培训教材课件

《培训教材课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、名以清修利以义制绩以勤勉汇通天下李安平新晋商理念无菌检查方法验证韩佩莲培训教材：山西振东泰盛制药有限公司系用于检查要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料、及其他品种是否无菌的一种方法。无菌检查法验证目的以证明所采用的方法适合于该产品的无菌检查，保证检验结果的可靠性。当建立产品的无菌检查法时；若该产品的组分或原检验条件发生改变时。何时验证无菌检查法设备及用具参照《中国药典》2010版附录无菌检查法方法培养基硫乙醇酸盐流体培养基改良马丁培养基无菌检查法检查方法：薄膜过滤法；直接接种法大取样量，不易漏检，仪

2、器操作简单；全封闭过滤系统，避免了外源性细菌的污染。只要供试品性状允许，应尽量采用薄膜过滤法！验证用菌株无菌检查项目薄膜过滤法验证用菌直接接种法验证用菌金黄色葡萄球菌√√大肠埃希菌√√铜绿假单胞菌--√生孢梭菌√√白色念珠菌√√黑曲霉√√无菌检查法验证1、制备各试验菌菌液将规定需用的试验菌分别制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。2、供试液的制备用溶解、乳化、破乳、稀释、离心等方法，或几种方法联用，将样品制成均匀的供试液。无菌检查法验证3、验证试验试验组——供试液+小于100cfu菌薄膜过滤法

3、：最后一次冲洗时加入；或保证滤膜完整情况下，在最终培养体系中加入。直接接种法：直接加入。阳性对照组——等量试验菌无菌检查法验证4、结果判断阳性对照组试验组结论生长良好生长良好该法适用于供试品检验生长良好生长缓慢或者不生长该检验量、检验条件下存在抑菌作用无菌检查法验证5、抑菌作用的消除(或抑制)方法①中和法&②薄膜过滤法薄膜过滤法消除抑菌作用的方法直接接种法√稀释剂中添加中和剂、灭活剂、表面活性剂√√培养基中添加中和剂、灭活剂、表面活性剂√√增加冲洗液用量--√更改冲洗液种类--√更换滤膜材质--无菌

4、检查法验证①中和法选用一定的化学中和剂，加入具抑菌作用的产品中可方便快捷地中和抑菌剂，消除抑菌作用。注意：中和剂消除抑菌作用的同时，会对微生物由轻微伤害根据检品抑菌作用的大小和药典的要求，设计方案，通过试验确认化学剂的浓度、加量及其他有关检验条件。无菌检查法验证干扰物可选用的中和剂或灭活方法戊二醛亚硫酸氢钠醛类甘氨酸、硫代硫酸盐季铵类化合物（QACa）、对羟基苯甲酸酯卵磷脂、聚山梨酯汞类制剂亚硫酸氢钠、巯基乙酸盐、硫代硫酸盐双胍类化合物卵磷脂碘酒、洗必泰类聚山梨酯卤化物硫代硫酸盐乙二胺四乙酸镁或钙离

5、子磺胺类对氨基苯甲酸Β-内酰胺类抗生素Β-内酰胺酶金属盐类巯基化合物（巯乙醇酸钠、L-胱氨酸）脂溶性药物表面活性剂（如吐温-80）无菌检查法验证中和法消除抑菌性方法的验证：试验方法：样品组——供试液+抑菌中和剂+试验菌（<100CFU）对照组——用0.1%蛋白胨溶液代替供试液，其余同无菌检查法验证样品组菌种活性检查组——不加抑菌中和剂，将试验菌直接接种结果：样品组与对照组计数相似——中和剂有效中和对照组与菌种活性检查组计数相似——中和剂毒性不影响微生物生长（或检出）无菌检查法验证5、抑菌作用的消除(

6、或抑制)方法②薄膜过滤法——微生物检验中，尤其无菌检查中常用消除产品抑菌性的方法。原理：抑菌产品通过滤膜时，微生物被截留在滤膜上，具抑菌作用的成分被滤掉，滤后转移至适合培养基中培养，观察结果降低滤膜上残留抑菌剂。无菌检查法验证抑菌作用的方法：使用低吸附性的滤膜；稀释防腐剂或淋洗滤膜；淋洗液中加入适量化学中和剂。无菌检查法验证薄膜过滤法消除抑菌性方法的验证样品组：供试品经过滤后，用稀释中和液淋洗滤膜两次，每次100mL。淋洗两次后，再另外100mL淋洗液中介入对照菌（<100cfu）。将滤膜转移至适当

7、培养基中培养。对照组：以0.1%的蛋白胨溶液取代供试品，其余同样品组。无菌检查法验证菌种活性检查组：接种等量试验菌至固体培养基上结果：样品组与对照组结果相似——验证通过样品组微生物生长不明显——抑菌作用去除不够充分，更改实验条件，重新验证无菌检查法验证流程①中和剂、②灭活剂、③表面活性剂稀释剂培养阴性对照（—）生长良好生长缓慢、不生长供试液的制备试验组+<100CFU培养基的配制菌液制备阳性对照组①增加冲洗液用量②更改冲洗液种类③更换滤膜材质过滤无菌检查法验证流程稀释剂阴性对照培养（—）生长良好供试

8、液的制备试验组+<100CFU培养基的配制菌液制备阳性对照组过滤生长良好依此法检验进行供试品的无菌检查！头孢噻肟钠无菌原料的无菌实验方法验证样品：头孢噻肟钠无菌原料规格：0.5g/瓶；批号：40807001生产单位：AventisPharmaDeutschlandGmbH培养基：硫乙醇酸盐流体培养基、改良马丁培养基、营养肉汤、普通斜面、真菌斜面、营养琼脂、玫瑰红钠琼脂（均由中国药品生物制品检定所培养基室提供)头孢噻肟钠无菌原料的无菌实验方法验证β-内酰胺酶2mL，大于