GBT18642-2002 猪旋毛虫病诊断技术 - 下载地址.pdf

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1、GBiT186422002前言旋毛虫病(trichinello.sisinswine)是种危害很大的人兽共患寄生虫病它不仅给畜牧业和肉品工业造成严取的经济损失，而且对人类健康也构成严重威胁本病病原为旋毛虫是英thl学者JamesPanesPaget1835年首次于伦敦一尸体「}’发现，同年()wen定名为:irlchinellaspirali,简称旋毛虫后来证实，由此虫引起的旋毛虫病是一种世界分布的人兽共患寄性虫病，可感染人和150多种哺乳动物，目前全世界都有本病的发生。本病的诊断方法L要有两类。一是病原

2、学诊断，包括直接采集肌肉进行目检、压片镜检和集样消化;另一类是血清学诊断，包括皮内反应、补体结合反应、对流免疫电泳、胶乳凝集试验、间接荧光抗体、皂L絮凝试验、间接血凝试验、环蝴沉淀试验、酶联免疫吸附试验(EI,ISA)等为i'保iiE((}1，华人lti共#I1L*1动物防疫法》的实施，结合世界动物卫生组织[WorldOrganizationfor八;tintal1。山h(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),()IF]编写的该病检疫方法，特制定本标准本标准规定旋毛虫压片

3、镜检、集样消化两种方法。主要用于感染旋毛虫猪的定性。上述方法具有操作简便，快速根据不h1情况可作为产地、屠宰加I_和流行病学调查以及进出[f1猪和猪肉的检疫本标准的附录八、附录H都是标准的附录本标准由『}，华人民共和国农业部提出本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归日〕本标准起草单位:中国人民解放军农牧大学。本标准L要起草人:徐克成、阎丘河、郑明光、周志江中华人民共和国国家标准GBIT1$642-2002猪旋毛虫病诊断技术Diagnostictechniquesfortrichinellaspiralis

4、inswine1范围本标准规定r旋乙虫压片镜检、集样消化等诊断技术本标准适用少产地检疫、屠宰加工、流行病学调查和进出口猪及猪肉的检疫2压片镜检法2门实验材料2.1.1甘油透明液、盐酸溶液、美蓝溶液〔见附录A(标准的附录)〕21.2仪器:U微镜2.2操作方法2.2.1新鲜肉检验2.2.1.1采样自胭体两侧的横捅膜肌脚部各采样一块，记为一份肉样，其质量不少于50g^100g，与胭体编成相同号码如果足部分tlfal体.刚从肋间肌、腰肌、咬肌、舌肌等处采样2.2.1.211检撕去Hen肌的肌膜.将114肌肉缠在检

5、验者左手食指第一指节仁，使肌纤维垂直于要指伸展方向，再将左手握成半握拳式，借助f拇指的第一节和中指的第二节将肉块固定在食指上面，随即使左手7心转向检验者，右手拇指拨动肌纤维，在充足的光线下，仔细视检肉样的表面有无针尖大半透明乳白色或灰白色隆起的小点。检完一面后再将隔肌翻转，用同样方法检验幅肌的另，面。凡发现上述小点可怀疑为虫体2.2.1.3压片可按下述方法制备压片:a)放置夹压玻片:将旋毛虫夹压玻片放在检验台的边沿，靠近检验者;b)剪取小肉样:用剪刀顺肌纤维方向，按随机采样的要求，自肉上剪取燕麦粒大小的肉

6、样24粒，使肉粒均匀地在玻片_}_排成一排(或用载玻片，每片12粒);。)压片:将另一夹压片重迭在放有肉粒的夹压片上并旋动螺丝，使肉粒压成薄片2.2.14镜检将制好的压片放在低倍显微镜下，从压片一端的边沿开始观察，直到另一端为止。2.2.1.5判定标准镜检判定标准如下)没有形成包囊期的旋毛虫:在肌纤维之间呈直杆状或逐渐蜷曲状态，或虫体被挤f压出的肌浆.}，_b)包囊形成期的旋毛虫:在淡蔷薇色背景士_，可看到发光透明的圆形或椭圆形物，崔中央是蜷曲的虫体。成熟的包雀位于相邻肌细胞所形成的梭形肌腔内。中华人民共

7、和国国家质t监督检验检疫总局2002-02一19批准2002一05一01实施标准分享网www.bzfxw.com免费下载GB/'r18642--2002c)钙化的旋毛虫:在包囊内可见数量不等、浓淡不均的黑色钙化物，或可见到模糊不清的虫体，此时启开压玻片，向肉片稍加10写的盐酸溶液，待Imin-2min后，再行观察。d)机化的旋毛虫:此时压玻片启开平放桌上，滴加数滴甘油透明剂于肉片上，待肉片变得透明时，再覆盖夹if玻片，置低倍镜下观察，虫体被肉芽组织包围、变大，形成纺锤形、椭圆形或圆形的肉芽肿。被包围的虫体

8、结构完整或破碎，乃至完全消失。2.2.2冻肉的检验2.2.2.1冻肉的检验同2.2.102.2.2.2冻肉的染色方法如下:)压片:同2.2.1.3b)染色在肉片]_滴加1.2滴美蓝或盐酸水溶液。浸渍1min，盖上夹压玻片c)镜检:美蓝染色法:肌纤维呈淡青色，脂肪组织不着染或周围具淡蔷薇色。旋毛虫包囊呈淡紫色、蔷薇色或蓝色。虫体完全不着染。盐酸透明法:肌纤维呈淡灰色且透明，包囊膨大具有明显轮廓，虫体清楚3集样消化法3.1实验材料