GBT19567.1-2004苏云金芽胞杆菌原粉

《GBT19567.1-2004苏云金芽胞杆菌原粉》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、免费标准下载网(www.freebz.net)ICS65.100.10一一G25汤黔中华人民共和国国家标准GB/T19567.1-2004苏云金芽胞杆菌原粉Bacillusthuringgiensistechnical2004-06-22发布2004-12-01实施宰督音瞥臀瓣臀攘臀臀暴发布免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB/T19567.1-2004前言苏云金芽胞杆菌（Bacillusthuringiensis,B.t.）是目前应用最

2、广泛的一种微生物杀虫剂，它的主要杀虫成分是伴胞晶体中的毒素蛋白，其中，本标准所检测的对鳞翅目害虫有毒力的毒素蛋白的相对分子量为130kDa。生物测定中甜菜夜蛾用于检测对鳞翅目贪夜蛾属害虫有特性的苏云金芽胞杆菌原粉的毒力，小菜蛾和棉铃虫用于检测对苏云金芽胞杆菌鳞翅目害虫有活性的苏云金芽胞杆菌原粉的毒力。本标准是根据我国以往制定的苏云金芽胞杆菌行业和企业标准等有关材料，结合我国的实际情况制定的。本标准对苏云金芽胞杆菌原粉的要求、试验方法、抽样以及包装、运输等作了具体要求和规定，从而为苏云金芽胞杆菌生产提供了统一的技术

3、依据。本标准的附录A是资料性附录，附录B是规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准起草单位：农业部农药检定所、华中农业大学微生物农药国家工程研究中心、湖北省生物农药工程研究中心。本标准主要起草人：姜辉、喻子牛、陈守文、王开梅、王晓军、吴新平、顾宝根。本标准由农业部农药检定所负责解释。标准分享网www.bzfxw.com免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB/T19567.1-2004苏云金芽胞杆菌原粉1范围本标准规定了苏云金芽胞

4、杆菌原粉的要求、试验方法以及标志、标签、包装、贮运。本标准适用于防治鳞翅目害虫的苏云金芽胞杆菌原粉。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T1250极限数值的表示方法和判定方法GB/T1600-2001农药水分测定方法GB/T1601农药pH值的测定方法GB/T1604商品农药验

5、收规则GB/T1605-2001商品农药采样方法GB3796农药包装通则GB/T16150-1995农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法3要求3.1外观：灰白色或棕褐色粉末。3.2苏云金芽胞杆菌原粉应符合表1要求。表1苏云金芽胞杆菌原粉控制项目指标牛一幸一4试验方法除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，所述溶液均为水溶液。免费标准下载网(www.freebz.net)无需注册即可下载免费标准下载网(www.freebz.net)GB/T19567.1-20044.1抽样按照GB/T1605-2001中“商品原药采样

6、”进行，用随机数表法确定抽样的包装件，最终抽样量不少于1009a4.2毒素蛋白含f用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酞胺(SDS-PAGE)凝胶图像处理法进行测定。4.2.1方法提要用碱性溶液处理苏云金芽胞杆菌原粉中的伴胞晶体，使其降解为毒素蛋白，然后通过SDS-PAGE,依蛋白质相对分子质量的差异，使毒素蛋白与苏云金芽胞杆菌杂蛋白分离，之后用电泳图像扫描蛋白区带面积，进行定量。4.2.2仪器、设备a)电泳仪；b)双垂直式电泳槽（(1.5mm凹形带槽橡胶模框），凝胶板面积170mmX170mm(l.5mm,20孔样品槽模具

7、）；c)电泳凝胶成像系统；d）离心机：10000r/min;e)分析天平：精确至0.0001ga4.2.3试剂和溶液4.2.3.1过硫酸钱(APS)o4.2.3.2十二烷基硫酸钠（SDS)o4.2.3.3四甲基乙二胺（TEMED)o4.2.3.4氢氧化钠。4.2.3.530％丙烯酞胺凝胶母液：称取丙烯酞胺30g，亚甲基双丙烯酞胺（原称：甲叉双丙烯酞胺）0.8g,溶于100mL蒸馏水中，过滤，于4℃暗处贮存备用。4.2.3.6分离胶缓冲液：称取三经基甲基氨基甲烷（Tris)18.17g和SDS0.4g溶于蒸馏水中，

8、用浓盐酸调至pH8.8，用蒸馏水定容至100mLo4.2.3.7浓缩胶缓冲液：称取Tris6.06g和SDS0.4g溶于蒸馏水中，用浓盐酸调至pH6.8，用蒸馏水定容至100mLo4.2.3.8电极缓冲液：称取Tris3.036g，甘氨酸14.42g,SDS1g，用水溶解并定容至1000mLo4.2.3.93X样品稀释液：1mol/L,pH6.8Tris-HCI18.75