耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 检测(荧光PCR法)

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1、上海之江生物科技股份有限公司ShanghaiZJBio-TechCo.,Ltd.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测（荧光PCR法）金葡/表葡/腐生致病性强耐甲氧西林金葡葡萄球菌金黄色葡萄球菌MRSA1.MRSA背景资料——WhatIsMRSA?金黄色葡萄球菌致病性1、金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌2、可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至严重到败血症、脓毒症等全身感染。3、其致病的强弱取决于其产生毒素和侵袭性酶溶血毒素杀白细胞素血浆凝固酶肠毒素金葡菌的院内感染手术切口感染各

2、种插管感染下呼吸道感染尿路感染胃肠感染皮肤和软组织感染血液感染病人往往抵抗力低下正常医疗操作可能导致病人的正常免疫屏障受损接受化疗、激素治疗等治疗容易出现免疫力迅速降低不合理大量抗生素治疗容易导致菌群失调医院是病原体相对集中的环境菌群交叉感染等SAVSMRSA—耐药的产生机制一种特殊蛋白的产生低亲和力的青霉素结合蛋白PBP2αmecA基因PBP2α耐药性金葡的耐药性STAPHYLOCOCCICoagulaseNegativeStaphylococciS.aureusMSSAMRSA对于MRSA万古霉素常是治疗的唯一

3、药物，而万古霉素具有很强的副作用，易导致病人出现肝肾问题。同时，万古霉素的使用会诱发耐万古霉素金葡（VRSA）的产生，致使尤其引起的各种感染发展到无药可用的地步。因而在未确定是耐药性金葡感染前需特别注意慎重用药。近年在南欧部分国家和英国MRSA在金葡菌感染中的检出率在大型医院达到了30％-50％。在德国，1996-2006年间MRSA的感染率不断增长达到了20％-22％，德国的一所大型教学医院(kath—arinenhospita1)MRSA感染的病例在1994—2003年间上升了277％国外SA院内携带率普查—北

4、京某三甲医院SA院内现状SA耐药率现状MRSA《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南（试行）》2011年国家卫生部出台文件，为了进一步加强多重耐药菌医院感染预防与控制，制定了MRSA医疗机构应积极开展常见多重耐药菌的监测。对多重耐药菌感染患者或定植高危患者要进行监测，及时采集有关标本送检，开展主动筛查，以及时发现、早期诊断多重耐药菌感染患者和定植患者。生化鉴定（乳胶凝集）VSPCR快速检测金葡菌鉴定：耐药性鉴定：药敏试验（K-B法）VSPCR快速检测金葡传统临床鉴定方法其他方法：细菌鉴定仪培养分离培养药敏纸片1da

5、y2day3day乳胶凝集实验0day取标本取标本PCR快速PCR操作流程DNA的提取快速PCR反应样本的采集2Hour~4Hour！如何用PCR检测SA&MRSA？PCRnucSA（金葡特有的耐热核酸酶基因）（导致SA耐药产生的PBP2α蛋白的编码基因）PCRmecAMRSAPCR检测Nuc—Nuc+非SAMSSAMRSAmecA—mecA+检测判读流程NucFAM荧光标记mecAHEX荧光标记www.themegallery.com本试剂盒的临床应用方向治疗性应用为临床诊断及正确使用抗菌素提供及时有力的依据，减

6、少试验性治疗对病人造成的伤害，同时为挽救生命争取时间临床应用预防性应用可使医院内感染的预防工作得以落实。入院及术前的监测为预防院内传播采取措施（如隔离）提供依据。质量第一服务第一本产品的检测优点1、公认的筛查“金标准”2002年美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）指出金黄色葡萄球菌一旦检出mecA基因即可定为MRSA。PCR法检测mecA基因被公认为MRSA筛查检测“金标准”。2、特异性高现已明确，大量产生的一种新的青霉素结合蛋白-PBP2a是葡萄球菌对甲氧西林耐药的主要原因。mecA基因是PBP2a的编码基因

7、，只存在于葡萄球菌中，因此mecA基因可作为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子标志。荧光PCR方法就是通过直接检测细菌染色体上的mecA基因来确定是否为耐甲氧西林菌株，不受药敏实验条件的影响。3、检测时间短正确快速地检测出MRSA是寻找有效的抗菌药物和控制MRSA院内感染的关键。荧光PCR方法实验检测时间在3个小时以内，当天知道检测结果。而目前其他检测方法需2-3天的细菌培养，使检测时间延长，不利于及时调整使用抗生素治疗方案和院内感染控制。质量第一服务第一临床监测方案1、入院筛查对入院患者进行MRSA筛查，并采取有效的

8、接触预防措施，是控制MRSA扩散的最有效手段。对住院病人（尤其是ICU及烧伤科/感染科/呼吸科/老干部科等）入院时应进行MRSA检测，阳性者考虑在相对隔离。（美国加利福尼亚，伊利诺，新泽西，宾夕法尼亚，华盛顿，肯塔基等16个州政府先后立法，要求所有住院患者强制性检测，以减少院内感染，提高病床周转率，减低医疗资源的支出）。2、指导患者用药治疗过程中应定期监测，