食品微生物检验技术-广西职业技术学院

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1、第三章培养基和实验基本操作技术一、培养基中的主要成分及其作用（一）、营养物质N源、C源、无机盐、生长因子、水第一节培养基1、常用的N源物质蛋白胨牛肉膏肉浸汁酵母膏（1）蛋白胨有：普通蛋白胨示胨胰蛋白胨（2）、牛肉浸液成份：含氮物：肌酸、嘌吟、核苷酸尿酸肌肽等糖类物质：葡萄酒3肝糖、P-已糖生长因子：硫胺、核黄素、泛酸、叶酸等8种B族维生素（3）、组织浸液组织浸液，主要为微生物生长繁殖提供可溶性含氮物质、核酸降解物、维生素及无机盐等，补充蛋白胨营养成分的不足部分。包括动物组织浸液、植物组织浸液、微生物细胞浸液。2、糖、醇类物质单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘

2、露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖多糖：淀粉、纤维素、菊糖醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油（二）、水用蒸馏水，不能用自来水（三）、凝固剂琼脂、明胶、血清等要求：清一色、杂质少（四）、抑制剂1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素（五）、指示剂1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。2、常

3、用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基(Media)。由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。（一）、根据培养基的物理状态来区分固体培养基液体培养基半固体培养基1、液体培养基主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等3、半固体培养基观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。（二）、根据

4、培养基的用途来区分增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。增菌、运送用培养基B2胆盐乳糖培养基（BL）大肠杆菌增菌B3亚硒酸盐增菌培养基沙门氏菌增菌B4亚硒酸盐半胱氨酸增菌培养基食品中沙门氏菌增菌B5四硫磺酸钠亮绿基础培养基沙门氏菌增菌B6GN肉汤培养基志贺氏菌增菌B7碱性蛋白胨水培养基霍乱弧菌增菌B87.5%氯化钠肉汤培养基金黄色葡萄球菌增菌B9缓冲蛋白胨水培养基沙门氏菌增菌B10血液增菌培养基血液中细菌增菌B11SCDLP

5、液体基础培养基化妆品中细菌增菌2、选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。分离培养用的培养基名称用途SS琼脂培养基沙门氏和志贺氏菌属分离HE琼脂培养基志贺氏菌分离鉴别伊红美蓝琼脂培养基大肠杆菌、产气杆菌分离鉴别麦康凯琼脂培养基（MacC）肠道致病菌分离甘露醇高盐琼脂培养基）绿脓杆菌分离鉴别XLD琼脂培养基志贺氏、沙门氏菌分离中国蓝琼脂培养基肠道菌分离鉴别碱性琼脂培养基霍乱弧菌分离高盐蔡氏琼脂培养基真菌、酵母菌分离3、鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有

6、助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。鉴别用培养基名称用途蛋白胨水培养基靛基质和霍乱红试验乳糖胆盐发酵培养基大肠杆菌发酵乳糖试验0.5%乳糖发酵培养基肠道菌生化试验（复发酵）半固体培养基动力试验和菌种保存三糖铁琼脂培养基（TST）肠杆菌糖发酵及硫化氢反应氰化钾基础培养基沙门氏菌分离脱羧酶试验对照培养基细菌脱羧酶试验（三）培养基制备的基本方法和注意事项培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的初步调正培养基的过滤澄清培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存1、培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包

7、括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等。记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。2、培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上面做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还应进行一次检查。3、培养基各成份的混合和溶化指示剂应在调节好PH值后再加入；煮溶后要补加足水份；不能把培养基煮焦，焦化的不能使用。4、培养基pH的校正灭菌后

8、PH值会下降0.1～0.2，在做培养基校正PH值时，应比实际值高0.1～0.2；