牛呼吸道疾病综合征的主要病原

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1、万方数据专论与综述牛呼吸道疾病综合征的主要病原刘志鹏1'2，董秀梅1，师东方★1，王宇3(1．东北农业大学动物医学学院，哈尔滨150030；2．哈尔滨维科生物技术开发公司，哈尔滨150001；3．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨150001)DOl：10．3969／J．ISSN．1671—6027．2012．12．005近年来，国内外奶牛呼吸系统疾病频发，国外学者将由多种病毒或细菌引起的牛肺炎、运输热、支气管炎等统称为牛呼吸道疾病综合征(Bovinerespiratorydiseasecomplex，BRDC)。该病在世界

2、范围内普遍存在，据统计，养牛业中65％的疾病与牛呼吸道疾病相关，感染率达100％，死亡率可达35％或更高。尤其是当病毒性和细菌I生病原体相互作用时常会使牛呼吸系统疾病病情加重，导致严重的肺炎。引起BRDC的病毒包括牛传染性鼻气管炎病毒，牛呼吸道合胞体病毒，牛副流感病毒3型等；细菌包括溶血性曼氏杆菌、睡眠嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、化脓性隐秘杆菌等。1引起BRDC的主要病毒1．1牛传染性鼻气管炎病毒IBR是由牛疱疹病毒1型(BHV一1)引起的，该病最早于1955年发现于美国科罗拉多州的育肥肉牛，1956年Madin等首次从患牛分离出

3、病毒，1964年Huck鉴定BHV一1属于疱疹病毒Q一疱疹病毒亚科。自1972年起该病毒在整个西欧国家引起了严重的牛呼吸道疾病，我国于上世纪80年代初在进口种牛中发现本病，并分离和鉴定了该病毒。IBR感染发病率高，死亡率低，但在继发细菌性支气管肺炎或者同时有BVDV或BRSV感染时，死亡率明显增高。IBR最大特点是组织嗜性广，除经常侵害呼吸系统外，还能侵害生殖系统、神经系统、眼结膜和胎儿。牛在感染初期通过直接接触传播该病毒，康复牛或某些免疫牛也会由于自然和人为的应激因素重新排毒，而无临床症状。该病的潜伏感染特性是本病难以根除的主

4、要因素。目前我国的大部分省市地区的各种牛群中均有此病毒感染，其中对我国北方六省市包括山东省、河北省、内蒙、北京市、河南省、新疆等地牛血清检测阳性率在28％～86％；四川省牛血清检测阳性率也处于10％。60％；内蒙古地区牛传染性鼻气管炎血清学阳性率最高达89．55％，同时由于没有适当的★通讯作者··目雹鎏蟊圜··免疫防护措施，本病呈上升趋势，对牛群肥育率、产奶量和繁殖影响极大，给养牛业造成了严重危害。传统的血清学诊断方法可用于该病的检测，而快速诊断有赖于分子生物学技术。1993年建立了检测BHV一1的聚合酶链式反应(PCR)，19

5、98年建立了高度敏感的巢式PCR检测BHV一1，能够检测10—3TCID√50斗L的细胞上清液。另外，核酸探针检测的阳性结果也可以直接作为BHV一1阳性牛的判断标准，从而为流行病学和临床诊断提供了依据。吴时友等从纯化的BHV—l中提取全基因组DNA，用32P标记作为探针进行点杂交。试验结果表明，该探针可检出10pg的BHV一1DNA，能明显区分BHV一1感染细胞和未感染的正常细胞，具有相当高的灵敏度和特异性。随后用生物素代替32P制备探针，也取得相同结果，同时能检测牛精液中BHV一1DNA同位素标记的探针在一20％可保存1年以上

6、，并弥补了放射性同位素探针半衰期短及对人体健康有害的不足，更有利于推广。1．2牛呼吸道合胞体病毒BRSV是引起犊牛呼吸道疾病的主要病原之一。本病早在1968年就有记载，1970年BRSV首次从患有呼吸道疾病的牛体中分离到。1974年美国从牛中分离到牛呼吸道合胞体病毒。自此以后，BRSV作为一个重要的和常见的牛呼吸道疾病的病原在许多国家被分离获得。该病危害性在于感染发病率很高，达到60％～80％，死亡率在一些暴发中也能达到20％以上。美国明尼苏达州的研究人员曾报告过奶牛的BRSV血清抗体检出率达67．4％，表明本病毒的存在是普遍的

7、。传统的检测方法从肺、鼻拭子以及支气管肺泡灌洗液中检测抗原或将采取的鼻分泌物或肺脏接种于牛鼻甲细胞分离病毒，可见合胞体及胞浆包涵体，但由于病毒的滴度很低并且不稳定，使其灵敏度非常低。现在对BRSV的诊断主要是依赖血清抗体检测。Hazari等利用间接一ELISA和夹心一ELISA检测奶牛中抗呼吸道合胞体病毒的抗体，血清阳性率分别。

8、应用巢式RT—PCR检测了巴西牛呼吸道合胞体病毒，主要针对G基因和F基因，灵敏度很高，说明巢式RT—PCR在诊断和流行病学调查中具有较好的应用前景。这些方法虽然比传统的检测方法敏感，但是不能快速、定量地检测。2005年Boxus等利用实时RT—PCR定量检测BR