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时间:2019-10-18
《遗传实验参考实验三果蝇唾腺染色体参考资料》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实验三果蝇唾腺染色体【实验目的】1.练习取岀果蝇幼虫的唾腺和制作唾腺染色体标本的方法与技术.2观察和识别多线染色体的特征:a.巨大.多线;b.染色体配对,染色体只有体细胞的半数(n):c.染色体含异染色质多的着丝粒部分互相靠拢.形成染色中心(chromocenter);d.横纹有深、浅、疏、密不同,而且各自对应排歹IJ,这意味着基因的排列。3.练习绘制多线染色体图【实验原理】双翅目昆虫(果蝇、摇蚊等)幼虫期的唾腺细胞很大,其核内的染色体称为唾腺染色体(Salivarychromosome)o由于它们比普通染色体大100-150倍,宽约5pm,长约400pm,因而也称为巨大染色体(g
2、iantchromosome)o另外唾腺染色体经多次复制(212=4096)而不分开,所以又称作多线染色体(polytenicchromosome)^唾腺染色体经染色后出现深浅不同,疏密有别的横纹,这些横纹的数目和位置常常是恒定的,标志着物种的特征。当染色体上有结构畸变.如缺失、重复、倒位、易位等,很容易在唾腺染色体上鉴别(见图3-1)(见图3-2)0正常复腋(+)棒状复眼(B)加信棒腋(BB)果蝇的正常复眼、棒状复眼和加倍棒状复眼。正常复眼、棒眼和加倍棒眼果蝇唾腺染色体的横纹比较瓣纵谿瞬染色体第3区C小区屮的第2条到【实验仪器、材料和试剂】实验器具:解剖镜、显微镜、解剖针、辍子、
3、载玻片、盖玻片、吸水纸。实验药品:0.7%生理盐水、lmol盐酸、蒸憎水、改良品红,实验材料:黑腹果蝇任一品系或杂交种的已爬上管壁,尚未化蛹的三龄幼虫.【方法与步骤】1.把载坡片放于解剖镜载物台上(用黑背景)加上一滴生理盐水,把果蝇三龄幼虫移入其中,左手持解剖针按住幼虫前端1/3处固定幼虫,右手持另一解剖针按住幼虫头部,果断、快速、有力地向右拉,把虫体前端扯断.唾腺随之露出。唾腺呈半透明,球棒状,前端较细.后端粗钝.有时成对粘在一起成''V〃字型,其外侧有时附有乳白或淡黄色的脂肪,此时应保留唾腺形态的完整,因为食道和肠管也是半透明的,如果唾腺不完整,就很难判断唾腺和肠道的取弃.2.
4、把唾腺剔出移到玻片的干净处,并清除其余器官和组织。如果唾腺上附有脂肪,应把乳白色或淡黄色的脂肪清除干净,保留半透明的唾腺。3.把多余的生理盐水用吸水纸吸干,加一滴lmol盐酸;室温下水解2分钟,然后吸干。4.用蒸馆水一滴,清洗吸干2次°吸水纸不要太靠近标本,以免标本丢失。5•加一滴改良苯酚品红,染色3-5分钟:染色的同时,用锻子把唾腺稍捣碎。6.用锻子取一盖玻片,以45。角徐徐落下,排净气泡,取少许吸水纸铺在盖玻片上,用左手食指和拇指固定盖玻片位置.右手拇指使劲按压。为使染色体铺展得舒张.可站起来把上半身的体重施于右拇指上,效果会更好。图片:蛹及三龄幼虫、头部果她三蛉幼曳果蝇三龄幼
5、虫挑取果蠅唾液腺挑取果蝇唾液腺挑出唾液腺挑出唾液腺唾腺与肠道的区别唾腺与肠道的区别果蝇唾腺果蠅唾腺加入盐酸后的唾腺果蠅唾腺染色体I果蝇唾腺染色体黑蝇唾腺染色体模式图果蝇唾腺染色体模式图【实验结果】1.先用100X镜观察片子,找到铺展较好的染色体图像后.将其移动至视野中心,再用400X镜观案。2.黑腹果蝇的染色体数目是2n=2X=&X=4.但是在唾腺细胞中发生体细胞染色体配对.所以染色体数目减半。X染色体和4号染色体是端部着丝粒染色体,其着丝粒在染色中心上,另一端向外伸展。2、3号染色体是中部着丝粒染色体.其着丝粒也在染色中心,各自的两臂呈''V"字型向外伸展按道理应该观察到6个头,
6、但因为4号染色体较短小,往往在光学显微镜下看不到,所以通常在铺展较好的情况下只能观察到5个头。雄果蝇的Y染色体异染色质部分几乎包含在染色中心.染色稍淡,而且染色体比雌果蝇的稍细。
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