ABO血型基因分型及应用

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1、万方数据·实用临床免疫学·ABO血型基因分型及应用空鱼丝毽堂壁查2咝生差!g盘兰炯采孟庆宝张印则周华发王从容曹琼(第一军医大学南方医院输血科．广州510515)刘忠(台肥血液中心，台肥230022)中国图书分类号R457．1+文献标识码A文章编号1000-484X(．加02}06-0430-04摘要目的：研究ABO血型基因分型的意义。方法：采用聚合酶链反应．序列特异性引物(PcR-SSP)基因定型方法对ABO血型基因定型并观察其基因多态性分布特征和疑难血型检定。结果：对已知ABO基因的DNA标本进行基因定型，证实文中的ABO基因定型方法可靠；对104例健康、无血源关系的汉族个体ABO血

2、型基因定型．结果与血清学所定表型完全符合；并用ABO基因分型技术解决临床输血前血型鉴定、产前胎儿血型鉴定、亲权试验及血清学亚型的正确性验证。结论：ABO血型基因分型技术可以正确判定ABO血型疑难样本。关键词ABO血型聚合酶链反应．序列特异性引物(PcR—ssP)基因分型GenotypingofABObloodgroupanditsapplication／ANJiong-Cai，MENG(hag-Bao，ZHANGYin-Zeet以．_~田如昭Hospital，FirstMilitaryUni抛rsity，Q删铷Ⅱ510515AllstraelObjective：To8岫Oil菌孽曲ca

3、rIce0fABO护m寸pillg．Melters：Totreethemelhods0f严Iy。I圮唧chain删on-sequenee8p妇矿if唧s《P01-SSP)forgenotypingffABObloodg‘。叩andohs,erva60nABOg胁e酬妒玎fphi锄8swe／／8sid锄￡ifh如n0fd0￡妇sam=pIe．Results：Therdiability0fthe鲫otrpingforABObloodgrvupwasprovedbytestingDNAsamples印鲥oLlslyknowngenctypes．11lenmul_bs0fgtnotypiagf

4、orl04healthyandunrelatedHANindividualsWel'eco唧por-dwith船rdo舀edPller眦yp幅．'lhemethod0fABO辨m啪衄惴appliedfordlaiealpre-tmnsfusionABOtyping，pre-deliveryfetalABOty】衄，pa倒吐hlgtestandsuk印IlPtyPiIlg．o嘲删蚰：ThemethodofABOgenotypin$mayc0玎忧ttyC“sfordoubt韶mpk0fABO酡do画dtypillg．Keywot-dsABObloodgroupPdy'meramcIm抽re

5、action-sequeeitlcpIin攒(PcR-s卵)GenotypingABO血型是目前最具临床意义的血型系统，常规采用血清学技术定型，发现一些疑难标本不易准确判定血型，产前胎儿血型检定因取血样困难或胎儿红细胞抗原发育不成熟而受限制，亲权鉴定时因只能确定表型而不能确定其基因型使一些表型相同而基因型不合遗传规律的案例不能排除。为此，我们采用了ABO血型基因分析技术并试用于临床，现将结果报道如下。1材料与方法1．1标本104例随机非亲属汉族个体，其中男55人，女49人，年龄18一鹌岁，7份已知ABO基因型的DNA由NIt／提供，基因型分别为：A1／3-12份，A1／011份Al，r

6、I份，AlB1份．B／011份．Al，021份。疑难血型鉴定例，其中：3例血清学技术正反定型不符。1例产前胎儿血型鉴定，2例白血病化疗引起抗原减弱，1例法医亲子鉴定。从中国生物医学期刊数据查得有关ABO亚型的个例报告，向作者函索标本，血清学表型分别报道为Bx、A玛、A2B。1．2试剂与方法1．2．1EDTA抗凝的外周血DNA提取采用快速盐析法“J，羊水DNA用经典的酚一氯仿法提取。DNA终浓度调节至100～300llg，m。1．2．2ABO基因分型采用美国G&T公司的试剂盒，内对照为扩增人类生长激素(HumanGmwthHor-1Ⅷ。HGH)基因的引物对，扩增产物为429bD。引物设计

7、及组成(Mix)参考Akane等报告并适当改进“】。引物混合物(Mix)的组成、最佳反应浓度、产物片段和检测基因见表1。P氓产物以琼脂糖电泳，紫外透射仪下判定结果。2结果作者筒舟：兰炯采．男．56岁．研究员．博士生导师，从事临床输血、血2·1ABo血型及亚型基因分里爹誊判断：核酸标准墨研究；品Mall【er为100bpLandder，每管含429bp内对照。重庆宝t男．强岁．临床输血蕞士研究生。Mix-I至Mix-7用于检测ABO基因型，相应基