限制内切核酸酶复习题及答案

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1、限制内切核酸酶复习题及答案一、填空题1・基因工程中把那些具有识别双链DNA分子中的某种特定核昔酸序列，并由此切割DNA双链结构的内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。2.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的限制酶切图谱。3.II类限制性内切核酸酶分子质量较小，一般在20〜40kDa。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，II类酶既具有切割位点的专一性,也具有识别位点的专一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有平

2、切和交错切，产生平末端的DNA片段或突出黏性末端的DNA片段。作用时需要Mg2+作辅助因子，但不需要ATP和SAMo4.完全的回文序列具有两个基本的特点:①能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补配对;②两条互补链的亍一3,的序列组成相同，即将一条链旋转180。,则两条链重叠。2.II类限制性内切核酸酶一般识别4〜6个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸酶。3.个体之间DNA限制性片段长度的差异叫限制性片段长度多态性(RFLP)o4.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自属名的第一个字母,第二、三两个字母取自种名的

3、前两个字母，第四个字母则用菌株名表示。8•限制性内切核酸酶力砂1识别的序列是亍-GRCGYG-3，，其中R代表A或者T,Y代表G或者C。9.在酶切反应管加完各种反应物后，需要离心几秒钟，其目的是混合均匀和防止部分酶切。10.基因组DNA分子部分酶切消化可采取的措施有：①减少酶量；②缩短反应时间；③增大反应体积等。11・第一个分离得到的限制性内切核酸酶是尿oK,而第一个用于构建重组DNA分子的限制性内切核酸酶是屁oRI12.限制性内切核酸酶〃s冰I和血eIII的来源不同，但识别的序列都是GGCC,,因此他们属于同裂酶。割频率的理论值应该是4n。14.部

4、分酶切是指控制反应条件，使得酶在DNA序列上的识别位点只有部分得到切割，它的理论依据是酶切速度是不均衡的。15.I类限制酶识别DNA的位点和切割的DNA位点是不同的，切割位点的识别结合有两种模型,种是限制酶移动，另一种是DNA弯曲。16.限制性内切核酸酶通常保存在50%浓度的甘油溶液中。二、选项题（单选或多选）1.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有（B）不太恰当。A.由作用于同一DNA序列的两种酶构成B.这一系统中的核酸酶都是II类限制性内切核酸酶C.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D.不同的宿主系统具有不同的限制

5、一修饰系统2.RFLP产生自（C）。A.E.不同探针的使用3.II类限制性内切核酸酶（B）。A.有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列使用不同的限制性内切核酸酶B.每种类型的染色体有两条（二倍体）C.DNA序列中碱基的随机变化D.Southern印迹B.仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C.限制性识别非甲基化的核昔酸序列D.有外切核酸酶和甲基化酶活性E.仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供4.Ill型限制性内切核酸酶（C）oA.由两个亚基组成，仅识别半甲基化位点。甲基化位点相对于限制位点的位置（上游或下游）决定TDNA

6、是被甲基化还是被限制1=1B.不同亚基的识别位点甲基化和限制活性相互排斥：MS亚基促使甲基化，R亚基促使限制C.由两个亚基组成，在识别位点附近识别并进行甲基化或限制D.在错配修复中起关键作用，因为酶结合到DNA上是以结构扭曲为基础而不是序列错误识别5.分析限制性内切核酸酶切割双链DNA所得到的DNA片段的长度有助于物理作图，这是因为（c）。A.即使只用一种限制酶，因为DNA是线性的，所以也可以迅速确定限制性片段序列B.内切核酸酶在等距离位点切割DNA,同时对于每个生物体的长度是特异的C、DNA的线性意味着单限制酶切片段的长度之和等于DNA的总长,而双

7、酶切产生的重叠片段则产生模糊的图谱B.这些内切核酸酶的消化活性是物种特异的C.这一技术同时为核昔酸序列提供了广泛信息6、通过限制性片段分析，可以对等位基因进行精确的分析比较，其原因是（BD）oA.限制性内切核酸酶只切割两个变异等位基因中的一个B.它利用限制性位点作为遗传标记C、一个特定细胞中等位基因的核昔酸序列不会是相同的D.它不依赖于变异等位基因产物的功能E.限制性内切核酸酶的切点被限制在DNA的编码区域内7、限制性片段长度多态性（RFLP）是（C）。A.用于遗传的“指纹结构”模式分析的技术B.二倍体细胞中的两个等位基因限制性图谱的差别C.物种中的

8、两个个体限制性图谱间的差别D.两种物种个体间的限制性图谱差别E.两种酶在单个染色体上限制性图谱的差别F面有关