毛细管电泳技术及其在生物分子研究中的应用进展

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1、第!"卷第#期江苏大学学报（医学版）:(-;!"<(;#&&$%%"年!%月’()*+,-(.’/,+01)2+/34*1/56（748/9/+4）=95;$%%"&&&&&&毛细管电泳技术及其在生物分子研究中的应用进展姜旭淦，陈盛霞（江苏大学医学技术学院，江苏镇江$!$%%!）［关键词］&毛细管电泳；蛋白质；核酸；糖［中图分类号］&>?"&&［文献标识码］&@&&［文章编号］&!AB!CBBD?（$%%"）%#C%""EC%"&&毛细管电泳（9,F/--,*64-495*(FG(*41/1，HI）又称［"］$&毛细管电泳检测技术的发展

2、高效毛细管电泳（G/0GJF4*.(*7,+949,F/--,*64-495*(JFG*41/1，KLHI），是$%世纪D%年代问世的一种高效检测器是KLHI仪器的核心部件之一，已有许液相分离法，是经典电泳技术和现代微柱分离相结多检测技术与HI联用，在不同的实际应用领域中合的产物。由于KLHI技术具有分析速度快、分离发挥作用。效率高、操作模式多、实验成本低消耗少、仪器结构$N!&紫外可见光吸收检测器［!］简单可实现自动化等特点，在生物化学、分子生此类检测器应用最广泛，属于“在柱”检测即透物学等生命科学领域的应用越来越广泛，在蛋白质、光窗

3、口直接开在毛细管上。它可分为二类：（!）结核酸、糖等生物分子的分离分析等方面具有很大的构简单的固定波长或可变波长检测器；（$）二O极发展潜力。近年来，KLHI在检测技术、操作模式、管阵列检测器（P/(84@**,6P45495(*，P@P），能提供与其他技术的联合及其在生物分子研究中的应用等时间J波长J吸光度三维图谱，以便于观察各个组分［#］都取得了很大进展。的分离情况。紫外可见光吸收检测法的主要缺［$］［?］点是光程太短引起的灵敏度不高。!&毛细管电泳技术的原理和基本装置$N$&荧光检测器KLHI的基本装置由毛细管、电解液槽、进样荧光

4、检测法也是毛细管电泳中一种常见的“在器、高压电源和检测器组成（图!）。柱”检测法，检测灵敏度很高，比紫外检测器灵敏!%%%倍，尤其是激光诱导荧光检测法（Q,14*J/+8)948J!$J!EJ!R-)(*4194+94，QSR）灵敏度高达!%T!%7(-·Q。可用于有天然荧光或易于用荧光试剂标记或染色的物质的检测。$N?&电化学检测器它有三种检测模式：电导检测、电位检测、安培图!&KLHI的基本装置检测。安培检测器应用较广，但被检测物质必须具&&KLHI是利用带电性不同的粒子在电场中迁有良好的电化学活性。电化学检测方法可避免光学移、泳动

5、行为的差异而进行物质分离。带电粒子在类检测器遇到的光程太短的问题，对电活性组分的电场作用下以不同的速度向其所带电荷相反方向迁检测具有灵敏度高、线性范围宽、选择性好以及价格移的现象称之为电泳。用!表示组分的离子迁移低廉等特点。4F［A］率，I为电场强度，则电泳迁移速度"4F表示为："4FM$N"&质谱检测器!4FI。毛细管电泳所用的石英毛细管柱，其表面带质谱（7,111F495*(745*6，UO）是HI所有检测器有负电荷的硅烷基，能吸附溶液中的阳离子形成双中最复杂和最昂贵的检测器。质谱法具有较强的定电层。在高压作用下，双电层的中水合阳离

6、子引起性功能，在一次分析中可获得很多结构信息，因此将流体整体地朝负极方向移动，产生电渗。用!表示分离技术与质谱法相结合是分离科学方法学中的一4(电渗流的离子迁移率，则电渗迁移速度"4(为："4(M项突破性进展。!4(I。粒子在毛细管内的电解质中的迁移速度等于HI和UO均是现成的技术，接口是关键。目前电泳和电渗这两种速度矢量和。成功地应用到HIJUO接口中的离子化技术有连续LOWAAAAAAAAAAAAA江苏大学学报（医学版）AAAAAAAAAAAAAAAA第DL卷流快原子轰击（!"#$%#&"&’()*"+,-.，!,(,-.）、离子@

7、COA毛细管电色谱（820%**2137*78$1"8E1"?2$"H120E3，喷雾（/"#’0123，/45）、电喷雾（6*78$1"’0123，64/）、大!6!）气压化学电离（-5(!/）、基体辅助激光解吸离子化!6!是一种在毛细管内充填、涂布或键合色谱（92$1%:(2’’%’$7;<2’71=7’"10$%"#/"#%>2$%"#，9-<=/）固定相，用电渗流作为驱动力的分离模式，将M52$%"#，5=）和毛细管电泳有机地结合在一起，为手性拆分提供离子化技术等。!

8、6(94联用适用于基因工程产品了有效的新方法。与蛋白质酶消化物的定性分析。@CPA毛细管等速电泳（820%**213%’"$28E"0E"17’%’，!/Q5）［B，@］@A毛细管电泳的分离模式!/Q5是在