在线过滤器与保护住的区别

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1、l保护柱与在线过滤器的异同、使用和维护一、保护柱1.保护柱的接法柱芯是一次性使用的2.为什么必须有保护柱呢？（保护柱不能再生，能冲洗延长寿命）保护柱的卡套中放置的是保护柱芯，柱芯内含有填料，这些填料的存在可以拦截样品中的一些强保留、强酸性和强碱性物质，防止它们对色谱柱内填料的污染和损坏。因此使用保护柱，可以对色谱柱进行全方位的保护，是保护色谱柱最佳的方式。内径不要超过分析柱，长度有1－2cm左右就足够了。这是由于分析柱的损伤在多数场合只是分析柱入口侧的一小部分填料。建议如上述有效地利用予处理柱、保护柱，以延长分析

2、柱的寿命。二、预柱筛板可重复使用1.为什么必须要有预柱呢？预柱在HPLC出现的当时，主要是为了使“液相涂层柱”的固定相饱和的，当然现在这一目的基本上已不再使用了。使用预柱的目的在于清除移动相中的不溶解物质或不纯物质，在使用容易使填料劣化的移动相之时保护分析柱。2.所谓移动相中所含的不溶解物质、不纯物质究竟是些什么呢？HPLC的移动相中使用各种试剂，其中会混有一些不溶解物质或不纯物质。多数不溶物通过用膜滤器过滤移动相可以除去，但极细小的粒子会穿过过滤器。此外在移动相调制之后，还有从空气中或容器、人体等处有不溶物、不

3、纯物落入的可能性。这些不溶物、不纯物根据不同的分析目的，会污染柱、或使堵塞、或给分析带来不良影响等。例如：在离子色谱分析中对无机的1价阳离子作分析之时，按其移动相条件多价阳离子不被洗提。因而会出现移动相中所含的微量多价阳离子不断被填料所捕集掉，1价阳离子的保持变得快起来的情况。这时通过安设离子更换容量大的预柱Shim-packIC-PC1可以防止其产生。或者另外在用后柱(Postcolumn)衍生化法分析氨基酸之际，移动相中的氨会带来基线的变动，经常妨碍峰的检测，这也可以通过装设捕集氨的预柱(Shim-packI

4、SC-30)得到上述情况的减少。前面说到预柱对于容易使填料劣化的移动相能起保护分析柱的作用，这方面的例子可以考虑有在反相色谱分析中采用硅胶系填料，向移动相中添加高浓度的缓冲液或胺类的场合，采用碱性移动相的场合等。我们知道这类移动相硅胶载体将慢慢地溶解。正因如此，才通过安装填入了硅胶系填料的予处理柱以抑制分析柱的劣化。三、保护柱与在线过滤器的异同1.相同之处：1）两者都有卡套；2）两者所接的位置相同，都是接在色谱柱前面，紧挨着色谱柱；3）两者都有筛板，防止固体颗粒物质到达色谱柱，堵塞色谱柱筛板；不同之处：1）。保护

5、柱的使用有个缺点：填料类型相匹配的要求比较高，通常柱芯的填料需要和色谱柱内的填料相同，如果不同，有可能对分析造成干扰。需要注意的是，保护柱只能对样品中含有的少量的污染物起防护作用，对流动相中pH的超标等并不能够起到很好的保护作用，因为流动相的用量太大了，保护柱不能完全阻止污染物到达色谱柱，超过了它的保护限度。2）在线过滤器只有一个筛板，它的功能比较单一。只能防止固体颗粒物质到达色谱柱。但是它有一些优点：i）可以与所有的不同厂家的柱子一起使用；ii）一次性购买长时间使用、甚至永久性使用；四、保护柱和在线过滤器的维护

6、方法1）保护柱的更换时机：通常柱压太高、柱效下降或分离度下降等影响分离的因素出现时就应该考虑更换保护柱。2）保护柱的使用和维护：I）一个新的保护柱芯是没有方向的，但是从第一次使用时开始保护柱芯就赋予了方向，因为固体颗粒物质和强保留物质总是从入口端到达保护柱，并在这一端开始累积。所以柱芯在开始使用后应确认好方向。II）当发现分析过程出现柱压太高、柱效下降或分离度下降等影响分离的因素的时候，需要对保护柱进行一下维护。维护的方法如下：a）在柱套上做好标记，确认保护柱芯的正反方向；取下保护柱，在不打开卡套的前提下将保护柱

7、反接（注意此时不能接色谱柱），用甲醇：水＝20：80以3ml/min流速冲洗10min，然后再用纯甲醇以3ml/min流速冲洗10min；b）冲洗好后将保护柱正接，打开泵除去保护柱和连接管内的空气，再连接好色谱柱，象往常一样使用。注意——如果出现柱压高的情况，有可能是固体颗粒物质堵塞了在线过滤器的筛板，需要清洗筛板。具体如下：打开在线过滤器卡套，取下筛板，分别用水和甲醇各超声10min，然后放回卡套，如往常一样使用。