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时间:2019-08-04
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1、天大天发BET-48G系列细菌内毒素分析仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成细菌内毒素测定仪主机、计算机、打印机、EasyBET软件。1.2.试验环境要求安装在没有明显空气流动的洁净的工作间,无菌、无尘、低温。1.3开机打开细菌内毒素测定仪主机的电源开关,打开计算机,启动EasyBET软件。2操作方法2.1软件启动,双击软件图标打开软件,软件首先搜索内毒素测定仪,找到后显示该仪器的型号。如果仪器未联机则不能进行检测操作。2.1.1用户登录登录过的用户选好检验员,输入密码,点击确定即可进入;没登录过的用户输入检验员名称,设置好密码点击【添加新检验员】即可进入。
2、图12.1.2进入主画面待仪器右上角温度显示为37±0.3℃时,即可进行试验设置和检测。图22.2标准曲线的可靠性试验2.2.1标准品系列浓度溶液准备在进行标准系列的制备时,2至10倍的稀释方法都可以使用,将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水按等比例稀释(如2倍稀释,5倍稀释等,制备成一个至少包含三个标准浓度的标准系列溶液,例如,0.5、0.25、0.125、0.06、0.03Eu/ml系列或5、1、0.2、0.04Eu/ml系列),每个标准浓度在检测时最少要做三个平行管,稀释步骤参照凝胶法标准品稀释步骤。2.2.2检测软件设置用鼠标点击【新试验】出现【试验设置
3、向导】画面,首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号,选中【做新标准曲线】,填写初始浓度、稀释梯度、浓度点数、平行管数,然后用鼠标点击【自动设置标准曲线】,在表格中出现所设置的数据。鼠标点击【阴阳性对照】画面,选中【阴性对照】,填写平行管数,图3图4鼠标点击【试管位置选择】,点击【自动选择】后点击【开始检测】,程序设置完毕,该文件存在【检品管理中心】的标准曲线内,该标准曲线以【鲎试剂批号】+【内毒素批号】+【当前时间】作为文件名存盘,也可在画面底列【保存文件名】处改动,自行输入名称,但要事先建好该文件夹。出现如下画面:图5该文件存在【检品管理中心】的标准曲线内
4、。该标准曲线以【鲎试剂批号】+【内毒素批号】+【当前时间】作为文件名存盘,也可在画面底列【保存文件名】处改动,自行输入名称,但要事先建好该文件夹。2.2.3试验检测2.2.3.1溶解分状装鲎试剂根据用量溶解鲎试剂,如使用多支鲎试剂,将溶解的鲎试剂混合在一起,分装到无热原的仪器专用检测管内,每支检测管内0.1ml(要求没有气泡)。2.2.3.2加样取稀释好的内毒素系列浓度溶液,根据所设定管数分别加入有鲎试剂的小试管中0.1ml,注意加样前应混合溶液30秒,且每个浓度点加样前应更换加样头。另取细菌内毒素检查用水做阴性对照。2.2.3.3检测每个浓度点在加完样后应立即用
5、封口膜封口,放入细菌内毒素测定仪设定位置,仪器自动开始检测。待标准曲线最后一个浓度的OD值超过预设值后,用鼠标点击【手动停止检测】,停止数据采集。点击标准曲线坐标画面,生成并储存标准曲线,计算出相关系数。2.2.3.4试验报告打印点击【报告打印预览】,在报告打印预览画面点击【打印】即可。图62.3供试品干扰预试验2.3.1供试品溶液制备:将供试品溶液用细菌内毒素检查用水稀释成所选择的系列浓度,同时制备系列浓度的供试品阳性管和阳性管,供试品阳性管外加内毒素标准品浓度和阳性管标准品浓度相同,标准品浓度为所选用标准曲线的中间浓度。2.3.2检测软件设置用鼠标点击【新实验
6、】出现试验向导画面,首先填写鲎试剂批号、内毒素批号、检查用水批号,点击【供试品设置】,选择供试品名称,所做供试品管的稀释倍数;填写供试品批号、稀释倍数(所选择的系列浓度最小稀释倍数)、平行管数。选中【回收率管】,填写外加内毒素浓度、供试品稀释组数、稀释梯度,点击自动设置,在表格中出现所设置数据,例如【稀释倍数】为10;【供试品稀释梯度】为2;【供试品稀释组数】为4。那表格显示供试品10,20,40,80四个稀释倍数下回收率管及供试品管的试验设置。如测定单一浓度的试验,【供试品稀释组数】填写【1】。图7鼠标点击【阴阳性对照】画面,选中【阴性对照】,填写平行管数,选中
7、【阳性对照】,填写平行管数。鼠标点击【试管位置选择】,点击【自动选择】后点击【开始检测】,程序设置完毕。文件存在所选的【供试品名称】目录下,以【供试品批号+当前时间】为该试验文件名。标准曲线试验可以和供试品试验一同进行,在软件设置时,进入新试验画面后,首先按照标准曲线试验设置(2.2.2),再进入供试品设置(2.3.2)。2.3.3试验检测根据用量溶解鲎试剂,如使用多只鲎试剂将溶解的鲎试剂混合在一起,分装到无热原的仪器专用检测管内,每只检测管内0.1ml(要求没有气泡)。取稀释好的供试品系列浓度溶液、供试品阳性系列溶液、阳性标准品溶液,根据所设定平行管数分别加入有
8、鲎试剂的小
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