优生系列ELISA诊断及质量控制PPT

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1、优生系列相关知识及质量控制需要检查TORCH-Abs人群孕前准备怀孕妇女孕妇早期及中期高危孕妇（养宠物、感冒、皮疹）不良妊娠史妇女新生儿儿童TORCH优生系列致孕期感染并具有高致畸作用的一组病原体刚地弓形虫(Toxoplasmagondii,简称TOXO)风疹病毒(Rubellavirus,简称RV)巨细胞病毒(Cytomegalovirus,简称CMV)单纯疱疹病毒(Herpessimplesvirus,简称HSV)其它高致畸病原体:Others如:EB疱疹病毒(Epstein-BarrVirus简称EBV)细小病毒19(Pa

2、rvoVirus简称B19)水痘-带状疱疹病毒(Varicella-ZosterVirus简称VZV)梅毒螺旋体(Syphilis,简称TP)猫、犬、羊、鸡动物唾液中弓形虫可通过人的伤口进入体内食用未煮熟的肉类或污制品饮用污染的水吸入病畜排泄物飞沫而被感染。又名为德国麻疹，为RNA病毒孕妇风疹病毒感染后,85%为全身病毒感染类似感冒症状寄生于细胞内的原虫产妇泌尿道和宫颈排出CMV，则分娩时婴儿经产道可被感染病毒可侵入肺、肝、肾、唾液腺、乳腺其他腺体可长期或间隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宫分泌物多处排出病毒。通常口腔，生殖

3、道，胎盘，输血或器官移植等多途径传播。妊娠母体CMV感染可通过胎盘侵袭胎儿引起先天性感染巨细胞病毒HCMV属疱疹病毒组DNA病毒TORCH不同类别抗体判断意义（成人）IgG型抗体IgM型抗体结果分析胎儿风险阴性（-）阳性（+）原发首次感染风险最高阳性（+）阳性（+）再次感染风险较高阴性（-）阴性（-）未感染未进行免疫风险一般阳性（+）阴性（-）具有保护性抗体相对安全人群TORCH不同类别抗体判断意义（新生儿）IgG型抗体IgM型抗体结果分析新生儿风险阴性（-）阳性（+）宫内感染有感染阳性（+）阳性（+）宫内感染有感染阴性（-）阴

4、性（-）无宫内感染无感染阳性（+）阴性（-）母体抗体三月内不提示感染妊娠期ToRCHIgG&IgM检测程序示意图使用高敏感方法检测IgG/IgMIgM－/IgG－IgM－/IgG＋IgM＋/IgG＋IgM＋/IgG－未免疫，孕期卫生教育；需每月检测IgG直至孕期20周既往感染，无需进一步检测怀疑原发感染，让患者2周后采样重检孕期≤20周孕期＞20周1-2周内再次采样检测IgG和IgMIgG浓度变化不明显1-2周内再次采样检测IgG和IgMIgG浓度上升超过4倍孕前既往感染，或复发，无需进一步检测高度传染性IgG浓度变化不明显既往

5、感染，或孕早期感染，回顾检测前三个月血液感染，高度传染性复发-低传染性感染，高度传染性IgG－/IgM－和IgG－/IgM＋IgG＋/IgM－IgG＋/IgM＋/IgG浓度变化较大可进一步检测IgG＋/IgM＋/IgG浓度变化不明显母体病毒血证评估：尿液PCR、血液PCR胎儿健康度评估：超声、MRI侵入性检测：羊膜穿刺、定量PCR复检仍IgG－IgM＋则为非特异性IgM孕前既往感染，无需进一步检测IgG浓度上升超过4倍特异性IgG抗体亲合力(Avidity)测定机体感染IgG初次免疫应答为有功能的低亲和力抗体数周或数月后成熟，与

6、抗原的互补更好,而成为高亲合力抗体测定原理：Ⅰ免疫测定中，标本中加入尿素或其他变性剂Ⅱ不能经受尿素等变性剂作用的抗体为低亲和力抗体Ⅲ反映为急性或近期感染亲和力低----近期感染高亲和力----既往感染检测意义：■如果发现特异IgG抗体为高亲合力,则说明为孕前感染，怀孕前的感染对胎儿影响不大。■可排除患者前4-5个月内发生的感染，其对第一个月的特异IgM和IgG均阳性的妊娠妇女尤其有用测定结果的局限性：如果发现特异IgG抗体为低亲合力,由于低亲合力抗体可持续一年之久，在IgM抗体存在的同时,其并不一定意味着近期感染，结果可与其他血

7、清学试验(特异的IgA和IgE)一起作为近期感染的确认试验,单独检测不能作为决定性试验。目前市场上没有一个真正经过SFDA（国家食品药品监督管理局）认可的ToRCHAvidity试剂盒，也几乎没有用户使用Avidity试剂盒来进行ToRCH的诊断。★可通过监测特异IgG的浓度变化来提供近期感染的证据，当患者发生继发感染时，IgM和IgG都能较快地上升到较高浓度，其中IgG上升极其显著（一般可上升4倍以上的水平），因此临床上若测出高滴度的IgG，则意味着再次感染。需进一步检测其他项目进行确认。特异性IgG抗体亲合力(Avidity

8、)测定ToRCH检测的质控问题依据试剂盒说明:⑴OD“吸光度”=(“A”值)。CO值即Cutoff=0.10+阴性对照平均A值，A＜0.05时，按0.05计算，A≥0.05时，按实际值计算。一般阴性对照A值均<0.05，按0.05计，则0.10+0.05=0.1