营养活性肽的分离纯化及其国内外研究【文献综述】

《营养活性肽的分离纯化及其国内外研究【文献综述】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、毕业论文文献综述食品科学与工程营养活性肽的分离纯化及其国内外研究[摘要]肽的来源广泛,种类繁多,对机体各方面都有重要的作用。近年来,各国学者对肽进行了大量的研究,对肽的种类、功能及吸收转运机制等也已经有了一定的认识。由于肽具有吸收速度快、效率高、种类多和无毒副作用等优点,被广泛应用于饲料生产、食品加工和医学等领域。本文综述了近几年来营养活性肽的分离纯化方法，肽营养的生理功能及其国内外的研究。[关键词]营养活性肽；分离和提纯；生理功能；国内外研究营养活性肽的提出经历了一个漫长的过程。自1902年伦敦大学医学院的Buyliss和Star

2、首次发现活性多肽物质———促胰激素以来[1]，人们对肽的研究逐渐深入，世界上许多科学家都在致力于活性多肽物质的研究。近一个世纪的研究表明，肽是由20个天然氨基酸以不同的组成和排列方式构成的二肽到复杂的线性和环形结构的不同肽类总称，是源于蛋白质的多功能化合物。活性肽广泛存在于自然界中,生物体很多活性物质都以肽的形式存在,，没有肽，就没有活性，没有生命[2]。食物蛋白源生物活性肽是现代营养学及食品学研究的热点和极具发展前景的功能因子，近年来受到广泛重视。本文就近几年来营养活性肽的分离纯化方法，生理功能及其国内外研究做一综述。1　肽营养的

3、提出早在1921年Boegland就提出了肽转运的可能性,随后Newey等(1960)研究发现,蛋白质在小肠内的消化产物除了氨基酸,还有大量的小肽,并且肽可完整进入肠黏膜细胞,并在黏膜细胞中进一步水解成氨基酸,而后以氨基酸形式进入血液循环[3]。大量研究表明,肽是生命活动中不可缺少的物质,影响生物体内许多重要的生理生化功能,作为神经递质、神经调节因子和激素参与受体介质的信号传导。经近半个世纪的研究,人们对肽的种类、功能和吸收等已有一定认识,并且在生产实践中也得到了初步应用[4]。1.1　营养型肽营养型肽作为蛋白合成的原料,有利于氨基

4、酸吸收,这类肽能提高日粮中氨基酸的利用率和蛋白质在体内的沉积率,还能促进矿物质元素的吸收利用,提高动物的生长性能[5]。2营养活性肽的溶解和提取2.1溶解由于肽源于蛋白,所以应先使带有活性肽的蛋白质溶解。进行细胞破碎和固液分离是必要的,这是全过程的第1步,也是肽分离纯化阶段的重要环节,它直接影响产物的回收率,也可能影响产物的纯度[6]。2.1.1匀浆匀浆是机体组织破碎常用方法之一。它的工作原理是通过固体剪切力破碎组织和细胞,释放蛋白质或肽类进入溶液。匀浆器有刀片式组织破碎匀浆器、内切式组织匀浆器、玻璃匀浆器和用于规模生产的压匀浆器4

5、种[7]。2.1.2酶解酶解就是利用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解[8]。使用此法时须根据样品细胞结构和化学组成选择适当的酶或酶系。要注意控制温度、酸碱度和酶用量。近年来,酶解法已广泛用于实验和生产。2.2提取提取是在分离纯化之前将经过预处理或破碎的细胞置于溶剂中,使被分离的生物大分子充分释放到溶剂中,并尽可能保持原来的天然状态,不丢失生物活性的过程。这一过程是将目的产物与细胞中其他化合物和生物大分子分离,即由固相转入液相,或从细胞内的生理状况转入外界特定的水溶液中[9]。2.2.1水溶液提取蛋白抽提或肽类提取一般以水溶液为主,稀盐

6、溶液和缓冲液对蛋白质或肽类的稳定性好,溶解度大,这是提取蛋白质或肽类的最常用的溶剂。用水溶液提取蛋白质或肽类时应注意盐溶变化、pH值和温度等对提取蛋白或肽类的影响,必要时控制这些因素,以减少杂蛋白或肽类对被提物的干扰。2.2.2有机溶剂提取一些与脂类结合较牢固、分子中非极性侧链较多的蛋白质或多肽,难溶于水、稀盐、稀酸或稀碱中,常需用不同比例的有机溶剂提取。常用的有机溶剂有已醇、丙酮、异丙醇和正丁酮等。这些溶剂可以与水互溶或部分互溶,同时它们有亲水性和亲脂性,因此常用来提取含有非极性侧链较多的蛋白质或肽类。3活性多肽的分离纯化方法采用

7、何种分离纯化方法主要取决于所提取组分的组织材料和所要提取物的性质。对于蛋白质或多肽,提取分离方法有盐析法、超滤法、高效液相色谱法和电泳法等3.1盐析法在溶液中加入中性盐使生物大分子沉淀析出的过程称盐析。其基本原理是:蛋白质或肽分子中的-COOH、-NH2和-OH都是亲水基因,这些基因与水相互作用形成水化层,包围于蛋白质分子周围形成的1~100nm颗粒的亲水胶体,削弱了蛋白质分子间的作用力,蛋白质表面极性基因越多,水化层越厚,蛋白质分子与溶剂分子之间亲和力越大,因而溶解度也越大[10]。亲水胶体在水中的稳定因素是电荷和水膜,因为中性盐

8、的亲水性大于蛋白质分子或肽的亲水性,所以加入大量中性盐后,夺走了水分子,破坏了膜,暴露出疏水区域,同时又中和电荷,破坏了亲水胶体,蛋白质分子即形成沉淀。这是传统的分离提纯方法。盐析法的优点是操作简便,成本低廉,对蛋白质或肽有保护作用,