GBT19528-2004 奥尼罗非鱼亲本保存技术规范.pdf

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1、65.150IBCS5中华人民共和国国家标准GB/T19528-2004奥尼罗非鱼亲本保存技术规范Techniquestandardinholdingtheparentsofhybridbetweenniletilapia早andbluetilapia含2004-05-31发布2004-10-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布中国国家标准化管理委员会GB/T19528-2004oli青本标准的附录A、附录B和附录C为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员

2、会淡水养殖分技术委员会归口本标准起草单位:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心。本标准主要起草人:吴婷婷、杨弘、李建林。GB/T19528-2004奥尼罗非鱼亲本保存技术规范1范围本标准规定了奥尼罗非鱼亲本—奥利亚罗非鱼(Oreochromisaurea)和尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)的来源、纯种鉴别、隔离饲养、提纯复壮和建档管理技术。本标准适用于奥尼罗非鱼亲本的保存。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括

3、勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY/T5054无公害食品尼罗罗非鱼养殖技术规范SC1027尼罗罗非鱼SC1042奥利亚罗非鱼SC/T1045奥利亚罗非鱼亲鱼SC/T1046奥尼罗非鱼制种技术要求3亲本来源3.1奥利亚罗非鱼来源按SC/T1045的规定执行。3.2尼罗罗非鱼来源按NY/T5054的规定执行。4亲本纯种鉴别4.1形态学鉴别奥利亚罗非鱼的外部形态特征应符合SC1042的规定，

4、尼罗罗非鱼的外部形态特征应符合SC1027的规定。42细胞遗传学鉴别奥利亚罗非鱼的染色体数与核型应符合SC1042的规定;尼罗罗非鱼的染色体数与核型应符合SC1027的规定。4.3生化遗传学鉴别在血清醋酶的等电聚焦电泳图谱上，奥利亚罗非鱼具有一条等电点为pH4.69的特异性酶带，尼罗罗非鱼具有一条等电点为pH4.63的特异性酶带。血清醋酶等电聚焦技术见附录A,4.4分子遗传学鉴别4.4.1酶切线粒体DNA标记技术用限制性内切酶PvuI酶切在尼罗罗非鱼mtDNA上有3个或4个Pvun位点，奥利亚罗非鱼mtDN

5、A上有5个Pvun位点。酶切线粒体DNA标记技术见附录B,4.4.2随机扩增多态性DNA技术(简称RAPD技术)应用RAPD技术筛选出四种引物可检测奥利亚罗非鱼或尼罗罗非鱼。引物OPZ06，奥利亚罗非鱼有一条900bp的片段，在尼罗罗非鱼中没有。引物OPZ10，尼罗罗非鱼有一条1500bp的片段，在奥利亚罗非鱼中没有。引物OPZ12，尼罗罗非鱼有一条1700bp的片段，在奥利亚罗非鱼中没有。tGB/T19528-2004引物OPZ19，尼罗罗非鱼有一条7306p的片段，在奥利亚罗非鱼中没有。RAPD标记技术

6、见附录C,5隔离饲养5.1养殖奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼的苗种、成鱼与越冬期的养殖均按NY/T5054的规定执行。5.2隔离措施5.2.1制定隔离保种制度，并严格执行，定期检查。522纯种繁殖用鱼池和供生产奥尼杂交鱼用鱼池要严格隔离。5.2.3奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼分区专池饲养，各区建立独立的进、排水系统，进、排水口安置过滤网，严防混杂。5.2.4不同来源、不同家系、不同世代的奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼要分池隔离饲养、越冬。6提纯复壮6.1选育方法6.1.1第一次筛选是在苗种培育结束时进行生长优势的个体选择，

7、选留群体数量(总数的2/3,6.1.2第二次筛选是鱼种培育到100g/尾左右的鱼种时，选留符合SC1042和SC1027的规定，表型优良、生长快的个体。6.1.3第三次筛选是在后备亲鱼人池越冬时，选留符合SC1042和SC1027的规定及生长快的个体。6.1.4第四次筛选是在翌年春出越冬池时，严格按照SC1042,SC1027和SC/T1046的规定进行，并放人产卵池繁殖。6.2品种提纯采用混合选择和家系选择相结合的方法。混合选择是从原品种繁殖的后代中，选出符合SC1042,SC1027和SC/T1046的

8、规定、表型优良的个体，建立5-6个家系，分池饲养，培育成亲鱼。对所建的每个家系留1000尾(雌800尾，雄200尾)以上的优良个体，进行同代同血缘的同质选配，对后代进行精心培育，然后在苗种、100g/尾鱼种时、人池越冬前、春季出池时四个阶段按选育目标进行去劣留优。如此经四个世代筛选，最后选出2^-3个优良的家系。6.3复壮6.3.1选择性状良好，生长快，繁殖力强的不同家系，进行配对繁殖。子代按5.2.3隔离饲养。