生化分析常见交叉污染探讨与对策

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1、生化分析常见交叉污染探讨与对策徐国超一　如何理解交叉污染在A项目测定中所使用的试剂、样本、反应产物、清洗剂等对B项目的测定产生了不良影响的现象。A项目与B项目不一定是相邻项目。测试项目A试剂、样本等残留测试项目B引发交叉污染的原因生化仪的发展变化①多项目,多样本处理②处理能力的提高(高速化)设计共用机械部分①样本针,试剂针②比色杯③搅拌棒生化仪状态不良,使用不当①清洗力的低下(日常维护欠缺,仪器老化)②生化仪内污垢的积聚③测试顺序安排不当④常规清洗不能有效消除污染二　交叉污染的分类样本针携带污染试剂针携带污染搅拌棒携带污染清洗系统携带污染比色杯污染试剂交叉污染三　

2、不同类型交叉污染的鉴别　　方法及原因1.样本针携带污染：目前大多数全自动生化分析仪采用循环冲洗式样本针吸取样本，当样本针在清洗不完全，或黏附力增加时，样本残留可能会对下一相邻样本的检测结果造成影响。原因：样品针尖弯曲，特富龙涂层剥落，针堵塞，冲洗水冲洗不充分携带污染率主要是体现样品之间的污染程度样本针携带污染率试验（一）同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。检测顺序：a1,a2,b1,b2,b3计算：评价：以q小于10%为判断标准。局限性：结果与选择的标本浓度有关系例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020U/L，低浓度ALT样本第一次检

3、测结果40U/L，第三次检测结果20U/L。通过计算携带污染率q=（40–20）/2000*100%=1%。例2：选择高浓度的Cl样本浓度值为140mmol/L，低浓度Cl样本第一次检测结果为86mmol/L，第三次检测结果为80mmol/L。通过计算携带污染率q=（86–80）/60*100%=10%。上例中，例1的携带污染率尽管只有1%，由于结果正好在医学决定水平附近因此对临床判断有较大影响。例2的携带污染率尽管达到了10%，但是对于临床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样本的实际浓度。测试顺序：3L2H1L2H4L2H1L2H1L

4、2H1L（注上述顺序前的数字代表测试数量，如3L代表连续测试3个低值样本）定义：L–L值为紧跟在低值标本后低值标本的结果。H–L值为紧跟在高值标本后低值样本的结果携带污染指标=H–L结果的平均值–L–L结果的平均值判断标准：当携带污染指标小于3SDSD是(L–L)结果的SD值。样本针携带污染率试验（二）试剂针携带污染全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一试剂都共用试剂针R1，所有项目的二试剂都共用试剂针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一次清洗，之后会立即吸取下一个项目的试剂。当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残留的前项目试剂成

5、分带入到后项目反应杯中，对后项目的检测结果造成影响。从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染。携带污染实验方案目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有20项以上，评价全项目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点考虑的内容。试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现任何一个项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染影响程度，污染实验所用病人

6、样本的混合血清应尽量包含医学决定水平浓度试剂针携带污染实验方法携带污染初实验假设本次实验以A,B,C,D,E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携带污染,先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序完全按照样本测试号码的先后顺序进行，五个项目的测试顺序见表1。测试完成后，将数据输入到处理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项目组合。表3中显示了试剂之间携带污染初实验后的结果:a将表格内测试顺序号代表的位置处输入该项目对应的测试结果，b对每个测试顺序号下面对应的测试结果和该项目单独5次重复结果的均

7、值相比比值以百分比形式表示，通过考察百分比的大小来初步判断携带污染的可能性。目前的判断标准以正负百分之五作为判断标准，超过范围时怀疑有携带污染。试剂针携带污染确认实验由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合，假设(A→B)同(D→E)即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做E项目）怀疑有污染。由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果，可能有偶然因素，还必须进行确认实验。以(A→B)为例，(D→E)的情况相同先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三个B项目的结果因为有2次自身冲

8、洗，结果应