不同种群植物叶绿素a和叶绿素b含量的测定

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1、实验三不同种群植物叶绿素a、b含量的测定（分光光度法）一、实验目的:炮仗花,榕树(阴生植物)变叶木,鸳鸯茉莉（阳生植物）1.学习并掌握用分光光度法测定未分离的叶绿体色素溶液中叶绿素a和b含量的方法；2.对比不同种群植物叶绿素a，b含量及其比值的差异，了解叶绿素含量与阴生和阳生植物的形态结构的特点的关系3.通过本实验的设计与实施，增加我们对不同种群的了解，有利于我们对植物的种植与保护，也能使我们掌握基本的实验操作技术，培养探究性学习的能力，通过小组合作学习加强团队精神二、实验原理：根据叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别位于663nm和645n

2、m处。又根据Lambert－Beer定律：Ca=12.7OD663-2.69OD645Cb=22.9OD645-4.68OD663CT=Ca+Cb=8.02OD613+20.21OD645测定得到光密度（OD值）。即可算出叶绿素a、b的含量及总叶绿素的含量（mg/l）。三、仪器药品材料：仪器：分光光度计、台天平、剪刀、研钵、漏斗、移液管、量筒、10ml容量瓶。试剂：80%丙酮、碳酸钙、石英砂、水、丙酮。材料：炮仗花,榕树(阴生植物)变叶木,鸳鸯茉莉（阳生植物）的叶片四、实验步骤：1、实验材料的培养和处理：试验前采集不同环境条件下的植物叶片。的提

3、取：取新鲜叶片，剪去粗大的叶脉并剪成碎片，称取0.5g放入研钵中加纯丙酮5ml。少许碳酸钙和石英砂，研磨成浆，再加80%丙酮5ml，将匀浆转入离心管，并用适量80%丙酮洗涤研钵，一并转入离心管，离心后弃沉淀，上清夜用80%丙酮定容至20ml。3、测定光密度：取上述色素提取液1ml，加80%丙酮4ml稀释后转入比色杯中，以80%丙酮作对照，分别测定663nm，645nm处的光密度值。4、按公式（3）（4）（5）分别计算色素提取液中叶绿素a、叶绿素b、叶绿素a和叶绿素b的浓度。再根据稀释倍数分别计算每克鲜重叶片中色素的含量。五、结果计算：记录数据，

4、并计算波长种群663nm处的光密度值645nm处的光密度值炮仗花榕树变叶木鸳鸯茉莉纯丙酮波长种群叶绿素a的浓度（mg／L）叶绿素b的浓度（mg／L）叶绿素a和b的浓度（mg／L）每克鲜重叶片中色素的含量(mg)炮仗花榕树变叶木鸳鸯茉莉六、注意事项：由于植物叶子中；含有水分，故先用纯丙酮进行提取，以使色素提取液中丙酮的最终浓度近似80％。七、实验结果与分析：