人狂犬病毒IgG检测试剂盒(酶免ELISA法)

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时间:2019-09-05

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1、人狂犬病毒IgG检测试剂盒(酶免ELISA法)狂犬病毒概述:狂犬病是由狂犬病毒(RV)引起的人备共患的急性高度致死性传染病,狂犬病一旦发病,死亡率几乎是100%,狂人疫苗接种是目前人类对抗狂人病的唯一有效方法。对潜伏期的狂犬病毒感染者,早检测早发现,及时注狂犬病疫苗有一定意义!标健生物专供的人狂犬病毒IgG抗体ELISA试剂盒可用接种狂犬病疫苗后,或潜伏期内的狂犬病毒感染者,对其免疫机体的抗体IgG免疫水平监测。产品简介:人狂犬病毒IgG抗体ELISA试剂盒采用双抗原夹心法定量检测人血液中狂犬病毒IgG

2、抗体,可对接种狂犬病疫苗后,或潜伏期内的狂犬病毒感染者,对其免疫机体的抗体IgG免疫水平监测。检测原理:木试剂盒应用双抗原夹心法测定标木中人狂犬病病毒抗体IgG表达水平。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品屮狂犬病病毒抗体IgG相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗原-廨标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酚的催化卜•转化成蓝色,并在酸的作用F转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值札I

3、比较,从而判定标本中人狂犬病病毒抗体IgG存在与否。试剂盒主要组成:1、酶标包被板96孔XI块2、样品稀釋液6mlX1瓶3、酶标试剂6mlXl瓶4、30倍浓缩洗涤液20mlXI瓶5、显色剂A液6mlX1瓶6、显色剂B液6mlXl/瓶7、阴性对照0.5mlXI瓶8、阳性对照0.5mlXI瓶9、终止液6mlXl瓶10、封板膜2张11、密封袋1个12、原版说明书1份包装规格:96T/盒储存条件:于2-8°C干燥、阴凉处保存有效日期:有效期为12个月生产企业:广州市标健生物科技有限公司标本要求:1、建议标本采集

4、后应尽早进行提収,提収请按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于・20°C保存,但应避免反复冻融。2、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。检验方法:(请按顺序进行)编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孑L、阳性对照2孑L、空白对照1孑L(空口对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50Plo然后在待测样品孔先加样品稀释液40山,然后再加待测样品lOpIo加样将样品加于酶标板

5、孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸饰水30倍稀释后备川。洗涤:揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,扌n干。加酶:每孔加入腮标试剂50ul,空白孔除外。温育:操作同上温冇方法。洗涤:操作同上洗涤方法。显色:每孔先加入显色剂A50pl,再加入显色剂B50nl,轻轻震荡混匀,37°C避光显色15分钟。终止:每孔加终止液50Pl,终I上反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依

6、序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果的判读:1、试验有效性:阳性对照孔平均值>1.00;阴性对照平均值W0.102、临界值(CUTOFF)计算:临界值二阴性对照孔平均值+0.153、阴性判定:样品0D值<临界值(CUTOFF)者为狂犬病病毒抗体IgG阴性4、阳性判定:样品0D值M临界值(CUTOFF)者为狂犬病病毒抗体IgG阳性注意事项:壹:试验完成后,所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。贰:试剂盒从冷藏环境屮取岀应在室

7、温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封示如未用完,板条应装入密封袋中保存。a:浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释吋可在水浴中加温助溶,洗涤吋不影响结果。肆:封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。伍:底物请避光保存。陆:试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测吋,参考波长为630nm.柴:操作严格按照说明书进行,木试剂不同批号组分不得混用。

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