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时间:2019-08-24
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1、一、多糖的检测方法(1)粗多糖的苯酚■硫酸分光光度测定法(2)葡聚糠的分光光度测定法(3)硫酸软骨素的分光光度测定法二、皂背类化合物的检测方法(1)总皂tr的分光光度测定法(2)绞股蓝皂昔的分光度测定法三、黄酮及昔类化合物的检测方法(1)总黄酮的风光光度测定法(2)原花青素的分光光度测定法(3)原花青素的铁盐催化比色测定法四、酶、激素及内源性物质的检测方法(1)超氧化物歧化酶的氮蓝四昵测定法(2)超氧化物歧化酶的连苯三酚口氧化测定法(3)氯化高铁血红素的分光光度测定法五、其他类化合物的检测方法(1)总蔥醍的分光光度测定法(2)几丁胺糖的脱乙酰度滴定法(3)总三菇的分光光度测定法
2、亠八、第一章概论(第3页)表常见的保健食品的功效成分(标志性成分)、保健功能及主要來源功效成分(标志性成分)保健功能主要来源黄酮类银杏黄酮、山楂黄酮辅助降血脂、提高缺氧耐受力、抗氧化、增强免疫力、保护心血管系统、保护脑神经系统银杏叶、山楂、蜂胶、葛根、沙棘、红花、荷叶、甘草、桑叶、陈皮、花粉、桑其、黄罠、淫羊霍、鱼腥草多糖类灵芝多糖、香菇多糖缓解体力疲劳、增强免疫力、辅助降血糖、辅助降血脂灵芝、香菇、枸杞、银耳、灰树花、人参、西洋参、昆布、木耳、山药、黄罠、茯苓、猪苓、黄精、苦瓜皂昔类红景天昔、人参皂苜缓解体力疲劳、增强免疫力、抗氧化、抗辐射、提高缺氧耐受力、辅助降血糖、保护心
3、血管系统人参、西洋参、红景天、绞股蓝、三七、山药、黄罠、酸枣仁、桔梗、远志、知母、甘草、大豆、茨藜、太子参蔥醍类通便、美容、减肥、增强免疫力芦荟、大黄、决明子、何首乌花青素抗氧化、增强免疫力、抗辐射、保护心血管系统葡萄子、葡萄皮、越橘、黑加仑、玫瑰茄、甘蓝、桑其、紫甘薯、茶叶二•祜类灵芝三菇、角鲨烯抗氧化、增强免疫力、抗辐射、缓解体力疲劳、辅助降血脂、辅助保护化学性肝损伤、改善睡眠、改善记忆灵芝、赤芝、紫芝(抱子粉)、甘草、黄罠、人参、泽泻、积雪草、山楂、女贞子、苦丁茶、五味子、深海鱼油(金枪鱼、沙丁鱼、營鱼、鲜角)壳聚糖(儿丁聚糖)增强免疫力、辅助降血脂、辅助降血糖、辅助保护
4、骨粘膜虫卜、蟹壳的提取物硫酸软骨素辅助降血脂、增强免疫力、保护骨关节、参与制造骨骼动物的软骨(第73页)笫三章保健食品中功效成分的检测方法第一节多糖的检测方法一、粗多糖的苯酚一硫酸分光光度测定法1>方法提要多糖经乙醇沉淀分离后,去除英他可溶性糖及杂质的干扰,再与苯酚一硫酸作用成橙红色化合物,其呈色度与溶液中的糖的浓度成正比,在485nm波长下比色定量。4、测定步骤(1)样品提取:称取混合均匀的固体样品1.0~2.0g,置于100mL容量瓶中,加水80mL左右,与沸水浴中加热1小时(如保健食品添加的已是多糖提取物,则加热15min),冷却至室温后补加水至刻度线(VJ,混匀后过滤,
5、弃去初滤液,收集余下滤液供沉淀粗多糖。在这里必须强调的是不少保健品添加了淀粉、糊精,一定要做相应的处理,否则结果偏高。添加淀粉的样品需加a■淀粉酶及糖化酶(如葡萄糖苛酶)处理。添加糊精的样品需加糖化酶(如葡萄糖昔酶)处理。处理的原则是将这类非活性多糖的碳水化合物全部酶解成单糠或低聚糠,再用乙醇沉淀所需的活性多糖以达到分离的目的。1)添加淀粉或淀粉+糊精的样品:可取50mL样品提取液置于100mL具塞锥形瓶中,冷却至60°C以下,加1mL10%淀粉酶液(Singma公司的液状淀粉酶可直接加0.1-0.2mL)和0.5mL0.2M磷酸盐缓冲液,加塞,至55°C-60°C酶解1小时,
6、再加适量的糖化酶(如葡萄糖甘酶)(约为样液体积的1%)于60°C以下再水解60min后取出(用电业检验是否水解完全,如不完全可延长水解吋间至酶解液加碘液不变蓝色为止),于电炉上小心加热至沸(灭酶),冷却,定容,过滤,取滤液沉淀粗多糖。2)添加糊精的样品:如上法处理(免加淀粉酶)(2)沉淀粗多糖:准确吸取上滤液(或液体样品)5.0mL(V2),置于50mL离心管屮(或2.0mL于伽L具塞离心管中),加入无水乙醇20mL(或8mL),混匀,于4C冰箱静置4小吋以上,以4OOOr/min离心5min,弃去上清液,残渣用80%(V/V)乙醇溶液数毫升洗涤,离心后弃去上清液,反复操作3次
7、。残渣用水溶解并定容至10-25mL(V3)(根据浓度而定)。(3)标准曲线的绘制:准确吸取葡萄糖标准使用液OmL、0.10mL、0.20mL、0.40mLL>0.60mL、O.8OmL、4.OOmL(相当于葡萄糖Omg>0.01mg>0.02mg>0.04mg>0.06mg>0.08mg>0.10mg)置于25mL比色管中,补加水至2.0mL,加入5%苯酚溶液1.0mL,在旋涡混合器上混匀,小心加入浓硫酸10mL,在旋涡混合器上小心混匀,至沸水浴中2min,冷却至室温,用分光光度计在485
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