细胞生物实验技术和细胞的物质基础

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1、细胞生物学和遗传学教研室李红医学生物实验学教材:医学生物实验学（自编）参考书:医学生物学，杨抚华，四川科学技术出版社,第五版医学生物学,傅松滨,人民卫生出版社,第六版教材内容学习方法1.预习-听课-复习2.归纳总结，记笔记，理解性记忆第一章细胞生物学实验技术一、显微镜技术显微镜与分辨率分辨率，即极限分辨率，也即两点间的最小距离R人眼=0.07mmR光镜=0.2umR电镜=0.2nm光学显微镜技术普通光学显微镜荧光显微镜相差显微镜激光扫描共焦显微镜普通光学显微镜HE染色：苏木精—染核—蓝；伊红—染质—红荧光显微镜常用荧光染料：吖啶橙：DNA--绿色；RNA--红色DAPI：

2、DNA—兰色碘化丙啶（PI）：DNA—红色异硫氰酸（FITC）：黄绿色罗丹明：红色相差显微镜物镜里增加相板，聚光镜上增加环形光阑，相位差转变为振幅差。相差光圈（位于聚光镜上）应与不同放大倍数的物镜匹配phL—X4ph1phC—X20X10ph2—X40BF（明视野）激光扫描共焦显微镜在荧光显微镜的基础上加上激光扫描装置，以单色激光为光源，使样品被激发出荧光，通过计算机图像处理，从而得到微细结构的荧光图像电子显微镜技术透射电镜扫描电镜分析电镜超高压电镜电子枪发射电子作为电镜的照明光源样品：超薄切片、冷冻制样、负染色、真空渡膜、冷冻蚀刻电子显微镜扫描电镜第二章细胞的物质基础1

3、．原生质（protoplasm）:细胞中的生命物质，由细胞质（包括质膜）和细胞核组成。2．元素组成主要元素：C.H.O.N4种少量元素：S.P.Na.K.Ca.CL.Mg.Fe8种微量元素：Cu.Zn.Mn.Co.I.Br.F.Si.Sr.Ba10种化合物有机化合物无机化合物水无机盐自由水：细胞生命活动的内环境细胞各种代谢反应的场所：维持渗透压和pH，保障细胞正常生理活动糖类脂类蛋白质核酸维生素分子量巨大、结构复杂、具有生物活性——生物大分子（biologicalmacromolecules）结合水：与许多分子结合构成细胞结构的组成部分一、小分子物质（一）水（二）无机盐和

4、离子（三）有机小分子二、生物大分子（一）蛋白质1.蛋白质的结构（1）氨基酸（aminoacid）（2）多肽链（polypeptidechain）①肽键：②氨基酸残基：③主链和侧链：主链：指各α碳原子间以肽键相接的长链。侧链：指与各氨基酸残基相连的R基团。（3）蛋白质的分子结构①一级结构：氨基酸排列顺序②二级结构：三种：a螺旋结构（右手螺旋），β折叠片层，三股螺旋。③三级结构：④四级结构：返回请等候动画......返回请等候动画......2.蛋白质的类型按蛋白质分子组成单纯蛋白质：分子组成除氨基酸没有别的组分。如：清蛋白、组蛋白等结合蛋白质：由蛋白质和其它化合物结合而成。

5、如：糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、色蛋白、磷蛋白按分子形状球状蛋白质：分子呈球状或椭球状，多数蛋白为球状蛋白。如：酶蛋白、激素蛋白、抗体蛋白等纤维状蛋白：分子呈长纤维状。多属结构蛋白，起支持作用。如：角蛋白、胶原蛋白等3.蛋白质在生命活动中的作用（1）结构和支持作用：（2）催化作用：（3）传递和运输作用：（4）运动功能：（5）防御作用：（6）调节作用：（二）核酸：1.核酸的化学组成：由核苷酸（nucleotide）组成。3ˊ,5ˊ-磷酸二酯键2.核酸的种类3.DNA分子的结构与功能（1）DNA的一级结构：脱氧核苷酸的排列顺序。（2）DNA的空间结构：基本形式是双螺旋结构。①含义

6、：由两条方向相反的DNA单链互相平行以右手螺旋方向，沿假想轴缠绕而成的双螺旋结构分子。②磷酸和脱氧核糖位于双螺旋的外侧，形成DNA的骨架，碱基位于双螺旋的内侧。③特征数据：3.4nm螺距，10bp,d=2nm④A=T,G=C;G+A=C+T（3）DNA分子的功能复制（replication）:由一个亲代分子形成两个DNA分子的过程，每个子代分子都与亲代分子完全相同。转录（transcription）：以DNA为模板合成RAN的过程。本节课重点:各种显微镜的功能区别DNA双螺旋结构模型蛋白质的一、二、三、四级结构实验一细胞的化学成分目的要求1.掌握光镜的使用方法。2.掌握生

7、物绘图的方法。3.了解细胞的某些化学成分在细胞内的分布4.学习显示细胞内某些化学成分的方法1、照明部分2、光学部分3、机械部分生物绘图铅笔线表示细胞结构轮廓点表示明暗程度图全称位于图的正下方放大倍数标于图全称下标注线水平向右引（10×40）碳水化合物的观察用刀片切取马铃薯块茎一小片，制作临时装片低倍镜观察---可见薄壁细胞中充满大小不等的卵圆形或圆锥形的颗粒，即淀粉粒高倍镜观察---淀粉粒具层纹结构吸革兰氏碘液1滴于盖片一测---另一侧用吸水纸吸去多余的水分，使碘液很快渗入细胞---上述颗粒遇碘液即变蓝色。核酸的观察甲基绿染液