液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍

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1、液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍资料收集：cbjcn1985@163.com生化–多肽-5988-6316EN升温对于反相HPLC分离强疏水肽的影响(B27)Polypeptide流动相:A:含0.05%三氟乙酸的水B:含0.05%三氟乙酸的乙腈2%B/min进样量:100µL(50µg的6M脲/5%乙酸)UV:210nm流速:1mL/min室温液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x250mm5µm室温300C400C500C600C700C提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）环保样品:除草剂流动相:52/480.1M乙酸钠/甲醇,pH6流速:0.4

2、5mL/min温度:40℃,90℃检测:UV除草剂:柱温的影响Herbicides:EffectofColumnTemperature1.西玛津2.敌草隆3.扑灭津4.扑灭净5.异丙甲草胺1.Simazine2.Diuron3.Propazine4.Prometryn5.etolachlor液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm,5μm40℃90℃提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）生物制药液相色谱柱:Zorbax300StableBond-C3色谱柱尺寸:4.6x150mm,5μm肽类/蛋白质:升温对分离的影响Peptides/Prote

3、ins:EffectofElevatedTemperature样品:多肽流动相:A=5:95,乙腈:水,0.10%三氟乙酸(V/V%)B=95:5,乙腈:水,0.085%三氟乙酸(V/V%)梯度:在20min内15-53%,后运行时间12min流速:l.0mL/min温度:室温-60℃检测:UV215nm1.亮氨酸脑啡呔2.血管紧张素II3.核糖核酸酶A4.牛胰岛素5.细胞色素C6.溶菌酶7.肌红蛋白8.碳酸酐酶1.LeucineEnkephalin2.AngiotensinII3.RnaseA4.Insulin(BOV)5.CytochromeC6.Lysozyme7.Myogl

4、obin8.Carbonicanhydrase提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度）生物制药液相色谱柱:ZorbaxStableBond-C8色谱柱尺寸:150mm,5μm减小毛细管内径来提高低浓度样品的检测灵敏度ReducingCapillaryIDtoImproveSensitivityforConcentration-LimitedSamples流动相:60%乙腈/40%水流速:内径0.3mm-4uL/min内径0.5mm-10uL/min内径1.0mm-50uL/min内径4.6mm-1.0uL/min温度:室温检测器:UV254nm样品:200ng联二苯(100nl)减小柱径

5、，可增加柱效（提高灵敏度）色谱柱技术–5988-6454EN使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性(TE32)液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x15mm3.5µm流动相:乙腈:1%甲酸=32:68UV:254nm流速:1.0mL/min.30°C进样量:5µL响应时间:4.0秒响应时间:2.0秒响应时间:1.0秒响应时间:0.5秒响应时间:0.1秒1.尿嘧啶2.乙酰水杨酸3.N-乙酰苯胺1.Uracil2.Acetylsalicylicacid3.Acetanilide缩短检测器响应时间，可增加柱效（提高灵敏度）色谱柱技术：不同硅胶类型比较

6、(TE1)流动相:含0.05%甲醇的二氯甲烷液相色谱柱toluenebenzanilidephenolbenzylalcoholZorbaxSilSpherisorbZorbaxRx-Sil甲苯N-苯甲酰苯胺苯酚苯甲醇使用高纯硅胶，可增加柱效（提高灵敏度）有机化学–5988-6366ENpH对苯胺取代物分析的影响(ORCH1)流动相25mM磷酸:甲醇=58:42流速:1mL/min22°C液相色谱柱:ZORBAXStableBond-C18色谱柱尺寸:4.6x150mm5µm对位甲氧基苯胺间位苯甲胺3-氨基-苯甲腈对位氯苯胺间位氯苯胺邻位氯苯胺pH:2.5pH:7.0改变流动相pH

7、，可增加柱效（提高灵敏度）生化–肽–5988-6293EN三氟乙酸浓度对于反相肽的分离的影响(B10)Peptide流动相:A:水和三氟乙酸B:乙腈和三氟乙酸0-30%B（30min.内）流速:1mL/minUV:254nm进样量:6uL十肽菌素标样S1-S5（疏水性有略微差异）40°C液相色谱柱:ZORBAX300SB-C8色谱柱尺寸:4.6x150mm5µm1.0%三氟乙酸0.05%三氟乙酸0.25%三氟乙酸改变流动相pH，可增加柱效（提高灵敏度）食品分析–598