R食品中金黄色葡萄球菌污染状况研究

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1、第8卷第3期中国食品学报Vol.8No.32008年6月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJun.2008食品中金黄色葡萄球菌污染状况研究索玉娟于宏伟凌巍贾英民(河北农业大学食品科技学院保定071001)摘要对采集的生牛乳、生鲜肉(猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉)、肉制品、水产品、速冻食品、果蔬、豆制品等510份样品进行金黄色葡萄球菌的分离与鉴定,为金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的监测以及追踪污染源提供依据。共检出被金黄色葡萄球菌污染的食品108份,总检出率为21.2%,且各类样品的受污染程度存在明显差异。关键词食源性疾病金黄色

2、葡萄球菌污染文章编号1009-7848(2008)03-0088-06[4]世界卫生组织(WHO)曾公告,食源性疾病和的食品存在金葡菌的污染。据美国CDC报告,金食品污染已成为世界性公共卫生问题。每年发生黄色葡萄球菌引起的食物中毒仅次于大肠埃希的食源性疾病近数十亿例,发达国家每年至少有菌,居第2位,占细菌性食物中毒的33%。加拿大[5]三分之一的人群患食源性疾病,其中约有170万金葡萄的发生率更高,占细菌性食物中毒的45%,15岁以下儿童因食源性微生物污染引起腹泻而其引起的食物中毒也已成为世界性的公共卫生问[1][6]死亡。题。近年来,我国每年由金葡菌引起的食物中毒[7]金黄色葡萄球菌

3、(Staphylococcusaureus,简称事件已居第4位。金葡菌)是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之鉴于此,采集7种食品样品,分离、鉴定其中一。无论在发达国家还是在发展中国家,由金葡菌污染的金黄色葡萄球菌,探讨该菌在食品中的污引起的食物中毒在细菌性食物中毒中占有较大比染状况,为预防由其引起的食源性疾病的暴发、流例。该菌在自然界中分布广泛,在人体中主要存在行及追踪污染源提供依据。于皮肤、粘膜,特别是鼻咽部,30%~80%的人群为[2]该病原菌的携带者,因此金葡菌污染食品的几1材料和方法率较大。在美国,大约每年超过185000人发生金1.1样品来源黄色葡萄球菌食物中毒,其中约1750

4、人住院,每2006年7月到2007年7月共采集样品510年损失约15亿美元;在欧盟,1993~1998年报告份。除生鲜牛乳60份样品采自保定市市郊奶户的金黄色葡萄球菌食物中毒共926起,占食源性外,其余450种样品均采自保定各超市及农贸市[3]疾病的4.5%。日本的调查结果表明,平均32.5%场。样品分类见表1。表1样品类别及份数Table1Thecategoryandthenumberofthesamples类别生牛乳生鲜肉肉制品水产品速冻食品果蔬豆制品总计数量/份6020050505050505101.2主要仪器与设备高速冷冻离心机5417R,上海安亭科学仪器收稿日期:2007-0

5、8-20厂;电子恒温水浴锅HH.SY11-Ni,北京市光明医作者简介:索玉娟,女,1981年出生,硕士生通讯作者:贾英民疗仪器厂;TGradientThermocycler96型PCR仪,第8卷第3期食品中金黄色葡萄球菌污染状况研究89德国Biometra公司;DYCp-32型电泳槽,北京市六一仪器厂;FA1004电子天平,上海天平仪器厂;DYY-8B型稳压稳流电泳仪,北京市六一仪器厂;279bpBTS-20M型凝胶成像系统,德国UVITEC公司。1.3培养基1234567891011胰酪胨大豆肉汤、7.5%氯化钠肉汤、血琼脂平注:1.阴性对照(H2O)2.DL2000DNAmarke

6、r3.阳性对照板、Baird-Parker琼脂平板、肉浸液肉汤、灭菌盐4~11.分离出的金黄色葡萄球菌。水、兔血浆均为本试验室自制。图1金黄色葡萄球菌的PCR鉴定结果1.4标准菌株Fig.1Theidentigictingresultsofstaphylococcusaureus金黄色葡萄球菌ATCC13565、ATCC25923均byPCR购自中国普通微生物菌种保藏中心。国标规定,金葡菌在血平板上生长菌落呈金1.5分离鉴定方法黄色,有时为白色,菌落周围有溶血圈。但试验中1.5.1金葡菌的分离鉴定按照GB4789.10-发现大多数菌落在血平板上呈白色,仅个别呈金2003进行。黄色,同时

7、溶血圈的大小也有差异,且此差异仅出1.5.2PCR方法验证由于一些非金葡菌菌株可现在不同种类样品所分离的菌株中,这与不同菌株能产生大量的活性很高的蛋白酶(假凝固酶),导的溶血能力有关,但血平板的质量也是一个重要的[8]致假阳性,所以采用PCR扩增耐热核酸酶(nuc)因素。将同一批菌株接种于不同批次的血平板上,基因的方法对所获菌株进行验证。nuc基因为金不同批次的血平板上出现的溶血圈有的差异明[9]黄色葡萄球菌DNA片断高度保守序列,该基因显,而

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