缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响

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1、缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响【摘要】目的：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性。方法：小鼠注射氯丙嗪并置于冰上，制造中枢神经系统功能抑制和低温。置小鼠于密闭瓶中复制乏氧性缺氧动物模型。给小鼠吸入CO、注射亚硝酸钠来复制血液性缺氧的动物模型。测定其呼吸频率和死亡时间，解剖观察其肝血颜色。结果：中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响实验中，对照组小鼠存活时间为19.919±3.744min,而实验组存活时间为45.923

2、±13.357min，长于对照组（p<0.05）。对照组小鼠总耗氧率为4.668±1.136%，实验组则为2.021±0.605%，低于对照组（p<0.05）。在不同原因缺氧机体呼吸变化实验中，乏氧性缺氧小鼠前期呼吸频率缓慢上升，维持一定时间后，逐渐下降至死亡。CO中毒的小鼠呼吸频率迅速增加至死亡。NaNO2小鼠呼吸频率先上升，后期频率逐渐降低直至死亡。亚硝酸钠加美兰处理的小鼠呼吸频率则相对稳定，其存活时间为24.7±9.209min,而单纯亚硝酸钠处理小鼠存活时间为11.822±4.779min，前者明显长于后者（P<0.05）。乏氧性缺氧小鼠皮肤黏膜颜色呈青紫色（紫绀），解剖后肝脏暗红，血

3、液暗红.皮肤，黏膜呈现鲜红色，解剖后肝脏血液呈现樱桃红色。亚硝酸盐处理和亚硝酸盐加美兰组两者皮肤黏膜均呈现蓝黑色，解剖后亚硝酸盐组肝脏血液为深咖啡色，亚硝酸盐加美兰组肝脏血液为浅咖啡色。结论：中枢神经系统机能抑制和低温使小鼠可以延长小鼠存活时间；CO和亚硝酸盐处理的小鼠存活时间明显缩短。美兰对亚硝酸盐中毒有一定缓解治疗作用。不同缺氧原因呈现不同的皮肤和血液颜色。【材料】小白鼠，100、500ml广口瓶和测耗氧装置，50g/L亚硝酸钠溶液，10g/L美兰溶液、2.5g/L氯丙嗪溶液(新鲜配制)、生理盐水，CO气体（甲酸加浓硫酸制取），钠石灰。【方法与观察项目】一、中枢神经系统功能抑制和低温对动物

4、耐受缺氧的影响：方法：1．取性别相同，体重相近的小鼠2只，并准确称取体重。按随机分配的原则，将其中1只鼠作为实验组，另一只作为对照组。实验组鼠按0.1ml/10g体重腹腔内注射2.5g/L氯丙嗪，安放在冰浴的沙布上10~15分钟，使呼吸频率降为70~80次/分；对照组鼠按0.1ml/10g体重腹腔注射生理盐水，放置室温10~15分钟。2．将2只鼠分别放入100ml的广口瓶内，连接测耗氧装置。观察项目：1．从密闭测耗氧装置开始计时至鼠死亡，记录小鼠存活时间，用测耗氧装置测定总耗氧量（A）。根据总耗氧量Ａ（ml），存活时间T（min），鼠体量W（g）三项指标，求出总耗氧率R（ml/g/min）：R

5、(ml/g/min)=A(ml)÷W(g)÷T(min)2．列各项指标的原始数据表并进行统计处理，数据以`x±S表示，对实验组和对照组的T、R作t检验。二、不同原因造成不同的缺氧类型方法：1．密闭瓶（1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10秒)，并注意深度。观察活动一般情况及耳、尾、口唇的颜色。（2）将鼠放入含钠石灰(约5g)的100ml广口瓶内，待安静后塞紧瓶塞，开始记录时间，以每隔５分钟间隔数呼吸频率(次/10秒)一次，并观察行为（如挣扎、痉挛等）和耳、尾、口唇的颜色变化，直至动物死亡，尸体留待打开腹腔观察。2．吸入CO（1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10秒)，并注意深度。观察活动一

6、般情况及耳、尾、口唇的颜色。（2）将鼠放入500ml广口瓶内，塞紧瓶塞，用10ml注射器抽取CO气体10ml，注入刚密闭的广口瓶内，形成2%CO的空间环境，开始记录时间，观察方法与指标同项目１的第（2）项。3．注射亚硝酸盐（1）取体重相近的鼠2只，数呼吸频率和观察皮肤粘膜色泽。向腹腔内各注射50g/L亚硝酸钠0.2ml后，立即向其中一只腹腔内再注射10g/L美兰溶液0.2ml，另一只注射生理盐水0.2ml。（2）观察方法与指标同项目１的第（2）项，并观察两鼠表现及死亡时间有无差异。打开以上4只死亡小鼠的腹腔，取下小块肝组织置滤纸片上一起进行血液或肝脏颜色比较。【结果】1.中枢神经系统功能抑制和

7、低温对缺氧的影响实验中，对照组小鼠存活时间为19.919±3.744min,而实验组存活时间为45.923±13.357min，长于对照组（p<0.05）。对照组小鼠总耗氧率为4.668±1.136%，实验组则为2.021±0.605%，低于对照组（p<0.05）。2.乏氧性缺氧小鼠前期呼吸频率缓慢上升，维持一定时间后，逐渐下降至死亡。3.CO中毒的小鼠呼吸频率迅速增加，后逐渐下降，30min后仍