[精品]栀子活性成份分析

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1、梔子活性成份分析梔子活性成份分析【中图分类号】R917【文献标识码】A【文章编号］1672-3873（2011）03-0298-01【摘要】文章简述了梔子中抗急性淋巴细胞白血病的活性成分。【关键词】梔子活性成分1、仪器与材料Fisher❷Johns熔点仪（未校正），SHIMADZUFTIR❷8400S红外光谱仪，BrukerAM500型核磁共振仪，ThermoScientificLTQOrbitrap质谱仪，上海亚荣旋转蒸发仪RE2000,SpectraMax190酶标仪（美国MolecularDevices公司），薄层板和硅胶（青岛海洋化工厂），Sepha

2、dexLH❷20为Phannacia产品，其他试剂均为分析纯（MTT,美国Sigma公司）。细胞株：HL❷60❷人早幼粒细胞白血病、REH❷人急性淋巴细胞白血病、Raji❷淋巴瘤（北京协和医学院/中国医学科学院基础医学研究所）梔子样品于2008年3月购自北京同仁堂京北康大家园药店，经林余霖研究员鉴定为梔子GardeniajasminoidesElliso植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆，编号为R❷001。2、方法2.1提取与分离焦梔子（lkg）经过粉碎，用体积分数95%乙醇回流提取3次，每次2h,提取液减压浓缩得浸膏100g,称取硅胶（100

3、〜200目）210g拌样，上硅胶色谱柱，用三氯甲烷❷甲醇（体积比100:1〜0：100）洗脱：三氯甲烷❷甲醇（体积比95:5）洗脱部分可得到化合物1（15mg）＞化合物2（6mg）、化合物3（18mg）；三氯甲烷❷甲醇（体积比9:1〜8:2）洗脱得化合物5（1853mg）.化合物6（9mg）.化合物7(8mg)；三氯甲烷❷甲醇(体积比7:3)洗脱得到化合物8(10mg)；三氯甲烷❷甲醇(体积比6:4)洗脱得到化合物4(120mg)。2.2活性筛选粗提物、各组分及化合物以二甲基亚砚(DMS0)溶解，配成50mg•mL-l的储备液20°C保存。临用时

4、用含10%胎牛血清(FBS)的RPMI0164O培养液稀释，配制所需浓度(终浓度样品中DMS0含量〈0.1%)。取对数生长期的肿瘤细胞2X105个/mL,接种于96孔培养板，每孔100PL,设不同浓度的细胞组、空口对照组、调零组，至终体积为200uL,每组设6个复孔。接种后，于37°C、5%C02中进行培养。培养48h后，每孔加入MTT(5mg•mL-l)20uL,孵育4h后，1000r/min离心5min,小心吸弃培养液，加入DMS0150UL,振荡10min,充分溶解MTT。酶标仪测定各孔吸光度(A值)，其中测定波长为570nm,校正波长为6

5、50nm。计算生长抑制率。生长抑制率二给药组A值-调零组A值细胞空白对照组A值-调零组A值X100%3、结果与讨论3.1结构鉴定化合物1：无色片状晶体(三氯甲烷)，mp142-143°C。EI❷MSm/z：414(M+),与文献[3]报道数据一致；与对照品0❷谷當醇共薄层层析，两者的Rf值、斑点颜色完全一致。鉴定为B❷谷笛醇。化合物2:无色针晶(石油瞇),III❷NMR(500MIIz,CDC13)5:3.96[6H,s,(CH3)2C3,,C5‘0OCH3],3.93(3H,s,C7❷0CH3),3.89(3H,s,C4,❷OCH3),6.38(1H,d,

6、C8❷H),6.50(1H,d,C6❷H),6.60(111,brs,C3❷H),7・08(2H,s,C2‘❷II,C6Z令II),12.72(111,brs,C5❷OH)。以上数据与文献报道一致，确定为5❷龛基❷7,3’,4/,5Z❷四甲氧基黄酮。化合物3:白色结晶，mp269〜270°C。13C❷NMR(DMSO❷d6)6:38.3(C01),23・7(C❷2),76.7(C❷3),38.3(24),52.3(C❷5),21.0(C❷6),32・6(C❷7),3&4(C❷8),46.7(C❷9),38.1(C❷10),24・0(C❷11),124・5(C

7、❷12),138.1(C013),41.6(214),30.1(215),21.0(C016),46.9(C017),54.7(218),28.2(219),27.5（C❷20）,26.9（C❷21）,36.2（C❷22）,22.8（C❷23）,16.9（C❷24）,16.0（C❷25）,15.1（C❷26）,23.7（C027）,178.2（C❷28）,21.2（C❷29）,23.2（830）。上述数据与文献报道一致，与标准品进行薄层层析对照，Rf值一致，鉴定为熊果酸。化合物4:无色针状结晶，mp167°CoESI0MSm/z：181[M❷H]-。IR（K

8、Br）cm-l：3260,2940,1470,110