地菇菌栽培技术

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1、地菇菌栽培技术一、食用菌（微生物）的培养成败的关键一一消毒灭菌。消毒灭菌:可切断传播途径、控制感染扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的细菌，防止感染；是保证不受外來微生物污染的前提。1.常用术语：（1）灭菌是破坏和去除物体上所冇微生物（包括病原微生物和非病原微生物）和细菌芽胞的方法。如外科器械、注射器、基础培养基灭菌等。（2）消毒是破坏物体上活的病原微牛物的方法，但不包括细菌芽胞和非病原微牛物。如用酒梢溶液浸泡体温计、洁而灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消壽剂（disinfectant）o一-般而言，消毒对象是指物体而不是机体。（3）防腐直接使川防腐剂（antiseptic

2、s）破坏或抑制活病原微生物方法。如实验前碘液或酒精擦洗皮肤、双氧水清创伤口或杀菌肥皂清洗双手等应当使用该术语。（4）无菌防止感染病原体进入灭菌组织或物站的操作技术称无菌操作，无菌即为不存在活微纶物。2.物理消毒灭菌法（1）热力消毒灭菌法利用高热使蛋白质分子运动加快，肽链连接键断裂，蛋口变性凝固，纽I胞膜功能受损致胞内物质漏出，细菌内外环境平衡失调，从而导致微生物死亡。不同种类微生物对热的耐受力不同，有芽胞细菌对高温有强的抵抗力。热力灭菌分干热灭菌法和湿热灭菌法两人类，相同温度卞，湿热环境中菌体蛋口易凝固，穿透力比干热大，其蒸气变为液态时可释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度。1）十热

3、灭菌法包括:①焚烧：直接点燃或在焚烧炉内进行，仅适用于废弃物品或动物尸体。②烧灼：直接以火焰灭菌，适用于微生物学实验室接种坏、针和试管口等灭菌。③干烤在干烤箱内进行，加热至150°C-180°C2-4h达到灭菌效果，适用于髙温下不变质、不被破坏和不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器，不能用于塑料、棉、纸制品。2）湿热灭菌法包括：①巴氏消毒法：是川较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐热成分的方法。大多采用71.6°C加热15秒，用于牛乳消毒。②煮沸法：在一个大气压下，煮沸后的水温度达100°C,煮沸5min后可杀死一般细菌繁殖体。③流通蒸气消W：乂称常压蒸气消毒

4、法，常用阿诺（Arnold）流通蒸气灭菌器或蒸笼，利用1个人气压下100°C水蒸气进行消毒，10~30min后细菌繁殖体被杀死，但对芽胞作用不人。④间歇灭菌法：采川间歇方式达到灭菌冃的。将灭菌物品置于阿诺流通蒸气灭菌器内，100°C加热15-30min,每Fl—次，连续三次。每次灭菌后取出物品置37°C孵育箱过夜，致残存的芽胞发育成繁殖体，次H再通过流通蒸气灭菌器加热而被杀灭。如此反复以达到杀灭芽胞乂使不耐高温的物质免受彩响。常用血清凝固器对吕氏血清培养基和鲁琴培养基的灭菌属此方法。⑤高压蒸气火菌法利用密闭的耐高压蒸气火菌器（autoclave）,在蒸气不外溢的条件下，使锅内压力增

5、高，随之蒸气温度也增高。通常在103.4kpa压力下蒸气温度达到121.3°CZ维持15~20min可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。（2）辐射法1）电离辐射能产生电离辐射效应的有X射线、「射线、阴极射线。受照射后，敏感的靶物质如细菌DNA吸收了射线产生能量，产生较大范围的突变，或产生毒性物质如自由棊可破坏微生物核酸产生致死作用。电离辐射由于灭菌时不产生热量又称“冷灭菌法”，适用于对热敏感的物品及化学物质的灭菌，如一次性医用塑料制品和移植组织（骨、皮肤、心瓣膜等）和食品灭菌。2）非电离辐射①紫外线杀菌紫外线波长为240~

6、280nm,它作用于DNA链上相邻两个胸腺嚓庭或胞I瞻喘，共价结合形成二聚体而干扰DNA复制与转录，导致细菌的死亡。紫外线穿透力弱，故常用于空气消毒和不耐热物品表面消毒。②微波是波长为1T03価的电磁波，可穿透玻璃、陶瓷、塑料薄膜等物质，常用于检验室用品、食品食具、药杯及其他用品的消毒。（3）声波超声波的空化作用破坏了细菌原牛质胶体状态导致细菌裂解。革兰阴性菌对其敏感。主要用于细菌细胞粉碎以提取细胞的组分或制备抗原。（4）滤过除菌法以物理阻留的方式将液体或空气中的微生物除去以达到无菌冃的。川于不耐高温物品如血清、抗毒素、抗生素等的灭菌，超静丄作台和层流室空气也用滤过法除菌。1.化学

7、消毒灭菌法化学药物使菌体蛋口变性沉淀、干扰微纶物酶系统影响其代谢和损伤细菌细胞膜，导致菌体内容物漏出，而发挥防腐、消毒和灭菌作用。只能外用或用丁•环境物品的消毒。（1）化学消毒剂的种类：1）根据化学结构与性质不同分类可以分成酶类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂、染料、酸碱类等。2）根据杀灭微牛:物作用强弱分类：①高效消毒剂可杀灭一切微生物。如戊二醛、甲醛、环氧乙烷、过氧乙酸等。②中效消毒剂杀灭除芽胞以外的微生物。如乙醉、碘伏等。③低效消毒剂不能杀灭芽胞、