种猪场猪瘟净化技术规范（定稿）

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1、ICS65.020.30B41DB37山东省地方标准DB37/TXXXXX—XXXX种猪场猪瘟净化技术规范TechnicalRegulationofEradicationofClassicalSwineFeverinSwineBreedingFarmsXXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施山东省市场监督管理局发布DB37/XXXXX—XXXX目次前言II1范围12规范性引用文件13术语和定义14检测方法24.1仪器24.2耗材24.3试剂24.4猪瘟病原检测24.5猪瘟抗体检测35净化群建立35.1

2、净化策略35.2净化前的准备工作35.3带毒情况摸底调查35.4免疫45.5监测与淘汰阶段45.6净化场的评估与认定56净化猪群的维持56.1免疫56.2监测57综合生物安全措施67.1合理的猪场选址67.2生产模式67.3饲养管理67.4消毒措施67.5无害化处理措施67.6有害生物防治67.7档案管理7附　录　A（资料性附录）猪瘟免疫无疫评估实验室检测方法及抽样要求8附　录　B（资料性附录）猪瘟净化评估实验室检测方法及抽样要求99DB37/XXXXX—XXXX前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规

3、则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省动物疫病预防与控制中心、山东省畜牧总站、山东汇众兽医科技服务公司。本标准主要起草人：李云岗、张栋、张月、周开锋、汪洋、楚遵峰、王士荣、王敏、曹振山、刘波。9DB37/XXXXX—XXXX种猪场猪瘟净化技术规范1　范围本标准规定了种猪场猪瘟净化的检测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持和综合生物安全措施。本标准适用于种猪场猪瘟净化。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日

4、期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T17823　集约化猪场防疫基本要求GB/T17824.2　规模猪场生产技术规程GB/T16551　猪瘟诊断技术GB/T27540　猪瘟病毒实时荧光RT-PCR检测方法GB/T34729　猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法NY/T541　兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T1568　标准化规模养猪场建设规范NY/T1958　猪瘟流行病学调查技术规范DB37/T2384　种猪场消毒技术规

5、范NY/T1168　畜禽粪便无害化处理技术规范《病死及病害动物无害化处理技术规范》　农医发〔2017〕25号3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1　猪瘟　ClassicalSwineFever，CSF由黄病毒科瘟病毒属猪瘟病毒(CSFV)引起的一种猪的高度接触性、出血性和致死性传染病。3.2　净化　eradication在某一限定地区或养殖场内，根据特定疫病的流行病学调查结果和疫病监测结果，采取一系列措施，及时发现并淘汰各种形式的感染动物，达到消灭和清除传染源的过程。3.3　净化评估　eradica

6、tionevaluation9DB37/XXXXX—XXXX各级动物疫病预防控制机构或其它具有公信力的第三方机构对依法开办的规模化养殖场是否符合动物疫病净化条件所进行的审查、认证等活动。1　检测方法1.1　仪器1.1.1　荧光PCR检测仪。1.1.2　PCR仪和凝胶成像系统（根据实验室条件选择，替换4.1.1）。1.1.3　高速台式冷冻离心机：可控温至4℃、离心速度可达12000r/min以上。1.1.4　组织研磨器或者研钵。1.1.5　普通冰箱。1.1.6　微量移液器：0.2μL～2μL，1μL～10μL，

7、10μL～100μL，20μL～200μL，100μL～1000μL。1.1.7　酶标仪。1.1.8　恒温箱。1.1.9　高压灭菌锅。1.2　耗材1.2.1　1.5mL离心管。1.2.2　0.2mLPCR薄壁管。1.2.3　酶标板，移液器吸头。1.3　试剂1.3.1　除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T6682的要求。1.3.2　商品化RNA抽提试剂，于4℃保存。1.3.3　无水乙醇，-20℃预冷。1.3.4　75%乙醇，无水乙醇和双蒸水配制，-20℃预冷。1.3.5　dNTP

8、s：含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10mmol/L，-20℃保存，避免反复冻融。1.3.6　普通PCR引物参照GB/T16551。1.3.7　荧光PCR引物和探针参照GB/T27540。1.3.8　酶标检测试剂等效采用GB/T34729商品化试剂盒。1.4　猪瘟病原检测1.4.1　采样准备扁桃体采样器、灭菌0.5mL离心管、灭菌棉签或牙签、3%NaOH溶液、手电筒、记号笔、采样记录表等。