考点加强课7微生物的筛选、鉴定、分离与计数

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1、考点加强课7微生物的筛选、鉴定、分离与计数1•有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题。(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种到以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和(3)为了筛选岀高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈越大说明该菌株的降解能力越o(4)通常情况下，在微生物培养过程屮，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和o无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围

2、环境中微牛物的污染。解析(1)本实验的目的是筛选出可以分解原油的高效菌株，从受原油污染的土壤中筛选出能髙效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。(4)灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。答案⑴原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法⑶强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰2.(2016•湖南衡阳模拟)回答

3、有关微生物的培养与应用问题：(1)微生物的培养需要使用培养基，不同培养基的配方不同，但一般都有碳源、氮源；在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养基时，需加入作为唯一的碳源，该培养基属于培养基；若将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是,当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生来筛选纤维素分解菌。(1)若要统计土壤样品中纤维素分解菌的数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的就能大约推测岀样品中的活菌数。(2)—同学在稀释倍数为10°的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4,则每

4、毫升样品中的活菌数是(所用稀释液的体积为0.2mL)o答案(1)水、无机盐纤维素选择刚果红透明圈(2)稀释涂布平板菌落数冃(3)1.17X1062.实现生态农业，让秸秆冋归农田的关键是获得能够高效分解秸秆的微生物。请回答下列相关问题：(1)秸秆的主要成分易被酶分解；从功能上看，筛选能产生该酶的微生物所用的培养基属于培养基。(2)甲、乙两组同学设计了两种培养基(成分见下表)：培养基硝酸钱无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水A++—++++B+++++—+注：“+”表示有；“一”表示无；CR为刚果红。A培养基(填“能”或“不能”)用于分离要筛选的分

5、解菌，原因是;加入刚果红(CR)的目的是：(2)甲、乙两组同学分别采用稀释涂布平板法和平板划线法接种。中组同学将1mL水样稀释100倍后，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别是39、38和37,据此可得出每升水样屮的活菌数为个；示意图a和b中，是甲组同学接种培养后得到的结果；乙组同学划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是图a图b解析（1）秸秆的主要成分是纤维素，易被纤维素酶分解；筛选能产生纤维素酶的微生物的培养基属于选择培养基。（2）从表中培养基的成分来看，A培养基能用于分离和鉴别纤维素

6、分解菌，原因是该培养基是固体培养基，且以纤维素粉为唯一碳源，利用刚果红来鉴定纤维素的分解情况。刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后•无法形成红色复合物，培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可据此来筛选纤维素分解菌。（3）从示意图看，图b是采用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。根据题意得知每升水样中的活菌数为38=0.1X100X103=3.8X1（）7（个）。图a是采用平板划线法接种培养后得到的结果,划线时总是从上一次划线的末端开始，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。（

7、4）为了确定培养基的灭菌是否彻底，应设置空白对照：随机取若干灭菌后的空平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。答案（1）纤维素选择（2）能纤维素粉是唯一碳源CR可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基上会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈（合理即可）⑶3.8X107图b将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落（4）作为对照2.（2016-山东济宁检测）高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉嗜热菌样品屮筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示:嗜热菌样品—--4①£1号培养基II号培养基3（

8、1）进行①过程的目的是,②过程所使用的接种方法是法。（2）从用途上来说，I号培养基展于培养基，配制时仅以作为唯一碳源；从物理状态上來说，II号培养基属于固体培养基，配制时应加入作