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时间:2019-09-19
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1、流程手册Jqyf-2-2流程名称:生效日期:最新修订日期:核定人:发酵检测流程发酵检测流程(发酵中控系统)0.0文件修订信息一览表文件修订信息一览表序号修订日期原内容修订内容描述所在页 1.0范围□本流程规定了从钢瓶接种到发酵结束的过程的检测程序和内容。2.0控制目标□监控发酵过程参数变化,及时发现问题,同时为改进工艺提供依据。3.0主要控制环节1)菌种安全2)种子和发酵过程各参数以及镜检没有异常3)转种控制4)停罐控制5)汇总分析4流程图
2、流程名称:发酵检测流程(中控系统)责任部门:研发中心停罐指标停罐4消后及过程ph、糖检测、菌数OD、镜检观察;发酵罐3消后及过程ph、糖检测、菌液OD、镜检观察、转种指标;种子罐2留样平板培养,安全性检查菌悬液1平板检测5测菌数检测汇总生产记录和检测项发酵报表65.0流程说明流程名称:菌种制备流程流程责任部门:研发中心菌种岗步骤说明执行部门/岗位重要输入重要输出制度作业细则(SOP)、知识、经验保障措施备注11.1菌悬液涂布平板有无噬菌体和杂菌菌种制备保障制度1.2菌悬液镜检芽孢染色SOP22.1PH测定、糖含量、菌液OD镜检PH、糖、菌液OD、镜检描述DNS测糖SOP、菌液OD测定S
3、OP发酵检测保障制度2.2转种检测生产1部与研发转种指标转种指标3PH测定、糖含量、菌液OD镜检PH、糖、菌液OD、镜检描述DNS测糖SOP、菌液OD测定SOP4停罐检测和下达指令生产1部、研发停罐指标停罐指标5菌数检测与统计菌数菌落数测定SOP6汇总形成报表生产与研发报表附件1:发酵检测保障制度附件2:种子转种指标与发酵停罐指标附件3:相关SOP(1)芽孢染色SOP(2)糖含量测定SOP(3)发酵液菌数OD值测定SOP(4)平板菌落计数SOP发酵检测保障制度本制度规定了在发酵检测各环节的要求。1整个发酵周期中,相应岗位人员必须按要求取样测定各参数,并记录填写发酵生产记录报表,未测定1
4、次绩效考核1分;2种子液和发酵液培养过程中,根据参数的变化和镜检检查,若出现严重异常现象应当及时(1h内)汇报研发主管和生产1部主管;未及时发现和及时汇报,绩效考核5分;3第二天测出菌数和芽孢形成率后,填写完毕发酵生产记录表,及时向研发主管和生产1部主管汇报,未及时(12h)汇报绩效考核1分。转停罐标准要求本标准规定了发酵转种和停罐的标准要求。(郭倩起草)1种子罐接种一般是在上午10:30左右,正常情况下接种10个小时取样(也就是晚上20:30)种子长的就差不多了,那时一小部分应该处于链状,以我的判断最多不超过两个小时就可以转种,转接发酵培养基。(PH大约在6.7~7.0之间)图I为转
5、种时图片OD?2发酵培养基正常情况下都是培养12h后取样,但是有的时候也会早取,这个是看情况而定,一般12小时取样基本上是没有完全产孢的,产孢率也就在70%~80%之间,像镜检芽孢是需要经常看,才能把握发酵的停罐时间;12h取样没产孢的情况下要隔1.5~2h之间取样镜检。(PH大约在7.0~7.2之间)OD糖含量以下图片是停罐前跟停罐后的镜检情况:图II是停罐前,图III是停罐后图I图II图III
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