技术在法庭科学之应用

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1、DNA技術在法庭科學之應用ApplicationofDNATechnologytoForensicScience講者:張錦賢BSc,MPhil,PhD,MBA,MIBiol,CBiolhenrykyc@hotmail.com大綱1.法庭科學之範疇2.法證DNA技術之崛起3.現場勘查及物證樣品採集4.法證DNA測試方法:RFLP及PCR-STR5.法證DNA測試的結果分析6.法證DNA證供的評估及呈堂問題7.案例8.法證DNA分析之新發展及爭議問題法庭科學簡介法庭科學(ForensicScience),法證/鑑

2、證科學定義--法律事務的科學應用宋朝宋慈(1186-1249)洗寃集錄1.分辨扼死或溺斃2.分辨焚屍或燒死3.滴血法法庭科學範疇現場勘查(CSI)技術毒理分析(ForensicToxicology)交通意外調查文件鑑證技術(QuestionedDocuments)槍械及軍火鑑證纖維分析、工具痕跡分析血濺形態分析(BloodstainPatternAnalysis)法證DNA分析法庭會計學(ForensicAccounting)ForensicComputingandetc首宗利用ＤＮＡ技術定罪的案件兩名女學生在

3、英國一小鎮被姦殺(1983,1986)精液被檢定為A型(當地10%人口是A型)疑兇RichardBuckland承認殺害次名死者ProfAlecJeffreys應邀作DNA分析RichardBuckland是首位藉此技術脫罪者當地17-34歲男士被要求自願提供血樣本兇手ColinPitchfork是第4583名血樣本提供者(1987)傳统血型分析(conventionalbloodtyping)只可用於排除(exclude)某一疑犯分辨能力(differentiationpower)低約50%香港華人是O型血型

4、不能分析變壞樣品所需樣品份量多不能分析微量人體物質(例如:手皮細胞)法證DNA分析(forensicDNAanalysis)可用於指證某一疑犯(個體識別Individualization)分辨能力高可分析變壞樣品所需樣品份量極少,如手皮細胞等技術可被自動化現場勘查每次接觸皆留下蛛絲馬跡Everycontactleavesatrace(EdmundLocard)物證傳遞人傳人人傳物件物證樣品採集物理物證(physicalevidence)鞋印、玻璃碎、纖維等生物物證(biologicalevidence)血漬、精

5、液、唾液、毛髮、手皮細胞等遺傳學人是由無數細胞組成細胞內藏有DNA(紅血球除外)每一顆細胞的DNA/染色體特徵皆相同染色體包含很多基因基因是一對的,一個來自父親,另一個來自母親遺傳學(圖解)母父孩子法證DNA測試方法两種方法:1).RFLP分型2).PCR-STR分型:(優點):快速、簡單、能測試少量樣品及腐爛或久遠的樣品.两種方法的相同分析程序:程序一:從生物樣品提取DNA程序二:量度DNA片段/基因長度程序三:較對DNA分析結果RFLP分型限制性片段長度多態性(restrictionfragmentleng

6、thpolymerisphism)微衛星DNA(minisatelliteDNA,selfishDNA)含有相同的重覆序列(repeatsequence),而且頭尾相連AAGTCAAGTCAAGTCVNTR(variablenumbertandemrepeat,數量可變重覆)TTCAGTTCAGTTCAG量度這特定單位點(singlelocus)的等位基因(alleles)的長度或重覆數RFLP分型測試程序程序一:DNA提取extraction程序二:(量度DNA片段長度)1.酶切Enzymedigestion

7、2.瓊脂糖凝膠電泳AgaroseGelElectrophoresis3.印漬Blotting4.雜交Hybridisation5.放射自顯影Autoradiography程序一:DNA提取SDS/蛋白酶K消化(SDS/proteaseKdigestion)酚/氯箤取Phenol/chloroformextraction乙醇沈澱Ethanolprecipitation程序二:酶切EnzymedigestionEcoRI識別位GAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAG舉例:利用限制性內切酶(restricti

8、onenzyme),EcoRI可將識別位切開37ºCEcoRIRestriction/cutsite識別位程序二:瓊脂糖凝膠電泳AgaroseGelElectrophoresis+_樣品長度標準電泳方向瓊脂糖凝膠程序二:印漬Blotting樣品長度標準nylonmembrane尼龍膜瓊脂糖凝膠程序二:雜交Hybridisationnylonmembrane尼龍薄膜Probe探針(目標D