2017_2018学年高中生物第2章酶技术第6课时酶活力的测定同步备课教学案北师大版选修1

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1、第6课时酶活力的测定［学习导航］1•阅读教材P切P：,5内容，了解酶活力和酶反应速度的关系。2.结合教材P：,273内容，检测果胶酶的活力。3.结合教材入内容，探究果胶酶作用的最佳条件。［重难点击］1.解释果胶酶活力测定原理及方法。2.探究杲胶酶作用的最佳条件。一、检测果胶酶的活力D基础梳理夯实基础突破要点不同条件下，酶的活性是不同的，要定量地比较酶活力的差别就要进行酶活力的测定。结合教材实验，完成下面的探究内容。1•酶活力单位及其测定方法(1)酚活力单位是指在一定条件下，1min内能转化1U山。1底物

2、的酶量。测定过程中温度保持在竺°C,其他条件如咀和底物浓度等均应采用最适条件。(2)测定方法①一是测定完成一定量反应所需的时间，所需时间越短，说明酶活力越高；反Z,酶活力越低。②二是测定在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度，酶催化的反应速度越大，说明酶活力越高;反之，酶活力越低。2.果胶酶活力的测定(1)实验原理果胶酶可将果胶水解生成B■半乳糖醛酸,产物可用次碘酸钠法进行定量测定,从而计算出果胶酶的活力。(2)方法步骤①②③步骤操作提示①保温两个锥形瓶，1号瓶内加入果胶、果胶酶；2号瓶内加入等量的

3、果胶和蒸憾水，均用保温的目的是使酶対底物很好地发挥作用，温度和pH都应是冰乙酸将pH调至3.5,放在恒温水浴锅屮50°C保温2h最适宜的②加碘氧化从1、2号瓶中分别取5mL反应液加入两个碘量瓶中，加热煮沸，冷却后分别加入1mLlmol/L的碳酸钠溶液和5mLO.1mol/L的飓液，混匀这一步的冃的是在碱性条件下（碳酸钠提供碱性条件），碘可以和果胶酶的水解产物B■半乳糖醛酸作用，生成糖酸盐③滴定分别加入2mLlmol/L的硫酸，用0.05mol/L硫代硫酸钠滴定至溶液呈淡黄色，再加入质量分数为0.5%的淀

4、检指示剂，继续滴定至监色消失为止，记录所用硫代硫酸钠的体积，分别用A和B表示滴足时加入硫酸的目的是使噩促反应终止，然后用硫代硫酸钠滴定剩余的砚，根据化学反应中的定量关系即可求出半乳糖醛酸的量④计算酶活力(单位)=(B-A)XMX14-2X204-5B表示空白滴定所消耗的硫代硫酸钠毫升数；A表示样品滴定消耗的硫代硫酸钠毫升数；M表示硫代硫酸钠的摩尔浓度；1表示1mol硫代硫酸钠相当于1molB■半乳糖醛酸；2表示作用时间；20表示反应液总体积；5表示检测吋所取反应液的毫升数理解升华重难透析问题探究1•影响

5、酶促反应速度的外界因素有哪些？它们是否都影响酶活力？请举例说明。答案（1）影响酶促反应速度的外界因素有温度、pH.酶抑制剂、酶的用量、底物浓度等。⑵不一定。例如，温度、pl［和酶抑制剂能通过改变酶的结构而影响酶活力，但酶的用量和底物浓度只影响反应速度，并不影响酶活力。2•甲、乙两图是温度、pll对酶活力的影响的数学模型。（1）甲、乙两图中B点代表的含义分别是什么？答案甲、乙两图B点所对应的温度和pH分别是酶的最适温度和最适pH。(2)甲、乙两图中A点对应的值对酶活力的影响相同吗？答案不相同。甲图A点对应

6、的酶活力较低，乙图A点对应的酶己失活。(3)甲、乙两图中C点对应的值对酶活力的影响相同吗？答案相同。两图C点所对应酶均已失活。归纳总结(1)为了得到一种高纯度、高活力的酶制剂，往往要经过一系列复杂的分离纯化过程，而各个过程中釆取的手段可能很温和，也可能很激烈，这些手段都或多或少地影响到酶的活性。为了掌握了解每一个过程中的酶活力的损失程度以及所采取的手段是否合适，以决定是否进行下一步操作，就必须在完成了每一步操作后都要对酶活力进行测定。(2)果胶酶可以将果胶水解成B■半乳糖醛酸，而半乳糖醛酸具有还原性糖醛

7、基，可用次碘酸钠法定量测量，其原理如下：碘在碱性溶液中可以生成具有强氧化性的次碘酸盐，次碘酸盐能与醛糖反应，从而使醛糖氧化成糖酸盐。RCHO+12+3NaOH->RCOONa+2NaI+2H20醛糖糖酸盐利用过暈的碘在碱性条件下氧化醛糖形成糖酸盐，然后用硫代硫酸钠滴定剩余的碘，即可求出半乳糖醛酸的量，以此来表示果胶酶的活性。拓展应用剖析题型提炼方法1•下列关于酶活力与酶促反应速率的叙述中，错误的是()A.酶活力是指酶催化某一化学反应的能力B.酶活力大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表

8、示C.酶催化的反应速度越大，酶的活力越高D.酶催化的反应速度越大，酶的活力越低答案D解析酶活力又叫酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力，酶活力大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表示，酶催化的反应速度越大，酶的活力越高；反Z,酶的活力越低。2.果胶酶的反应速度可用哪一项来表示()A.单位时间内果胶的减少量B.单位体积内半乳糖醛酸的增加量C.单位吋间内半乳糠醛酸的增加量D.单位吋间内、单位体积中果胶的减少量或半乳糖醛酸的增加