动物细胞工程一轮学案

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1、动物细胞工程【考纲要求】1.动物的细胞培养与体细胞克隆（I）。2.细胞融合与单克隆抗体（I）。【复习要求】1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。2•比较动物细胞培养与植物组织培养区别。3.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。【基础知识】一.动物细胞培养和动物体细胞核移植技术1.动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）-＞剪碎-＞用处理分散成单个细胞-＞制成细胞悬液一＞转入培养瓶中进行培养T

2、贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续培养。（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（4）动物细胞培养需要满足以下条件①的环境：培养液应进行无菌处理通常还要在培养液中添加一定量的抗生素。此外，应防止培养过程中的污染，定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。合成培养基成分：通常需加入血清、血浆等天然成分③温度：哺乳动物多是左右；pH：o④气体环境：95

3、%空气+5%CO2作用：O2是细胞代谢所必需的CO2维持培养液的o（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵（母）细胞做受体细胞的原因：卵（母）细胞比较—，容易操作；卵（母）细胞含有促使细胞核全能性表达的物质和条件。（3）体细胞核移植的大致过程是："14陌忌妇舸心凯细胞勒经元肝始胞治疗性克隆的过程:（4）体细胞核移植技术的应用：诲号形成特定:內然言（供患看本人移（S用）

4、①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量;③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。二.动物细胞融合和单克隆抗体1.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，物理方法：，化学方法：，生物方法：O（3）动物细胞融合的意义：,

5、成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。2.单克隆抗体的制备（1）抗体：一个B淋巴细胞分泌。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。（2）单克隆抗体的制备过程：(3)杂交瘤细胞的特点：(4)2种培养方法及提取单克隆抗体的场所A.体外培养一提取。B.体内小鼠腹腔中培养——小鼠中提取(5)单克隆抗体的优点：(6)单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”，也有少量用于治疗其它疾病。【探究过程】知识探究

6、一：动物细胞培养结合右图动物细胞培养的示意图，判断下列说法是否正确：(1)(2)(3)(4)(5)(6)(7)(8)实验的材料使用幼龄动物还是老龄动物的组织对实验无影响。过程②加入的酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶，也可以是胃蛋白酶。过程④细胞培养一般会出现贴壁生长和接触抑制两种现象。动物细胞培养的原理是细胞的全能性，培养结果是得到个体。过程⑤操作时不需要再次使用酶。一般将动物组织消化后的初次培养称为传代培养。传代培养的细胞一定会发生细胞核型的变化变为癌细胞。与植物组织培养过程相似，该过程也需要处于无菌、无毒环境。与植物组织培养过程相比，该过程添加的C源有葡萄糖。(10)动物细胞

7、培养使用的培养基中也需要加入琼脂使其凝固。④(9)（11）由于人们对移植了细胞所需的营养物质，因此培养基中不需要血清、血浆等成分。（12）动物细胞培养过程的CO2的作用是维持培养液的PHo（13）利用该技术可以检测有毒物质，也可以进行生理、病理等研究。特别提醒：（1）植物组织培养需要生长素和细胞分裂素，生长素可诱导愈伤组织生根，细胞分裂素可促进愈伤组织生芽。（2）动物细胞的传代培养过程中，细胞可能癌变。（3）两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。（4）植物组织培养最终产生新个体，体