微生物的消毒与灭菌

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1、第六章微生物的分布、消毒与灭菌1了解微生物在自然界及人体内的分布.掌握灭菌、消毒、防腐、无菌、大肠菌群、正常菌群的概念掌握高压蒸汽灭菌法的原理、操作、用途、注意事项；熟悉其他物理灭菌法（UV、干热法、过滤法等）掌握化学消毒剂的作用机制，了解常用消毒剂的种类和用途本章要求2第一节微生物的分布一、在自然界的分布（一）水中的微生物细菌、真菌、病毒等判断水的污染程度的方法以测定水中细菌总数和大肠菌群数为指标大肠菌群：一群在37℃、24h能发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性厌氧的G-我国饮用水卫生标准:1ml水中细菌总数不超过100

2、个，1L水中大肠菌群数少于3个水有自净作用。判断自净效果用细菌为指标3（二）土壤中的微生物条件：营养，pH，T，水分布：地面下10～30cm，细菌多于放线菌、真菌（三）空气中的微生物条件：缺乏营养、水，有辐射分布：近地面空气污染严重，随高度上升数量下降。微生物的量随季节变化（夏季多些）；室内微生物的量与空气的流通有关4二、微生物在人体的分布皮肤以及与外界相通的腔道中均有不同种类的微生物1、正常菌群：正常存在于人体外表和同外界相通的肠道、呼吸道等腔道中，人体免疫功能正常时，对宿主无害，有些还有利的微生物5人体常见的正常菌群

3、部位主要菌类皮肽葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌、丙酸杆菌、白色念珠菌口腔表皮葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、类杆菌、梭杆菌鼻咽腔葡萄球菌、甲型和丙型链球菌、肺炎球菌、奈瑟菌、乳杆菌眼结膜葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、非致病性分枝杆菌外耳道白色葡萄球菌、干燥杆菌胃一般无菌肠道大肠杆菌、产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、粪链球菌、类杆菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌、双歧杆菌、乳杆菌、白色念珠菌尿道白色葡萄球菌、类白喉杆菌、非致病性分枝杆菌阴道乳杆菌、大肠杆菌、类白喉杆菌、白色念珠菌6正常菌群的生理作用1、

4、生物拮抗作用：对外原致病菌的侵入有拮抗和防御作用，保护宿主2、刺激免疫应答：具有免疫原性，有促分裂和佐剂的作用，是机体抗感染免疫的重要组成部分3、合成维生素：如生物素、叶酸、B12、K4、促进代谢：参与糖、蛋白质、脂肪的代谢，促进消化吸收72、菌群失调症：由于正常菌群中各菌比例失调而产生的临床症状引起菌群失调的原因：⑴机体免疫力下降：慢性病人⑵位置改变：E.coli从肠道到腹腔或泌尿生殖道⑶长期使用抗菌药物：广谱抗生素8第二节消毒与灭菌对有害微生物的控制方法：消毒和灭菌基本概念：Disinfection杀死物体表面上的病

5、原微生物，达到控制微生物传染的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物灭菌：Sterilization杀灭物体上所有微生物的方法。无菌：Asepsis不存在活菌的意思。防腐：Antisepsis防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。消毒：9热力灭菌法一、物理消毒灭菌法利用高温使微生物的蛋白质及核酸变性、破坏，杀灭細菌焚烧----最彻底的灭菌方法eg：衣物、动植物尸体灼烧----直接用火焰灭菌方法eg：接种环、针干烤----加热160-180℃2小时eg：玻璃器皿、金属制品、药品干热灭菌法消毒与灭菌的方法：物理、化学、生

6、物法热力、辐射、过滤等10干烤法注意事项：1、洗净后再干烤，防止污物碳化2、玻璃器皿洗净、干燥后再灭菌，T<40℃时开烤箱，防止炸裂3、物品包装不宜太大，所放物品不宜太多（<2/3），以利于空气对流4、中途不能打开添加物品5、t计算从T达到时开始11湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法121℃20-30min煮沸消毒法水煮100℃5min(繁殖体)～2h(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽100℃15～30min(繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度（61～63℃30minor72℃15～3

7、0s）杀灭致病菌适用对象：耐高温的物品原理：饱和蒸气压与T成正比注意事项：加水适量；物品摆放疏松；排尽冷空气；计时时间；压力降至0后，方可开盖用于清洗玻璃器皿食品、食具、不耐高温的物品不耐热的含糖、血清、牛奶等的培养基12湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好原因1、有水的环境中细菌菌体蛋白较易变性2、湿热的蒸汽穿透力比干热强3、湿热的蒸汽有潜热13辐射杀菌法紫外线（UV）杀菌机理：波长200～300m的紫外线具有杀菌作用干扰DNA的复制与转录（形成TT二聚体）紫外线穿透力较弱不耐热物品的表面消毒特

8、点：应用范围：空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室原理：利用电磁波杀死微生物包括：微波、UV、X射线、γ射线14影响因素：光源的强度；与被照物的距离；照射t，湿度等一般无菌室内用30W，30min，可杀死空气中的微生物注意：UV的光复活作用T=TT+T可见光光复活酶15过滤除菌原理：用致密的过滤材料滤去液体或气体中的