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《一例犬冠状病毒感染的诊断与治疗》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、1—刖B犬冠状病毒可使犬发牛稈度不同的胃肠炎症状，特征有频繁呕吐、腹泻、沉郁、厌食等症状。本病一年四季均可发生，以冬季多发，病犬是主要的传染原，犬可通过呼吸道、消化道、粪便及污染物传染。该病一但发生，同窝犬同室犬很难控制均可造成感染。该病经常和犬细小病毒，轮状病毒及其它胃肠道疾病混合感染。本文就一例犬冠状病毒感染的诊断与治疗报告如下。正文1•病例介绍泰迪，4月龄，体重0.9kg,母犬，体温39.3°C,未免疫。5月16日出现拉稀症状，未见到呕吐，食欲尚可。最近大便偶尔有血丝，有鼻涕，肺部听诊出现湿啰音。有喘鸣音,咳嗽，干呕。CPV(-),CDV(-
2、),CCV(+)o2」临床诊断犬冠状病毒感染主要表现为呕吐、腹泻、脱水、休克等肠炎综合征,但只能做为临床诊断指标，最后确诊还需通过实验室检查。动物医院釆用CCV病毒测试板进行诊断，其原理为免疫胶体金技术。免疫胶体金技术(Immunecolloidalgoldtechnique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸(HAuCI4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸椽酸钠、糅酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团
3、形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。犬冠状病毒(CCV)抗原快速检测试纸使用方法：①操作步骤：I用棉签收集犬粪便。II将棉签浸入装有反应缓冲液的样品收集管。Ill将棉签上的样品和反应缓冲液充分混匀。IV取出试纸，将它平放于宽敞和干燥的表面。V使用提供的滴管，吸取被萃取过
4、的样品混合液。VI用滴管向样品孔中缓慢并且精确地加入4滴混合液。VII当反应进行时，你会看到紫色的条带在试纸中间的结果窗中移动。vm5〜10分钟后判断结果，不要超过20分钟。②判断结果：阳性结果：如果在结果窗中出现两根条带(“T和“CJ,无论哪条先出现都表明阳性结果，阳性结果表明犬己感染犬冠状病毒。阴性结果：如果在结果窗中出现一根条带(“C”)，则表明对象犬体内无冠状病毒。实验室检查屮还涉及到多种国内外使用的方法，在这里做一简单介绍。21病原学检查2.1.1电镜观察取粪便用氯仿处理，低速离心，取上清液，低于铜网上，经磷餌酸负染后，用电子显微镜观察是
5、否有特殊形状的病毒粒子。该法快速。去上清液与免疫血清作用，使病毒粒子特异性凝集，则有助于诊断。该方法是目前确诊CCV感染的最快速也最可靠的方法。Takeuchi(1976)>Williams(1980)>Tingpalapong(1982)Yasoshima(1983)>周向阳(1990)>Martin(1991)>Finlaison(1995)等分别釆用电镜负染技术进行了CCV感染的诊断和流行病学调查。Pensaert(1981)等人采用免疫电镜技术检查CCV感染，提高了敏感性。2.1.2荧光抗体技术应用CCV特异荧光抗体直接对肠粘膜或刮取的肠粘
6、膜细胞进行染色，如在胞浆中发现特异荧光，可确定为CCV感染eWilliam(1986)采用直接荧光抗体技术,评价了CCV弱毒疫苗免疫的犬，病毒在肠道的增殖情况。另外,先用特界抗体(第一抗体)作用后，再用荧光抗体标记的第二抗体作间接荧光抗体检查，可通过荧光细胞的有无而确诊。Keenan(1976)采用间接荧光抗体技术检查了人工接种CCV病犬,发现在接种后2天可在十二指肠见到荧光细胞,接种后4天可在冋肠见到荧光细胞。2.1.3夹心ELISA法Tuchiya(1991),首先建立了CCV的双抗体夹心ELISA方法，发现该法与间接荧光抗体方法检测CCV抗原
7、结果一致，具有良好的特异性oRimmelzwaan(1991)在荷兰进行犬细小病毒、冠状病毒和轮状病毒性肠炎的流行病学调查中,亦建立了双抗体夹心法。该法具有简捷方便，适于大规模检查犬细小病毒、轮状病毒和CCV抗原等优点。我国范泉水等人采用纯化病毒免疫豚鼠制备CCV特异抗体,建立了CCV双抗体夹心ELISA法,其检查结果与电镜检查结果一致。2.1.4病毒分离与鉴定取典型病犬新鲜粪便，经常规处理后，接种于A72细胞或犬肾原代细胞上培养，用特界抗体染色检测是否存在病毒，或待细胞出现CPE后，用已知阳性血清作中和试验鉴定病毒。为提高病毒分离率，粪便要新鲜，
8、避免反复冻结。CCV分离虽然困难，但国内外均有分离成功的报道。Binn(1971)首次从一患腹泻的军犬粪便中分离CCV获得
