeptinmRNA和蛋白水平上升，具有统计学意义（P<0.05）；电针组大鼠LeptinmRNA和蛋白表达与模型组相比降低（P<0.05）；电针组与空白组大鼠LeptinmRNA和蛋白表达进行比较无明显差异（P>0.05）。（2）ADPmRNA及蛋白表达变化情况与空白组比较，模型组大鼠ADPmRNA和蛋白表达降低，具有统计学

7、意义（P<0.05）；电针组大鼠ADPmRNA和蛋白表达与模型组相比增高（P<0.05）；电针组与空白组大鼠ADPmRNA和蛋白水平进行比较无明显差异（P>0.05）。（3）LKB1mRNA及蛋白表达变化情况与空白组比较，模型组大鼠LKB1mRNA和蛋白表达显著降低，具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）；电针治疗后，肥胖大鼠LKB1mRNA和蛋白水平显著增高（P<0.05,P<0.01）；电针组与空白组大鼠LKB1mRNA水平进行比较，无明显差异（P>0.05）。2万方数据成都中医药大学博士学位论文（4）AMPKα2mRNA及蛋白表达变化情况与空白组比

8、较，模型组大鼠AMPKα2mRNA和蛋