【精品】农大论文

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1、吉林农业大学学士学位论文题目名称:农杆菌介导法转Hrpz基因玉米的初步检测学生姓名：郝媛媛院系：生命科学学院专业年级:07级生物工程指导教师：关淑搆职称：副教授2011年05月19H题目I摘要及关键词I1前言11.1转基因玉米的发展与检测11.2Hrpz基因11.3农杆菌介导法11.4PCR反应基本原理及意义12材料与方法22.1材料22.1.1主要仪器和设备22.1.2主要试剂22.2试验方法32.2.1溶液的配置32.2.2高盐低PH值法提取基因组32.2.3SDS法提取基因组42.2.4电泳检测42.2.5PCR扩增

2、52.2.5.1PCR基本反应体系52.2.5.2PCR循环体系52.2.5.3PCR条件优化53结果与分析53.1基因组提取结果53.2PCR提取结果64讨论7参考文献7致谢8农杆菌介导法转Hrpz基因玉米的初步检测学生：郝媛媛专业：生物工程指导教师：关淑艳摘要：本实验以农杆菌介导法转Hrpz基因的玉米自交系丹988的叶片作为材料，分别运用高盐低PH值法和SDS法对玉米基因组的提取及纯化进行研究，试图筛选出最佳的DNA提取方法。同时通过设置不同的退火温度，运用PCR技术对转化植株进行初步鉴定，然后经琼脂糖凝胶电泳法检测。

3、结果表明：SDS法较高盐低PH值法纯化效果好，并且退火温度为48°C时，扩增效果最好，并检测出阳性植三株。本实验优化了PCR反应的条件，初步证明了外源目的基因已整合到玉米基因组中，为进一步鉴定做了良好的基础。关键词：农杆菌介导法；Hrpz基因；琼脂糖凝胶电泳；SDS;高盐低PH值法；PCRAgrobacterium-mediatedgenetransferHrpztheinitialdetectionofcornName:HaoYuanyuanMajor:BiologicalengineeringTutor:GuanShu

4、yanAbstract:theexperimentwithagrobacterium-mediatedtechniqueturnedHrpzgeneinbredlines1Dan988leavesasmaterials,highsalt,usingrespectivelylowPHvaluemethodandtheSDSmethodtotheextractionandpurificationofcorngenomewerestudied,tryingtobestDNAextractionmethod.Meanwhile,b

5、ysettingdifferentannealingtemperature,usingPCRtechnologyforconversionplants,thenthepreliminaryidentificationagarosegelelectrophoresismethodtodetect・TheresultsshowthathighsaltSDSmethodlowerPHmethodhasgoodeffect,andannealingpurificationfor48°Ctemperature,amplificati

6、oneffectisbest,anddetectthepositivereasongraft.Thisexperimentconditionofoptimizedpolymerasechainreaction(PCR),initiallyprovedexogenouspurposegenehasintegratedintothecorngenome,tofurtherappraisaldoagoodfoundation.Keywords:agrobacterium-mediatedtechnique;Hrpzgenes;A

7、garosegelelectrophoresis;SDS;HighsaltlowPHvaluemethod;PCR1前言：1.1转基因玉米的发展与检测转基因作物是指将从植物、微生物及动物中分离到的目的基因，通过各种方法转移到作物基因组中，使之稳定遗传并赋予作物新的遗传性状，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。近几年，转基因玉米发展十分迅速，现已成为全球种植面积第二的转基因作物l，Jo关于转基因玉米的研究与开发在我国也受到了各方面的高度重视，并取得了显著的进展。一些基因导入玉米植株后，会使植株具有抗病虫、抗旱等优良特性，可以大

8、大促进植物生长发育、提高产量。Hipz基因就是这种基因。那么，一种或几种基因是否导入到植物中是需要有关技术来检测的。转基因作物的检测技术有基于DNA的检测方法（如PCR检测法）和基于蛋白质的检测方法（如Westem杂交，ELISA）。本实验采用的是PCR技术对转基因玉米进行检测2引。1.2Hrpz基因H