现代生物科技专题二

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1、专题一1・根据基因工程的有关知识，回答下列问题。(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有和(2)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下：AATTCGG……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR1切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。(3)按其来源不同，基因工程屮所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是,产物是o若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。(5)基因工程中除质粒外，和也可作为运载

2、体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。答案(1)黏性末端平末端(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同(3)E•collT4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌体动植物病毒⑹未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱解析此题考查基因工程应用的相关知识。(1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一种

3、限制酶切割产牛的末端必须与EcoRI切割产牛的末端相同。(1)根据酶的来源不同，DNA连接酶分为E*coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。(2)以RNA为模板，合成DNA的过程称为逆转录，若要体外获得大量DNA分子，可以使用PCR技术。（5）在基因工程中，通常利用质粒作为运载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。（6）大肠杆菌作为受体细胞时，常用C/+处理，使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。2•下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。请据图回答：（1）获得A有两条途

4、径：一是以A的mRNA为模板，在的催化下，合成互补的单链DNA,然后在作用下合成双链DNA,从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需基因。⑵利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系屮添加的有机物质有、、4种脫氧核昔酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为o（4）在基因工程中，常用C产处理D,其日的是o答案（1）逆转录酶DNA聚合酶氨基酸脫氧核昔酸（2）

5、引物模板（A基因）（3）基因表达载体（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子解析（1）利用反转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下，合成双链DNA分子；根据蛋口质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋口质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核廿酸的排列顺序，通过化学方法合成。（2）PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。（3）目的基因和载体结合，形成基因表达载体。（4）在利用

6、大肠杆菌做受体细胞时，需要先用C产处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子。3.科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器牛产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。人凝血因子IX基因绵羊胎儿成纤维细胞师选鉴定►整合有目的基因的成纤hI维细胞I卵母细胞

7、丄魁⑴由过程①获得的A为。(2)在核移植Z前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是。受体应选用期卵母细胞。⑶进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用

8、胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为o答案(1)含目的基因的表达载体(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞Mil(3)免疫排斥反应(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养解析⑴根据题意可知，要将人凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞，必须构建基因表达载体，所以由过程①获得的A为基因表达载体。(2)为保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分裂中(MII中)期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代

9、孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养。3.阅读如下材料：材料甲科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。材料乙T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶