《陈新-生理科学实验教学资料》实验13缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制

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1、实验13缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响李丹阳高钦钦吕凯(浙江大学医学院，临床医学二系0301,3031821009)【摘要】目的学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程小呼吸的反应及血液色泽和全身一般悄况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响。方法通过复制动物模型，观察不同类型缺氧过程小呼吸、黏膜和血液色泽的变化。通过测定耗氧虽:和小鼠的存活吋间来观察小枢神经系统机能抑制和低温对缺氧的影响。结果中枢神经系统功能抑制和低温対动物耐受缺氧的影响与対照组相比，存活时间和耗氧率均有显著性差异；复制不同原因造成的

2、不同缺氧类型小鼠都表现出了不同的呼吸频率和存活时间的变化。结论屮枢神经系统机能抑制和低温使小鼠的存活时间显著延长，耗氧率显著降低。不同原因导致的缺氧类型中，CO中毒与NaNO?组小鼠的存活时间明显缩航美蓝的治疗效果明显。【关键词】缺氧动物模型中枢抑制低温耗氧率当供应纽织的氧不足，或组织利用氧障碍时，机体的机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧。根据缺氧的原因不同可将缺氧分为乏氧性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织屮毒性缺氧I川种类型。彩响机体对缺氧耐受的因素很多，木实验主要研究代谢率的影响。体温降低神经系统功能受抑制能降低机体的耗氧率使缺氧耐受力升高。1•

3、材料和方法1.1实验动物小白鼠。1.2药品氯丙嗪(chlorpromazine)、钠石灰(sodaLime),亚硝酸钠(sodiumnitrite)、亚甲基蓝(美蓝)(methyleneblue,MB)>0.9%NaCl(physiologicalsalinesolution)、CO(carbonmonoxide)o1.3器材缺氧瓶测耗氧装置100、500mlr口瓶和测耗氧装置。1.4方法1.4.1中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响取2只性别相同体重相近的小鼠，准确称取体重，并随机分为牛理盐水组和氯丙嗪组。氯丙嗪组按0.1ml/10g体重腹腔注射0.25%氯丙

4、嗪，随即安放在冰浴的纱布上10〜15min,使呼吸频率降至70-80次/min；生理盐水组按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水，室温放置10-I5min,作为对照。之后将2只小鼠分别放入100M1的广口瓶内，连接好测耗氧装置。如右图。1.4.2不同原因造成的缺氧取2只性别相同体重相近的小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组。乏氧性缺氧组小鼠放入含冇5g钠石灰的100ml密闭瓶中；一氧化碳中毒组小鼠放入500ml密闭瓶，注入10mlCO气体。另収2只性别和同体重相近的小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组。亚硝酸纳组小鼠腹腔注射50g/L亚硝酸纳0.2ml,并

5、随即腹腔注射生理盐水0.2ml；亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射5()g/L亚硝酸纳0.2ml后即刻腹腔注射10g/L亚甲基蓝0.2mlo2.观察项目2.1中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响记录下小鼠的体重W(g)0从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡，分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠的存活时间T(min)、总耗氧量A(mL)o按以下公式计算出总耗氧率R[mL/(g•min)]：R[mL/(g•min)]=A(mL)4-W(g)4-T(min)2.2不同原因造成的缺氧乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组：处理前分別测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待塞紧瓶塞开始记时后，毎

6、隔5min测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组：处理前分别测出两鼠的正常呼吸频率(次/min)。待注射药品后,每隔5min测一次呼吸频率(次/min),并观察两鼠的行为以及耳、尾、口唇等的颜色变化，直至小鼠死亡。记录死亡时间。将4只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色的不同。3.结果3.1中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响氯内嗪组小鼠耐缺氧时间为48.7±10.5min,生理盐水组小鼠耐缺氧吋间为23.3±4.5min,两者相比冇高度显著性差异(P<0.01)

7、o氯丙嗪组小鼠的耗氧量为10.4+3.1ml,生理盐水纽小鼠的耗氧量为13.6±2.8ml。氯丙嗪组小鼠的耗氧率为1」%±0.5%(ml/g/min),纶理盐水组小鼠的耗氧率2.9%±0.6%(ml/g/min),两者相比有髙度显箸性差界(PvO.Ol)。见表1O表1中枢神经系统功能抑制、低温对小鼠存活时间和耗氧率的影响样本体重(g)存活时间(min)耗氧量(ml)耗氧率(ml/g/min)生理盐水氯内嗪生理盐水氯内嗪生理盐水氯内嗪生理盐水氯丙嗪122.023.020.041.012.013.32.7%1.4%220.020.025.045.010.07.02.0

8、%0.8%