常见蛋白质标签

常见蛋白质标签

ID:40835589

大小:33.13 KB

页数:7页

时间:2019-08-08

常见蛋白质标签_第1页
常见蛋白质标签_第2页
常见蛋白质标签_第3页
常见蛋白质标签_第4页
常见蛋白质标签_第5页
资源描述:

《常见蛋白质标签》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库

1、常见蛋白质标签总结2008-12-0822:06Proteintagsarepeptidesequencesgeneticallygraftedontoarecombinantprotein.Oftenthesetagsareremovablebychemicalagentsorbyenzymaticmeans,suchasproteolysisorinteinsplicing.Tagsareattachedtoproteinsforvariouspurposes.一、氨基酸标签(含小肽标签)Astretchofamino

2、acidsisaddedtotheproteinandenablestherecoveryofthelabelledproteinbyitsuniqueaffinity.Usuallyitseasiesttoaddthetagtoeitherendoftheproteintoensureitsaccessibilityandnottodisturbtheproteinfolding.组氨酸标签(Histag)一般为6个组氨酸,用Ni2+(Cu2+)亲和层析纯化FLAGtag:N-DYKDDDDK-C,recoveredwi

3、thspecificantibodyHAtag:anepitopederivedfromtheInfluenzaproteinhaemagglutinin(HA,禽流感病毒血凝素),e.g.N-YPYDVP-C,recoverywithanHAantibodyMYCtag:anepitopederivedfromthehumanproto-oncoproteinMYC,e.g.N-ILKKATAYIL-C,N-EQKLISEEDL-C,recoverywithanMYCantibodySBPtag:Streptavidin

4、BindingPeptide,链霉亲合素结合肽,38aminoacidtag(MDEKTTGWRGGHVVEGLAGELEQLRARLEHHPQGQREP),更多参考在SigmaCBPtag:钙调蛋白结合肽(CBP;26aa)钙调蛋白结合肽与钙调素结合是Ca2+依赖的,这种结合不受标签所处的位置影响(N端和C端均可),在中性pH条件下使用2mMEGTA可以很方便的将目标蛋白洗脱下来。这一系统有如下优点:1特异性很高,因为大肠杆菌没有可以和钙调素结合的蛋白;2与His标签相比可以在强还原性条件下纯化。纤维素结合肽(CBD):

5、能与纤维素介质特异性的结合,可以在温和的条件下洗脱(乙二醇或低盐条件),pETCBD载体含有纤维素结合肽(CBD)的序列,可方便构建。二、蛋白质标签Ratherthanaddingonlyafewaminoacidsawholeproteinisfusedtotheproteintobepurifiedordetected.Theaffinityoftheattachedproteinenablestherecoveryoftheartificialfusionprotein.Asforthepeptides,thepro

6、teintagisaddedtoeitherendofthetargetprotein.GSTtag:thesmallglutathione-S-transferase(GST;26kDa),recoverybyaffinitytosubstrateglutathioneboundtoacolumn,e.g.glutathionesepharoseMBPtag:麦芽糖结合蛋白(MBP;40kDa)载体:pMALIMPACT:Intein-MediatedPurificationwithanaffinityChitin-bi

7、ndingTag(几丁质结合肽)硫氧还蛋白:Thioredoxinsareproteinsthatactasantioxidantsbyfacilitatingthereductionofotherproteinsbycysteinethiol-disulfideexchange.ProteinA:a40-60kDaMSCRAMMsurfaceproteinoriginallyfoundinthecellwallofthebacteriaStaphylococcusaureus.Ithasfounduseinbiochem

8、icalresearchbecauseofitsabilitytobindimmunoglobulins.Itbindsproteinsfrommanyofmammalianspecies,mostnotablyIgG’s.ItbindswiththeFcregionofimmunoglobulinst

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。