遗传实验参考遗传实验复习(详)

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1、显微摄影技术孔径(NA)放大倍数(4x10x20x100x)镜筒长度160mm盖玻片厚度(0.17mm)油浸标志HIoiloel数值孔径(N.A.)=nsin()n为介质折射率=/2,为开口角，即物镜前面的发光点进入物镜的角度。M=MoxMe(xMi)M：总放大倍数；Mo：物镜放大倍数；Me：目镜放大倍数；Mi：中间放大倍数。文件名称到秒2010.7.5.11:10:00就是“05111000"以物镜上的数值孔径乘以0.7求得孔径光圈的大小，将孔径光圈的数值调至所需位置。(分辨率下降3成，亮度减

2、半，但对比度提高，在高倍条件下景深也加深。实验一(蝗虫精巢••减数分裂与配子发生)在解剖煌虫时，先将翅膀剪去，在翅基部的后方，相当于腹部背侧的前段，用解剖剪将其体壁剪开，即可以看到在上方两侧各有一块黄色的团块，这便是精巢。用改良苯酚品红染液油镜看不到？1.没滴油2.片子放反了…前期I：细线期—偶线期…粗线期…双线期…终变期细线期：染色质浓缩、凝聚成染色丝。看不出双线结构偶线期：联会，染色体仍然是细长，仍然不能辨别数目粗线期：染色体明显变粗，有非姐妹染色单体的节段交换双线期：染色体进一步缩短，交叉

3、点开始向两端移动终变期：染色体最短，核仁核膜消失屮期I：从极面观察，同源染色体排列成环形。后期I：雄性，可以看到一条不配对的性染色体在分裂过程中的滞后现象。末期I：逐步解旋恢复到染色质的状态，重建核膜核仁。染色体数目减半发牛在第一次减数分裂的末期。实验二(果蝇唾腺染色体)多线染色体。它是果蝇唾腺细胞核内有丝分裂所致，有丝分裂停止在分裂间期，即核内染色体中的染色线连续复制而染色体并不分裂，同时唾腺细胞中的同源染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起。巨大染色体是遗传学上研究

4、染色体形态结构及染色体畸变的好材料。每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，出现一系列宽窄不同、染色深浅不一、明暗相间的横纹。不同染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的。判断唾腺的原则：茄子…半透明…有脂肪体低温下生长的果蝇个体较大，三龄幼虫爬到瓶壁上化蛹。去除脂肪体，否则形成脂肪滴用改良苯酚品红染液果蝇体细胞有八条染色体，但是由于配对，只能看到4条（4对）。第二对与第三对染色体都以各自的着丝粒部位相聚集，形成一个深染中心。果蝇唾腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质聚集在一起

5、o实验三（果蝇生活史观察）受精卵一幼虫一蛹一成虫温度适宜：400个卵，2星期25度，成体寿命37d,30度以上不育2・3d产卵Id变幼虫4・5d开始化蛹，蛹变深褐色以后羽化，大约3-4do卵：触丝附看在培养基表层翅膀与身体呈现约45度角可以判断果蝇已死亡性梳位置：第一对足第一附节配制培养基的时候，酵母粉和丙酸是后加入的。然后一起高温灭菌。刚配制完的培养基放凉后在瓶壁上有许多水滴，这时应该放进温箱里2-3do实验四（人类染色质观察）Q：看到Bair就是女生？未必（XXY）失活发生在胚胎早期，失活是

6、随机的。失活的染色体上存在失活区与非失活区。剂量补偿效应固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）HCL酸解：使得口腔黏膜细胞互相分散不重叠，这样分散的细胞有利于充分地进行细胞染色和清晰地进行镜检观察。中苯胺蓝的优点是对细胞核染色淸晰，即整个细胞核染色都较深，但其缺点是对胞、质分离不太好。而改良苯酚品红相比起来，染色效果相当浅，染色体着色也较浅，但仍然相当清晰。Q：为什么Barr小体一般出现在核膜边缘？主要是因为该条染色体处于失活状态，其上基因大多数不被表达，故和大多数具有活性的染色体彼此分开；在DNA复制

7、时总是落后于其他染色质所致。油镜使用：“半滴油"，可以不加盖片实验五（小鼠骨髓）固泄液（甲醇：醋酸=3：1）酸——胀醇——脱水过火？吹干？？？Q：固定液的作用形态和成分使细胞固定在当前所处的吋期，便于观察。实质就是把细胞杀死，使细胞的新陈代谢终止，使其无法继续进行有丝分裂。低渗预冷滴片低渗液的作用是使细胞充分吸水膨胀而不破裂，从而一直保持在胀得很大而又没有破裂的状态。进而使得细胞内的川期染色体就能够足够分散开来，从而使得经固定等步骤后仍然处于膨胀状态。之后经过滴片吋的摔打和骤降温过程，使细胞很快

8、破碎，染色体进一步分散开。在滴片的时候就能够获得一团仅属于一个细胞的分散的中期染色体的片子，易于在显微镜下观察和对染色体进行计数。而如果开始时就直接用蒸镉水使细胞破裂，这样虽然染色体更分散，但是为数很少的染色体都分散到大量的溶液屮去，视野里就没儿条染色体了；就无法对染色体数目进行统计。为了保持细胞的活性，所以需要对低渗液保温。低渗吋间上应该也是长点较好，使细胞充分膨胀。低渗液的时间，温度和渗透压耍适中。低渗处理的时间均应该根据细胞的数量和细胞本身对低渗环境的耐受程度调节到一个较为合适的数值。低渗