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时间:2019-08-03
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1、旋光活性物质旋光度的测定旋光活性物质旋光度的测定实验目的:了解旋光仪测定旋光活性物质旋光度的基本原理。学会圆盘旋光仪和WZZ-2S自动数显旋光仪的正确使用方法,掌握由物质比旋光度来计算质量分数的方法。实验内容:旋光仪的使用,旋光活性物质溶液质量分数的测定。物质的旋光性一、平面偏振光和物质的旋光性1.平面偏振光光波是一种电磁波,它的振动方向与前进方向垂直。在光前进的方向上放一个(Nicol)棱晶或人造偏振片,只允许与棱晶晶轴互相平行的平面上振动的光线透过棱晶,而在其它平面上振动的光线则被挡住。这种只在一个平面上振动的光称为平面偏振光,简称偏振光或偏光。2.物质的旋光性能使平
2、面偏振光振动平面旋转的性质称为旋光性。能使偏振光振动平面向右旋转的物质称右旋体,能使偏振光振动平面向左旋转的物质称左旋体,使偏振光振动平面旋转的角度称为旋光度,用α表示。二、旋光仪与比旋光度1.旋光仪若下图的盛液管中为旋光性物质,当偏振光透过该物质时会使偏振光向左或右旋转一定的角度,如要使旋转一定的角度后的偏振光能透过检偏镜光栅,则必须将检偏镜旋转一定的角度,目镜处视野才明亮,测其旋转的角度即为该物质的旋光度α。如图所示旋光仪工作原理示意图2.比旋光度旋光性物质的旋光度的大小决定于该物质的分子结构,并与测定时溶液的浓度、盛液的长度、测定温度、所用光源波长等因素有关。上式中
3、:α——被测溶液的旋光度;C——被测物质B的质量浓度,单位为g·mL-1,当测定物是纯液体时,C为该物质的密度;L——测定管的长度,单位为dm;D——钠光波长;λ=589.3nmt——测定时的温度(℃)。当物质溶液的浓度为1g/ml,盛液管的长度为1dm时,所测物质的旋光度即为比旋光度。WZZ-2S自动数字显示旋光仪结构原理图WZZ-2S自动数字显示旋光仪工作原理仪器以钠光灯为光源,发出的光线通过聚光镜、小孔光柱和物镜后形成一束平行光,经过起偏镜后产生平行偏振光,这束偏振光经过有法拉弟效应的磁旋线圈时,其振动面产生50Hz的一定角度的往复振动,该偏振光线通过检偏镜透射
4、到光电倍增管上,产生交变的光电讯号。WZZ-2S自动数字显示旋光仪工作原理当检偏镜的透光面与偏振光的振动面正交时,即为仪器的光学零点,此时出现平衡指示。而当偏振光通过一定旋光度的测试样品时,偏振光的振动面转过一个角度a,此时光电讯号就能驱动工作频率为50Hz的伺服电机,并通过蜗轮杆带动检偏镜转动Ө角而使仪器回到光学零点,此时读数盘上的示值即为所测物质的旋光度。葡萄糖注射液含量的旋光法测定葡萄糖分子结构中五个碳(C*)都是不对称碳原子,具有旋光性。钠光谱和25℃时葡萄糖的比旋度为[α]25D=+52.75°葡萄糖的α、β两种互变异构的比旋度相差很大,在溶液中存在变选现象,浓
5、度较大的样品测定时应放置7小时以达平衡,加酸或弱碱可加速平衡。[α]25D=+113.4°[α]25D=+52.75°[α]25D=+19.7°圆盘旋光仪的光学系统
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