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《猪囊尾蚴cdna文库的免疫学筛选和新基因的发现》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·4·ChinJDisControlPrev2008Feb;12(1)猪囊尾蚴cDNA文库的免疫学筛选和新基因的发现1,2131,41黄丽,郑胜生,孙军民,广圣芳,汪学龙【摘要】目的从猪囊尾蚴cDNA文库中筛选免疫学阳性蛋白的编码基因,为临床猪囊尾蚴患者的免疫学诊断提供特异的重组抗原。方法用脑囊尾蚴病人血清免疫学筛选猪囊尾蚴cDNA文库,阳性克隆经PCR技术扩增噬菌体载体中插入的DNA片段,并将其克隆入PMD218T质粒载体中,测序结果与GenBank中的核苷酸序列进行同源性分析。结果血清免疫学筛选后,从猪囊尾蚴cDNA文库中挑取了4个阳性斑,PCR后4个片段大小约在200～
2、1800bp,3个大的片段测序结果经分析表明均含有完整开放阅读框,同源序列分析结果显示获得的3个基因片段与GenBank中已知的猪囊尾蚴蛋白基因无同源性。结论本试验中所发现的基因均是猪囊尾蚴新基因,为进一步基因克隆、表达和鉴定等研究奠定了基础。【关键词】囊尾蚴;基因文库;克隆,分子;序列分析【中图分类号】R383.34【文献标识码】A【文章编号】100826013(2008)0120004204ImmunoscreeningoftaeniasoliummetacestodescDNAlibraryanddiscoveryofnewgenesHUANG1,2131,41Li,Z
3、HENGSheng2sheng,SUNJun2min,GUANGSheng2fang,WANGXue2long.1.De2partmentofParasitology,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230032,China;2.AnhuiCollegeofTraditionalChineseMedicine,Hefei230038,China;3.SchoolofPublicHealth,AnhuiMedicalUniversity,Hefei230032,China;4.LuanPeople’sHospital,Luan237005,China【A
4、bstract】ObjectiveTodiscovernewdiagnosticproteingenes.MethodsTaeniasoliummetaces2todescDNAlibrarywasimmunoscreenedwithmixtureserumofTaeniasoliumneurocysticercosis.The4positivecloneswereselected.TheinsertgeneswereamplifiedwithPCR.TheproductsfromPCRwereclonedintopGEM2Tvectorandfollowedbysequen
5、cing.ThegenesobtainedwerecomparedagainstEMBL2parasitesdatabaseandGenBankdatebasebyBLASTnandBLASTx.ResultsAtotal4positivecloneswererandomlyselectedforsequencing.Fromtheseclones,3EST2qualitysequenceswereob2tained.Theywereputativelyidentifiedsequenceofotherorganisms,andhadnomatchesinthedatabas
6、eofTaeniasoliummetacestodes.ConclusionsNewgenesofTaeniasoliummetacestodeshavebeendis2covered.Itprovidesthebasisforfurtherstudyonitsimmunologicaldiagnosis.【Keywords】Taeniasoliummetacestodes;Genelibrary;Cloning,molecular;Sequenceanalysis(ChinJDisControlPrev2008,12(1):427)[1～3]囊尾蚴病是由猪带绦虫的中绦期囊尾
7、蚴引起的市有流行。目前,临床上尤其是深部组织的囊一种危害严重的人畜共患寄生虫病。该病呈世界性尾蚴病主要依赖于血清免疫学及影像学进行诊断。分布,以发展中国家较为多见;我国人体囊尾蚴病分市售猪囊尾蚴病诊断试剂主要是用虫体抗原检测病布广泛,据新近统计在29个省(区/市)的675个县人血清中的循环抗体,易与其他寄生虫病产生交叉反应,且虫源抗原短缺,应用受到一定的限制。【基金项目】安徽省高等学校青年教师科研资助计划自然科本研究采用脑囊尾蚴病人血清筛选囊尾蚴cD2学项目(2006jq1094);安徽医科大学科学技术
