微生物的遗传变异和育种(I)

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1、第七章微生物的遗传变异和育种遗传:亲代与子代相似变异:亲代与子代、子代间不同个体不完全相同遗传(inheritance)和变异(variation)是生命的最本质特性之一遗传型:表型:生物的全部遗传因子所携带的遗传信息具有一定遗传型的个体,在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的外表特征和内在特征的总和。表型是由遗传型所决定,但也和环境有关。表型饰变:表型的差异只与环境有关特点:暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为遗传型变异(基因变异、基因突变):遗传物质改变,导致表型改变特点:遗传性、群体中极少数个体的行为(自发突变频率通常为10-6-10-9)Productionofared

2、pigment(色素)(prodigiosin)bySerratiamarcescens.Fromlefttoright:slant(斜面)culturegrownat25°C,slantculturegrownat37°C,brothculturegrownat25°C,brothculturegrownat37°C.(肉汤培养基)微生物是遗传学研究中的明星:微生物细胞结构简单,营养体一般为单倍体,方便建立纯系。很多常见微生物都易于人工培养,快速、大量生长繁殖。物种和代谢类型多样对环境因素的作用敏感,易于获得各类突变株,操作性强。第一节遗传变异的物质基础一、三个证明DNA是遗传物质

3、的经典实验1、经典转化实验肺炎链球菌:S型(菌体具荚膜,菌落表面光滑,有致病能力)R型(菌体无荚膜,菌落表面粗糙,无致病能力)1928年,F.Griffth作了3组实验:1944年,Avery精确重复了转化实验,确定了转化因子实验证明,将R菌转化为S菌的转化因子是DNA2、噬菌体感染实验实验证明,进入细菌细胞内部的物质是DNA。DNA包含有产生完整噬菌体的全部信息。3、植物病毒重建实验实验证明,遗传信息的流向与DNA的传递是一致的。二、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式(一)遗传物质在7个水平上的形式1、细胞水平2、细胞核水平3、染色体水平4、核酸水平5、基因水平6、密码子水平7

4、、核苷酸水平(二)微生物基因组结构的特点1、原核生物(细菌、古生菌)的基因组1)染色体为双链环状的DNA分子(单倍体);2)基因组上遗传信息具有连续性;基因数基本接近由它的基因组大小所估计的基因数一般不含内含子,遗传信息是连续的而不是中断的。3)功能相关的结构基因组成操纵子结构;4)结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝;5)基因组的重复序列少而短;个别细菌(鼠伤寒沙门氏菌和犬螺杆菌)和古生菌的rRNA和tRNA中也发现有内含子或间插序列2、真核微生物(啤酒酵母)的基因组1)典型的真核染色体结构;啤酒酵母基因组大小为13.5×106bp,分布在16条染色体中。2)没有明显的操纵子结构

5、;3)有间隔区(即非编码区)和内含子序列;4)重复序列多;3、原核生物和真核生物的基因组比较(三)原核生物的质粒1、定义质粒(plasmid):一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的;在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能,从而使宿主得到生长优势。2、结构特点通常以共价闭合环状(covalentlyclosedcircle,简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中;也发现有线型双链DNA质粒和RNA质粒;质粒分子的大小范围从1kb左右到1000kb;细菌质粒多在10kb以内)3、质粒的

6、类型严谨型质粒(stringentplasmid):复制行为与核染色体的复制同步,低拷贝数松弛型质粒(relaxedplasmid):复制行为与核染色体的复制不同步,高拷贝数窄宿主范围质粒(narrowhostrangeplasmid)(只能在一种特定的宿主细胞中复制)广宿主范围质粒(broadhostrangeplasmid)(可以在许多种细菌中复制)4、质粒在基因工程中的应用质粒的优点:(1)体积小,易分离和操作(2)环状,稳定(3)独立复制(4)拷贝数多(5)存在标记位点,易筛选E.coli的pBR322质粒是一个常用的克隆载体5、质粒的检测提取所有胞内DNA后电镜观察;超速离

7、心或琼脂糖凝胶电泳后观察;对于实验室常用菌,可用质粒所带的某些特点,如抗药性初步判断。6、质粒的主要种类质粒所编码的功能和赋予宿主的表型效应致育因子(Fertilityfactor,F因子)抗性因子(Resistancefactor,R因子)产细菌素的质粒(Bacteriocinproductionplasmid)毒性质粒(virulenceplasmid)代谢质粒(Metabolicplasmid)隐秘质粒(crypticplasmid)第二节基因突变和

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