复合酶解制备海蜇抗肿瘤肽活性研究【毕业论文】

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1、本科毕业论文（20届）复合酶解制备海蜇抗肿瘤肽活性研究专业：药学目录1前言32实验材料与仪器42.1材料与试剂42.2主要仪器43实验方法43.1海蜇活性肽的制备43.2分离、纯化海蜇抗肿瘤活性肽53.3海蜇抗肿瘤肽的活性测定54实验结果及讨论64.1分离纯化64.2海蜇初酶解液的抗肿瘤活性测定64.3海蜇复合酶解液的抗肿瘤活性测定85小结11[参考文献]12[摘要]目的：从海蜇(Rhopilemaesculentum)中分离纯化活性肽，并研究其抗肿瘤活性。方法：海蜇经碱性蛋白酶初酶解、胰蛋白酶二次酶解后得复合酶解液，将酶解液、复合酶解液分别离心，

2、收集上清液得海蜇活性肽粗品。粗品经超滤、SephadexG-15凝胶层析、冷冻干燥纯化得海蜇抗肿瘤活性肽，通过MTT法测定了初酶解产物对人前列腺癌细胞、肺癌细胞体外增殖的影响，以及复合酶解产物对人前列腺癌细胞、肺癌细胞、胃癌细胞体外增殖的影响。结果：从海蜇中分离纯化得到多种活性肽，MTT法表明了海蜇初酶解产物对肿瘤细胞的增殖有较强的抑制作用，复合酶解产物对肿瘤细胞具有抑制作用并有明显的量效依赖关系。结论：复合酶解制备的活性肽对肿瘤细胞有抑制作用。[关键词]海蜇；复合酶解；抗肿瘤；活性肽12Studyonanti-tumoractivityofthe

3、peptidePurifiedFromjellyfishbycompositeenzymatichydrolysis[Abstract]Objective:Toisolateandpurifythepeptidefromthejellyfish(Rhopilemaesculentum),andinvestigateditsanti-tumoractivity.Methods:First,jellyfishwashydrolysedbythealkalineproteaseenzymeandtrypsin,wecangettheenzymesolut

4、ion,andaftercentrifugalthetwokindsofenzymesolution,jellyfishcrudepeptidescanbegotbycollecttingthesupernatant.Then,crudeproductwaspurifiedbyultrafiltration,SephadexG-15gelchromatography,andfreeze-dryingandwouldtobethepeptidewithanti-tumoractivity.Last,byMTTmethod,theenzymedsolu

5、tion’sinfluenceontheproliferationinvitroofhumanprostatecancer,lungcancercellswasdetermined,aswellascomplexhydrolysate’seffectonproliferationofhumanprostatecancer,lungcancercellsandgastriccancercellsinvitrowasdetermined,too.Results:Fromthejellyfishavarietyofactivepeptidescanbei

6、solatedandpurified,andMTTmethodshowedthattheenzymeproducts’effectontumorcellproliferationwasstronglyinhibitedandthecompoundhydrolyzatecaninhibitthetumorcellswithasignificantdosedependent.Conclusion:Theactiviepeptidepreparedbycompositeenzymatichydrolysisinhibitedtumorcells.[Key

7、words]jellyfish；compositeenzymatichydrolysis;anti-tumor；activepeptides121前言恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病，已成为我国人口死亡的最主要原因之一。2005年全球共有约750万人死于恶性肿瘤，我国每年约有130万人死于癌症，并且发病率呈逐年上升趋势。药物治疗是恶性肿瘤综合疗法中的一种重要方法，传统的抗癌药物研究主要着重于细胞毒药物的研发，细胞毒类抗肿瘤药物是目前化学治疗的一种主要手段，并在未来的相当长时期内仍将占据主导地位。近年来，生命科学的迅速发展为肿瘤治疗提供了许多新的

8、、令人感兴趣的肿瘤治疗途径，肿瘤的血管系统、癌基因产物及信号转导通路成为抗癌药物作用的新靶点[1]。海洋是一个巨大的天然产