显微镜的使用及观察动物组织

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1、实验一显微镜的使用及观察动物组织李国卫131140075一、实验目的1•生物量级和胚层的发育。2•细胞及基本生物组织结构。3.掌握显微镜的结构功能、成像原理及使用操作。4.了解平像场物镜、色差、暗视野明视野、干涉、萤光等对成像的影响与作用。二、实验原理1、光学显微镜主要由调焦部分、载物台、聚光器、目镜和物镜组成。物镜将标本成倒立放大的实像，实像经目镜再次放大后成放大的虚像被人眼所观察。显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。2、生物界类群：1）、原核生物界：真细菌类群；古细菌：甲烷菌、嗜盐菌、嗜热酸菌。2）、原生生物界：原生动物

2、；藻类；黏菌。3）、真菌界：接合菌；子囊菌；担子菌；半知菌。4）、植物界：苔蘇类植物；维管植物：无种子（石松、木贼、真蕨类）；有种子：裸子植物、被子植物（单子叶植物、双子叶植物）。5）、动物界：侧生动物（海绵）；辐射对称动物（刺胞动物门，水母、水蝮；栉水母动物门，海胡桃）。两侧动物无体腔动物（涡虫）；假体腔动物（线虫）；真体腔动物：原口动物（环节动物、软体动物、节肢动物）；后口动物（棘皮动物、半索动物、脊索动物）。6）、脊索动物：仇类；两栖类；爬行类；鸟类；哺乳类。3、分辨力（resolution）人眼距目标物25厘米处，或者显微镜，能

3、够分辨最小间隔Z能力，单位是距离。R=KX/nSina/2，说明：《是透镜品质，光学透镜与电磁透镜的品质，光学一般在0・61~1.0Z间；入光镜/电镜Z光波波长/电子波n光镜之介质折射率；a镜口角，样本对物镜之镜口张角，一般小于180度，Sina/2小于1。N.A.镜口率（numericaperture）,nSina/2,分辨力之影响因子。4、胚胎发育的胚胎期胚层发育方向：受精卵一桑棋胚一胚泡一三个胚层外胚层发育出神经系统（包括脑、脊髓、脊神经、口主神经、视网膜、内耳及肾上腺髓质），表皮（包括毛发、汗腺、油脂腺、乳腺、晶体及口腔黏膜）。

4、中胚层发育出肌肉、骨骼、血液、真皮、心脏血管系统、泌尿生殖系统和结缔组织等。内胚层发冇出消化系统和呼吸系统的上皮和冇关的腺体（如胰、肝）以及膀胱上皮等。三、材料与器材1.实验材料：13张组织标本玻片2•实验设备：光学显微镜四、方法与步骤1.实验分组2.实验报告格式要求3•光学显微镜原理、结构、操作讲解。4.光学显微镜的操作与观察1）安放显微镜，插上电源，打开开关。2）检查仪器。3）放上玻片，调节光量。4）用低倍镜寻找实物视野5）换用高倍镜，对焦观察。五、实验观察结果杯状细胞六、实验结论气管上皮由数量众多的的柱状上皮细胞。表而覆盖纤毛，纤

5、毛能够向咽喉作规律性摆动，使粘膜表面的粘液、粉尘等推向喉部聚集成痰，最终以吐痰的方式排出体外，使人体吸入的空气得到净化。人体在遭受细菌、病毒侵害或吸入有害气体时，纤毛变性、膨胀或消失，以致痰废液不能及吋排出，导致气道堵塞，出现呼吸困难等症状。上皮述冇杯状细胞，数量较多，嵌于纤毛柱状细胞Z间。肥大细胞圆或卵圆形，其细胞核常呈三角形，常成群聚集在小血管旁，胞质内充满粗大的嗜碱性颗粒,颗粒屮含有黏蛋白（一种糖蛋白，PSA反应阳性），故称黏原颗粒，醛复红染色呈紫色。杯状细胞中的黏原颗粒，分泌后于黏膜表面形成一层粘液性屏障，可吸附空气中的粉尘异物

6、，溶解CO、S02等有害气体。基细胞体积较小，呈锥形或三棱形，沿基膜排列，不与腔而直接相连。冇较大的细胞核口核仁明显。基细胞分化程度较低，可分化为纤毛柱状细胞和杯状细胞等。在一定条件下，可以使黏膜上皮转为复层扁平上皮。透明软骨成“C”形骨环，与纤维性结缔组织构成。软骨环为支架结构，可保持气管畅通。软骨Z间以环状韧带相连接。在软骨环缺口处含有富含弹性纤维组织相连，内含平滑肌束，可调节气管的管径。七、问题解答1、相差、微分干涉、暗视野、萤光显微镜术的基本原理？相差显微镜有环形光阑的聚光器、带有相板的相差物镜。当光线经过相差聚光器、样品、相差

7、物镜，将光束分为两部分，，一部分是样品结构的折射光，另一部分为不受样品影响的光，经过相板，二者干涉，形成干涉图像。由于两束光的相位接近X/2,相差显微镜使相位变化转为振幅变化，形成反差分明的图像。微分干涉显微镜术是用平面偏振光经棱镜折射后分成两束，于不同时间经过样詁的相邻部位，此后又经另一棱镜将此两束光汇合，使样品厚度的微小区别形成明暗差异，増强样品反差并具立体感。暗视野显微镜与普通光镜主要不同点是聚光器不同。照明的光线不直接进入物镜，因此视野是黑暗的。通过样品本身的光反射和折射的光进入物镜形成亮的彖。在黑暗背景中观察到发亮的细胞结构。

8、荧光显微镜可观察细胞屮的荧光。当用激发光照射时，细胞发射荧光。这种荧光被称为原发荧光，由细胞中固冇的荧光物质［比如还原辅酶T(NADH):发出的。另一种是用荧光染料对细胞中的成分进行特异染色,再经激发光照射