种猪场伪狂犬病净化技术规范（定稿）

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1、ICS65.020.30B41DB37山东省地方标准DB37/TXXXXX—XXXX种猪场伪狂犬病净化技术规范TechnicalRegulationofEradicationofPseudorabiesinSwineBreedingFarmsXXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施山东省市场监督管理局发布DB37/XXXXX—XXXX目次前言III1范围12规范性引用文件13术语和定义14检测方法24.1仪器24.2耗材24.3试剂24.4核酸检测24.5血清学检测25净化群的建立35.1净化策略35.2感染状况普查阶段35.3强化免疫阶段35.4检测

2、与淘汰阶段45.5强制净化阶段45.6假定健康阶段45.7净化场的评估阶段46净化场的维持阶段46.1免疫56.2监测56.3引种检疫56.4生产记录不佳的种猪检测57综合生物安全措施57.1合理的猪场选址57.2生产模式57.3饲养管理57.4消毒措施57.5无害化处理措施67.6有害生物防治措施67.7其它生物安全措施67.8档案管理6附　录　A（资料性附录）猪伪狂犬病免疫无疫评估实验室检测方法及抽样要求7附　录　B（资料性附录）猪伪狂犬病净化评估实验室检测方法及抽样要求88DB37/XXXXX—XXXX前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草

3、。本标准由山东省畜牧兽医局提出并监督实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省动物疫病预防与控制中心、山东省畜牧总站、山东汇众兽医科技服务公司。本标准主要起草人：李云岗、张栋、张月、周开锋、楚遵峰、汪洋、王士荣、王敏、曹振山、刘波。8DB37/XXXXX—XXXX种猪场伪狂犬病净化技术规范1　范围本标准规定了种猪场猪伪狂犬病净化的检测方法、净化群的建立、净化场的维持及综合生物安全措施。本标准适用于种猪场猪伪狂犬病净化。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注

4、日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T17823　集约化猪场防疫基本要求GB/T17824.2　规模猪场生产技术规程GB/T18641　伪狂犬病诊断技术GB/T35911　伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法NY/T1168　畜禽粪便无害化处理技术规范NY/T1568　标准化规模养猪场建设规范DB37/T2384　种猪场消毒技术规范《病死及病害动物无害化处理技术规范》　农医发〔2017〕25号《跨省调运乳用种用动物产地检疫规程》　农牧发〔2019〕2号3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1　伪狂犬病　Pseudorabies伪

5、狂犬病是由疱疹病毒科疱疹病毒Ⅰ型伪狂犬病毒（PRV）引起的猪及多种家畜和野生动物的传染病。3.2　净化　eradication对种猪场采取一系列措施，达到消灭和清除猪伪狂犬病的过程。在某一限定的种猪场内，根据猪伪狂犬病的监测结果，及时发现并淘汰感染猪只，使种猪群中猪伪狂犬病逐渐被清除的疫病控制方法。3.3　猪伪狂犬gE基因缺失疫苗　PseudorabiesgEgene-deletedvaccine利用猪伪狂犬gE基因缺失病毒株所制成的疫苗。8DB37/XXXXX—XXXX1　检测方法1.1　仪器1.1.1　荧光PCR检测仪。1.1.2　PCR仪和凝胶成像系统（

6、根据实验室条件选择，替换4.1.1）。1.1.3　高速台式冷冻离心机：可控温至4℃、离心速度可达12000r/min以上。1.1.4　组织研磨器或者研钵。1.1.5　普通冰箱。1.1.6　微量移液器：0.2μL～2μL，1μL～10μL，10μL～100μL，20μL～200μL，100μL～1000μL。1.1.7　酶标仪。1.1.8　恒温箱。1.1.9　高压灭菌锅。1.2　耗材1.2.1　1.5mL离心管。1.2.2　0.2mLPCR薄壁管。1.2.3　酶标板,移液器吸头。1.3　试剂1.3.1　除非另有说明，在检测中使用的试剂均为分析纯，实验室用水应符合

7、GB/T6682的要求。1.3.2　商品化DNA抽提试剂，于4℃保存。1.3.3　无水乙醇，-20℃预冷。1.3.4　75%乙醇，无水乙醇和双蒸水配制，-20℃预冷。1.3.5　含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10mmol/L，-20℃保存，避免反复冻融。1.3.6　普通PCR引物参照GB/T18641。1.3.7　荧光PCR引物和探针参照GB/T35911。1.3.8　酶标检测试剂等效采用PRV-gE基因缺失疫苗配套的商品化鉴别检测试剂。1.4　核酸检测活猪采集扁桃体或全血，病死猪或流产胎儿采集大脑、扁桃体、淋巴结、肺脏等组织。依据GB/T1864

8、1或GB/T35911，使用PCR方法